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@resuvet_ Fecundação e Clivagem Fecundação: o espermatozoide precisa se tornar apto para fecundar o oocito. Portanto, precisa passar por algumas fases (chamado de capacitação espermática), sendo elas: transporte do espermatozoide no trato genital feminino; Interações entre os espermatozoides e a zona pelúcida; Adesão e fusão de espermatozoide e oocito; Ativação oocitária; Primeira Etapa: Capacitação Espermática O epidídimo é dividido em cabeça, corpo e cauda, enquanto o SPTZ está na cauda, seu metabolismo esta diminuído e sua atividade está restrita, pois precisará dessa energia para encontrar o óvulo. Esses fatores são importantes para que haja uma maior longevidade, essa longevidade varia de espécie para espécie. No momento da ejaculação ocorre contato com líquidos seminais que vai aumentar a motilidade espermática, e vai ter ação de fatores capacitantes e incapacitantes. Essa contagem pode ser subjetiva ou computadorizada. Capacitantes: mais espermatozoides aptos a capacitar. Incapacitantes: que incapacitam de capacitar. Ao chegar no trato genital feminino ocorre capacitação, que é o processo para adquirir capacidade de fertilização. O SPTZ precisa se manter viável até encontrar o oocito. O momento ideal da capacitação é quando o SPTZ fica próximo ao oocito, porque se ele ocorrer muito longe, o SPTZ não aguenta chegar até o oocito. Lembrando que é uma situação que ocorre no trato reprodutivo da fêmea. Os reservatórios espermáticos, é onde o SPTZ fica até ocorrer a capacitação, eles ficam normalmente na região do istmo. (É uma alternativa para manter a longevidade maior do SPTZ). DIVISÃO DA TUBA UTERINA: infundíbulo, ampola e istmo. Então ocorre o processo de ovulação, próximo a ampola (no tempo adequado) os espermatozoides são liberados dos reservatórios espermáticos para que dê início a fertilização, o momento que ocorre a capacitação. O que muda no espermatozoide capacitado? - Ocorre perda ou diminuição do peso molecular de proteínas - metilação de fosfolipídios - diminuição na proporção de esteroides - migração de proteínas e lipídios para a região do acrossoma Resumindo: Ocorre alterações bioquímicas e de membrana plasmática; retirada dos fatores incapacitantes; tornar a membrana do espermatozoide mais permeável para digerir as células da zona pelúcida. Segunda Etapa: Hiperativação Albumina- associada com a retirada de colesterol da membrana ➡ Instabilidade de membrana ➡aumento dos poros ➡torna-se mais permeável. Glicosaminoglicanos + Ca ➡ Ativando Fosfolipase A2 ➡ HIPERATIVAÇÃO Resumindo: Todo esse processo de desestabilização da membrana permite que o cálcio entre pra dentro da célula e gere hiperativação (do espermatozoide). O influxo de cálcio para dentro da célula é importante para gerar hiperativação. Depois que ocorre a hiperativação, ocorre a reação acrossômica. Terceira Etapa: Reação Acrossômica Ocorre quando o espermatozoide está aderido à zona pelúcida, onde vai ocorrer liberação de enzimas que vão fazer digestão local e parcial da zona pelúcida e facilitar a passagem do espermatozoide. Se essa reação acrossômica ocorrer antes, ele não irá penetrar no oocito. O espermatozoide possui uma região chamada de conteúdo acrossoma, que é rico em enzimas. @resuvet_ O espermatozoide: o conteúdo acrossoma é a principal riqueza do SPTZ, pois é rico em enzimas que vão ajudar na digestão/degradação da zona pelúcida. O que essas enzimas do conteúdo acrossoma fazem? Facilitar a passagem do sptz no espaço entre a membrana plasmática do oocito e a zona pelúcida. Em contato com a zona pelúcida: reações bioquímicas que levam a fusão da membrana plasmática com membrana acrossoma externa. É chamado de vesiculação da região acrossoma do espermatozoide. Quarta Etapa: Fertilização A fecundação é: dois gametas haploides fundem-se e produzem um indivíduo. É a fusão entre o espermatozoide e o oócito na região da ampola do oviduto. Os espermatozoides são atraídos por fatores termotácticos, como temperatura e quimiotácticos que são substâncias liberadas pelas células do cumulus oophurus. Quatro passos para que a fertilização seja efetiva: 1. Sptz com acrossoma intacto deve se ligar de forma espécie-especifica a camada externa do oocito (ZP); 2. depois de ligado, ele deve sofrer a reação acrossômica (R.A); 3. Depois da R.A, o sptz tem que penetrar na camada extracelular do oocito e alcançar o espaço perivitelino; 4. Depois de alcançar esse especo, o sptz tem que se fundir a membrana plasmática do oocito e se ligar a ela; Quinta Etapa: Penetração Na Zona Pelúcida Na zona pelúcida possui glicoproteínas: ZP1, ZP2 e ZP3. O espermatozoide irá se ligar a pontos específicos, no caso na região ZP3, principalmente. Quando ele se fixa na zona pelúcida, ele se fixa na região apical da membrana plasmática da cabeça do espermatozoide. Após a reação acrossômica, as proteínas intra-acrossomais se ligam na zona pelúcida. A união e fusão do espermatozoide com a membrana plasmática do oocito: as proteínas que se aderem a membrana da Zona pelúcida são chamadas de ADAM, o local de adesão dessas membranas sofre degradação com ação de enzimas de integrinas e tetraspaninas, essas enzimas vão degradar ainda mais a zona pelúcida, para que o espermatozoide fecunde o oocito. A entrada do sptz é equatorial (não entra com a cabeça). No momento em que o espermatozoide está aderido, ocorre aumento dos batimentos da cauda, no momento @resuvet_ que o espermatozoide passa a entrar no oocito, ocorre a fusão das membranas e enrijecimento da cauda do espermatozoide. IMPORTANTE: 1. Reconhecimento entre membranas e ação de proteínas 2. Aposição ou adesão das membranas, pela interação das proteínas de ambas as partes e lipídios, gerando uma alteração irreversível; 3. Ocorre uma mistura de lipídios e formação de uma bicamada que possibilitará uma formação de um citoplasma entre as 2 células (membrana para o zigoto). Depois dessas etapas o que acontece? - Ocorre a ativação do oocito, que é induzida pela entrada do pró núcleo masculino; - Liberação de grânulos corticais no espaço perivitelino; - Bloqueio a polispermia; - Inicio da condensação da cromatina paterna; Bloqueio a Polispermia É o que impede a entrada de outros espermatozoides no oocito. Após a fertilização, ocorre modificações estruturais e moleculares da membrana plasmática. O cálcio induz a liberação de granulócitos corticais que inativam os receptores para outros espermatozoides na zona pelúcida. CONSIDERAÇÕES IMPORTANTES: Para que ocorra FERTILIZAÇÃO, o oocito precisa estar em metáfase II na da segunda meiose. Após todos os processos de fertilização, o oocito continua a meiose e libera o segundo corpúsculo polar. Fases Da Fertilização Primeira fase: penetração da corona radiata; Segunda fase: penetração da zona pelúcida; Terceira fase: fusão das membranas do espermatozoide com o ovócito; Quarta fase: formação dos pró-núcleos masculino e feminino; Resultados Da Fertilização Término da 2° divisão meiótica do ovócito; Restaura o número diploide normal da célula; Promove variação de espécies; Determinação do sexo do embrião; Causa ativação metabólica do ovócito; início a clivagem. @resuvet_ Clivagem O zigoto começa a se dividir por mitose. Até a fase de mórula ocorre na tuba uterina. Forma-se um pequeno agregado celular, similar a uma amora arredondada, chamado de mórula. Ocorre achatamento dos blastômeros + polarização = compactação formando a blástula. Estágio de oito a dezesseis células (estagio de quatro células no suíno) ➡ o embrião e transportado para dentro do útero e continua a se desenvolver. Observações: - Importância das secreções uterinas e dos ovidutos (histotrofo ou leite uterino) para esse desenvolvimento inicial (nutrir até a implantação); - Entre a fasede mórula e blastocisto, ocorre aumento da taxa metabólica (precisa de mais energia para se desenvolver); Ao cortar a mórula: - Células internas: dará origem a massa celular interna. - Células externas: dará origem ao trofoderma embrionário Dará origem a blastocele, que é uma cavidade. Neste momento, ainda está envolvido pela zona pelúcida, que serve como proteção, chegará o momento em que essa zona pelúcida se desprende. Eclosão da zona pelúcida: para se desenvolver/implantar. Ocorre aumento da pressão osmótica que expande o blastocisto e eclode a zona pelúcida para que possa se implantar e desenvolver. @resuvet_
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