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22/03/2019 1 pH e Tampões Biológicos PhD Diego Viana Gomes Objetivos • Descrever as características da molécula da água, suas interações e importância. • Descrever conceitos de polaridade. • Descrever conceitos pH. • Descrever conceitos ligações e interações químicas. 22/03/2019 2 Tipos celulares Procariótica (bactérias) Eucariótica (animal x vegetal) Tipos celulares • Procariótica (bactérias) • 2um • Envelope celular • Membrana externa e membrana plasmática • Peptidioglicanos (camada medial composta por polímeros) • Nucleóide contem molécula de DNA e o citoplasma 22/03/2019 3 Tipos celulares • Eucariótica (animal x vegetal) • Possui núcleo e outras organelas envoltas por membranas com funções específicas: • Mitocôndrias; retículo endoplasmático; complexo de Golgi; lisossomos • Animal • 5 a 30um • Vegetal • 10 a 100um • Vacúolos e cloroplastos 22/03/2019 4 Ponte de hidrogênio • Atração entre um átomo eletronegativo (receptor de H: Oxigênio, Nitrogênio) e um átomo de Hidrogênio ligado covalentemente a outro átomo eletronegativo (O, N). • Atração eletrostática entre o átomo de oxigênio de uma molécula de água e o hidrogênio de outra. 22/03/2019 5 Por que o gelo flutua na água? FIGURA 2‐2 Ligações de hidrogênio no gelo. Água como solvente x NaCl 22/03/2019 6 Polaridade Átomo central Possui par de e livre polar N possui par de e livre No Ligações = No de Atomos iguais Apolar No Ligações ≠ No de Atomos iguais Polar Água Amônia Metano Interação eletrostática da Água com solutos carregados (Hidrofílico x Hidrofóbico) • H2O é um solvente polar • Compostos carregados e polares são dissolvidos pela água • Hidrofílicos (gosta de água) • Solventes não polares (clorofórmio/benzeno) são pobres para biomoléculas polares, mas dissolvem fácil moléculas não polares (lipídios e graxas) • Hidrofóbicos (não gosta de água – medo) 22/03/2019 7 Hidrofílico • NaCl + H2O • Substitui Soluto-Soluto por Soluto-Água Hidrofóbico • Gases não polares são pouco solúveis: • O2, N2, CO2 • Hemoglobina e Mioglobina • Compostos anfipáticos (sabão) • Parte hidrofílica + Parte hidrofílica • Micelas – interações hidrofóbicas 22/03/2019 8 22/03/2019 9 Compostos anfipáticos em solução aquosa Salto de prótons. 22/03/2019 10 A água pura é levemente ionizada Apesar de geralmente se mostrar o produto de dissociação da água como H+, os prótons livres não existem em solução; os íons hidrogênio formados em água são imediatamente hidratados para formar íons hidrônio (H3O +). Constante de equilíbrio, Keq 22/03/2019 11 Keq da água A escala de pH indica as concentrações de H+ e OH- O produto iônico da água (Kw) é base da escala de pH. É um meio de designar a concentração de H+ e OH- de qualquer solução aquosa. 22/03/2019 12 pH – Concentração de hidrogênio iônica total • Meio ácido: quantidade de hidrônios > (maior) que a de hidróxidos; • pH < 7, o meio será ácido (indica [H+] > [OH-]) • Meio neutro: quantidade de hidrônios = (igual) a de hidróxidos; • pH = 7, o meio será neutro (indica [H+] = [OH-]); • Meio básico: quantidade de hidrônios < (menor) que a de hidróxidos • pH > 7, o meio será básico (indica [H+] < [OH-]); 22/03/2019 13 O pH afeta a estrutura e a atividade de macromoléculas biológicas; por exemplo, a atividade catalítica das enzimas é extremamente dependente do pH “Eu queria descobrir o que aconteceria com um homem se ele fosse mais ácido ou mais alcalino[...] Poder-se-ia, claro, primeiro fazer experimentos em um coelho. Na realidade, foram feitos alguns trabalhos nesse sentido, mas é difícil, de qualquer forma, ter certeza de como um coelho se sente. Na verdade, alguns coelhos não levavam a sério a possibilidade de cooperar comigo.” Eles se alcalinizaram por meio de hiperventilação e ingestão de bicarbonato de sódio, o que os deixou com dificuldade respiratória e uma cefaleia muito forte. Haldane chegou à conclusão de que se comesse cloreto de amônio, ele seria degradado no organismo, liberando ácido clorídrico e amônia. No fígado, a amônia poderia ser convertida em ureia, um produto inócuo. O ácido clorídrico se combinaria com o bicarbonato de sódio, que existe em todos os tecidos, produzindo cloreto de sódio e dióxido de carbono. Esse experimento levaria a uma respiração ofegante que mimetizaria a acidose diabética e o estágio final da doença renal. 22/03/2019 14 Caso clínico Em indivíduos com diabetes melito não tratado, a falta de insulina, ou a insensibilidade à insulina (dependendo do tipo de diabetes), interrompe a captação de glicose do sangue para dentro dos tecidos e os força a usar os ácidos graxos armazenados como principal combustível. Devido a razões que serão descritas em detalhes posteriormente (ver Figura 24-31), a dependência de ácidos graxos leva ao acúmulo de altas concentrações de dois ácidos carbo-xílicos, o ácido β-hidroxibutírico e o ácido acetoacético (nível de 90 mg/100 mL no plasma sanguíneo, comparada com , 3 mg/100 mL nos indivíduos saudáveis; excreção urinária de 5 g/24 h, comparada com , 125 mg/24 h nos controles saudáveis). A dissociação desses ácidos diminui o pH do plasma sanguíneo para valores menores que 7,35, causando acidose. Acidose grave leva a sintomas como ce-faleia, vômitos e diarreia, seguido de estupor, convulsões e coma, provavelmente porque em pH mais baixos algu-mas enzimas já não funcionam otimamente. Quando um paciente apresenta glicose alta no sangue, baixo pH plas-mático e altos níveis de ácido β-hidroxibutírico e ácido ace-toacético na urina e no sangue, o diagnóstico mais provável é diabetes melito. Outras condições também podem produzir acidose. Je-jum e inanição forçam o uso dos estoques de ácidos graxos para produção de energia, com as mesmas consequências geradas pelo diabetes. Esforço físico exagerado, como cor-rida para atletas ou ciclistas, leva a um acúmulo temporário de ácido láctico no sangue. A deficiência renal leva a uma diminuição da capacidade de regular os níveis de bicarbo-nato. Doenças do pulmão (como enfisema, pneumonia e asma) reduzem a capacidade de eliminar o CO2 produzido por oxidação dos combustíveis nos tecidos, com o resultante acúmulo de H2CO3 . O tratamento da acidose é feito de acordo com a condição apresentada – insulina para pessoas com diabetes; esteroides ou antibióticos para pessoas com doenças pulmonares. Acidose grave pode ser revertida pela administração intravenosa de solução de bicarbonato. Acidose diabética • Falta de insulina diminui a captação de glicose • Aumenta a captação de ácidos graxos • Aumenta Ácidos carbônicos (ácido β-hidroxibutírico e o ácido acetoacético) Plasma Diabetes=90 mg/100mL; saudável=3 mg/100mL • A dissociação desses ácidos diminui o pH do plasma sanguíneo para valores menores que 7,35, causando acidose. • Acidose grave leva a sintomas como cefaleia, vômitos e diarreia, seguido de estupor, convulsões e coma, provavelmente porque em pH mais baixos algumas enzimas já não funcionam otimamente. 22/03/2019 15 Outras condições de acidose • Jejum / Inanição – ácidos graxos como energia • Esforço físico exagerado - acúmulo temporário de ácido láctico no sangue. • A deficiência renal leva a uma diminuição da capacidade de regular os níveis de bicarbonato. • Doenças do pulmão (como enfisema, pneumonia e asma) reduzem a capacidade de eliminar o CO2 produzido por oxidação dos combustíveis nos tecidos, com o resultante acúmulo de H2CO3 . Tampões biológicos • Tamponamento contra alterações de pH nos sistemas biológicos • Tampões são sistemas aquosos que tendem a resistir às alterações no pH quando pequenas quantidades de ácido (H+) ou base (OH-) são adicionados. • Temos um pH constante nas células e tecidos • Histidina (aminoácido) – pH 6.0 • Amônia – ureia • Fosfato (H2PO4) – doador; (HPO-24) • Bicarbonato 22/03/2019 16 Você acha que as soluções tampão são importantes para os sistemas biológicos? • íon amônio, NH4 (pKa=9,25)• ácido fosfórico, H2PO4 (pKa=6,86) • ácido acético CH3COOH(pKa=4,76) Ex: Corrida (Lactato – CO2) • Bicarbonato (HCO3 -) • Ácido carbônico (H2CO3 )
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