Listas Microbiologia

Prévia do material em texto

Centro de Ensino Unificado do Distrito Federal – UDF
Microbiologia Geral e Clínica
Prof. Helder Andrey
Maycon de Assis costa
RGM: 21534802
LISTA 01
1. Diferencie a organização do citoplasma em células procarióticas e eucarióticas. Qual (is) a(s) organela(s) comum(ns) entre estas duas células, e quais as diferenças nas estruturas entre esta(s) organela(s)? Enquanto as células eucariontes têm estruturas complexas, formadas por membranas internas, citoesqueleto e um núcleo, as células procariontes não contém núcleo e outras organelas ligadas à membrana. A organela comum nas células procariótica e eucariótica e o ribossomo que e maiores e mais complexa nas células nas células eucariontes e menores e menos complexas nas células procariontes.
2. Caracterize a organização do material genético das células procarióticas. Especifique a localização do material genético cromossomal e extracromossomal. A principal característica de uma célula procarionte é a ausência de um núcleo delimitado. Nessas células, observa-se apenas um local nucleoide contendo DNA circular DNA cromossômico não associado a proteínas histonas. Podem existir ainda pequenas moléculas de DNA livres no citoplasma, conhecidas como plasmídeos, que são capazes de se reproduzir independentemente do DNA cromossômico.
3. Descreva a função da parede celular bacteriana. Descreva a estrutura dos três tipos de paredes estudados em sala de aula (Gram-positiva, Gram-negativa e álcool-resistente). Lembre-se de especificar a composição química das paredes, ressaltando a importância de moléculas úteis para a identificação de bactérias, bem como possíveis toxinas presentes na parede celular. Especifique também como as diferenças estruturais nas paredes celulares determinam a resistência física, bem como a difusão de substâncias através da parede.  Tem como principais funções garantir a proteção celular e dar formato à célula bacteriana. Há diferentes graus de permeabilidade na parede dos microrganismos Gram-positivos e Gram-negativos. As bactérias Gram-positivas retém o cristal violeta devido à presença de uma espessa camada de peptidoglicano polímero constituído por açúcares e aminoácidos que originam uma espécie de malha na região exterior à membrana celular das bactérias em suas paredes celulares, apresentando-se na cor roxa. Já as bactérias Gram-negativas possuem uma parede de peptidoglicano mais fina  que não retém o cristal violeta durante o processo de descoloração e recebem a cor vermelha no processo de coloração final. As bactérias ácido-álcool resistentes não podem ser classificadas segundo a tensão de Gram entretanto podem ser tingidas com alguns corantes concentrados combinados com calor. Uma vez tingida tem a capacidade de resistir a descoloração de uma combinação de álcool-ácido, o qual é o descolorante mais comum nos protocolos de coloração de bactérias, de onde vem o nome álcool-ácido resistente A alta concentração de ácido micólico na parede celular é a causante, como as bactérias do gênero Mycobacterium, da baixa absorção e alta retenção da coloração fucsina
4. Descreva as etapas do procedimento de coloração de Gram, especificando as características das paredes celulares em cada etapa do procedimento. 
Confeccionar o esfregaço;
Corar com violeta de cristal por 60 segundos;
Lavar com esguicho de água destilada;
Cubrir com Iodo de Gram ou Lugol por 60 segundos;
Lavar com esguicho de água destilada;
Descorar com álcool a 95%, ou acetona, 10-20 segundos;
Lavar com esguicho de água destilada;
Corar com safranina por 60 segundos
Lavar com água destilada, secar e observar ao microscópio.
O primeiro corante cristal-de-metila penetra na bactéria assim como o mordente Soluto de Lugol. Intracelularmente forma-se um complexo corante-iodo, insolúvel em água, que vai corar o protoplasma e a parede celular. A camada de peptidoglicano é maior em bactérias gram positivas, as gram negativas, por sua vez possuem pouco peptidoglicano e são coradas pelo vermelho de safranina.
5. Caracterize e diferencie as estruturas externas à parede celular: flagelos, fíbrias e pilli.
 Os pili são microfibrilas proteicas que se estendem da parede celular em muitas espécies Gram-negativas. Têm funções de ancoramento da bactéria ao seu meio e são importantes na patogénese. Um tipo especial de pilus é o pilus sexual, estrutura oca que serve para ligar duas bactérias, de modo a trocarem plasmídeos.
O flagelo é uma estrutura proteica que roda como uma hélice. Muitas espécies de bactérias movem-se com o auxílio de flagelos. Os flagelos bacterianos são completamente diferentes dos flagelos dos eucariotas.
6. Caracterize a composição química e a função do glicocálice bacteriano(cápsula).  função extremamente importante do glicocálice é o reconhecimento entre células e a adesão celular, que permite que as células unam-se umas às outras e também a outras moléculas. Dentre as glicoproteínas presentes no glicocálice que ajudam na união das células, destacam-se a fibronectina, vinculina e laminina.
7. Descreva a estrutura dos biofilmes bacterianos, e qual a importância destas estruturas para a proteção de bactérias. Biofilmes são um conjunto de micro-organismos emaranhados em uma matriz de polímero orgânico que estão aderidos a uma superfície. Assim, para que os biofilmes se formem é indispensável a presença de três ingredientes básicos: micro-organismos, glicocálix e superfície
8. Descreva as formas morfológicas assumidas pelas bactérias: cocos (evariações), bacilos e bactérias espiraladas.  As bactérias apresentam vários tipos morfológicos, sendo os mais vulgares os cocos forma esférica, os bacilos forma de bastonete, os espirilos forma espiralada .
9. Caracterize a estrutura dos endósporos bacterianos, e especifique por que são estruturas muito resistentes. Descreva, de forma simplificada, as principais etapas da formação dos endósporos. 
Os endósporos bacterianos são estruturas das bactérias, cuja função é proporcionar resistência e garantir a sobrevivência do organismo em ambiente inadequado. Possuem este nome, pois são produzidos no interior das bactérias. Os endósporos são produzidos pelas bactérias quando o meio em que se encontram está desfavorável a sua sobrevivência. Possuem parede grossa, sendo uma estrutura desidratada. Ela vai ser hidratada novamente somente quando encontrar um ambiente adequado a sua reprodução. São produzidos a partir da duplicação do DNA ácido desoxirribonucleico. 
10.Descreva como ocorre a reprodução bacteriana por fissão binária. Especifique como pode ocorrer a variabilidade genética neste processo. Reprodução por Cissiparidade ou Fissão Binária. Fissão binária é o nome dado ao processo de reprodução assexuada dos organismos unicelulares que consiste na divisão de uma célula em duas por mitose, cada uma com o mesmo genoma da célula mãe
11.Caracterize as principais etapas da curva de crescimento bacteriano.
Fase de latência (ou LAG) Durante o período de tempo que se segue à inoculação do meio de cultura, as células do microrganismo têm normalmente que se adaptar ao novo meio
Fase exponencial (ou EXP) Após um curto período de aceleração, a taxa de crescimento da população microbiana torna-se constante, isto é, as células sofrem divisão e o seu número duplica após um determinado intervalo de tempo
Fase de desaceleração Durante esta fase ocorre um declínio da taxa específica máxima de crescimento, em resultado da diminuição para valores limitantes do crescimento da concentração de um ou mais nutrientes essenciais ao metabolismo celular e ou do aumento da concentração de produtos do metabolismo tóxicos para as células.
Fase estacionária Na fase estacionária o esgotamento de um nutriente essencial eou a acumulação de produtos inibidores do metabolismo leva a que divisão da população pare.
Fase de morte Durante a fase de morte ocorre a perda irreversível da capacidade de divisão celular morte celular. Tal origina um decréscimo da concentração de células viáveis na população microbiana ao longo do tempo.
12.Caracterize e diferencie as formas de transferênciahorizontal de material genético: transformação, transdução e conjugação. Mencione a importância destes processos para a variabilidade genética em bactérias, e a importância destes processos (principalmente a conjugação) na geração de bactérias resistentes a antibióticos. As bactérias não apresentam nenhum tipo de reprodução sexuada, e sim recombinação genética que pode ocorrer por transformação, transdução ou conjugação. A transformação ocorre com algumas bactérias que conseguem absorver fragmentos de DNA que se encontram dispersos no meio. Esses fragmentos são incorporados ao material genético das bactérias transformando-as. Na transdução bacteriana ocorre troca de material genético entre bactérias com a participação de um bacteriófago. No caso da conjugação, é necessário o contato entre as células bacterianas, sendo que a doadora possui um plasmídio conjugativo, que possui genes que codificam. A conjugação é uma forma de recombinação genética entre as bactérias.
13.Descreva a estrutura celular básica dos fungos. Caracterize a constituição da parede celular, membrana plasmática, e citoplasma. O corpo dos fungos multicelulares é formado por hifas, que são filamentos delgados que em conjunto formam o micélio. Fungos possuem parede celular que contém quitina e, nesse aspecto, diferem das células vegetais. A parede celular, parede celulósica ou membrana esquelética celulósica, é uma estrutura de celulose resistente e flexível que delimita as organelas celulares numa célula vegetal. A membrana plasmática é formada, principalmente, por lipídios e proteínas. Os lipídios atuam garantindo a estrutura da membrana, enquanto as proteínas estão relacionadas com as principais funções desempenhadas por essa estrutura celular. O citoplasma é o espaço da célula compreendido entre a membrana plasmática e a membrana nuclear nos eucariotos. Nos procariotos, corresponde à totalidade do conteúdo limitado pela membrana.
14.Descreva os processos de reprodução sexuada e assexuada dos fungos. Os fungos reproduzem-se assexuada e sexuadamente. A reprodução assexuada pode ser:  brotamento seres unicelulares,  fragmentação do micélio, onde um micélio se fragmenta originando muitos outros e esporulação, acima dos corpos de frutificação estão os esporângios que produzem os esporos, estruturas imóveis e resistentes a ambientes desfavoráveis. Já a reprodução sexuada requer a fusão de duas hifas haplóides, quando isso não ocorre, originam-se hifas geneticamente distintas denominadas dicários.
15.Caracterize o processo de reprodução em leveduras. As leveduras podem se reproduzir sexuada ou assexuadamente. No primeiro caso, a reprodução se faz pela formação de ascosporos, ou seja, esporos contidos numa espécie de saco. A reprodução assexuada envolve dois processos interessantes: a mitose e a meiose. A mitose ocorre quando há bastante alimento disponível.
16.Defina fungos dimórficos. Os fungos dimórficos são os que apresentam mais de uma forma, sendo essas a de bolor, hifal, levedura ou filamentos, a forma de esporo também pode ser considerada.
17.Descreva a estrutura básica dos vírus. são constituídos por ácido nucleico, que pode ser o DNA ou o RNA, envolvido por um invólucro proteico denominado capsídeo, que além de proteger o material genético, combina-se quimicamente com receptores membranares das células parasitadas.
18.Descreva as características básicas dos ciclos reprodutivos dos vírus. Caracterize as principais fases da infecção, e diferencie os ciclos lítico e lisogênico. O ciclo de reprodução é lítico ou lisogênico. O lítico infecta a célula, assume o metabolismo se reproduzindo através disso e a deixa inativa; no ciclo lisogênico passa a participar da divisão celular ao infectar o seu ácido nucleico. No ciclo lítico, o vírus insere o seu material genético no da célula hospedeira e, diferentemente do ciclo lisogênico, passa a dominar o metabolismo da célula, destruindo-a no final do processo.
LISTA 2
1. Descreva os cuidados que devem ser tomados durante a coleta de amostras destinadas à análise microbiológica. Elaborar e viabilizar normas para colheita, conservação e transporte de material de interesse clínico. Estabelecer e executar rotinas microbiológicas, dentro dos padrões técnico científicos vigentes, que permitam o isolamento e identificação dos principais agentes infecciosos de importância clínica, por gênero e, se possível, por espécie Determinar a sensibilidade às drogas antimicrobianas. Efetuar o controle de qualidade de suas atividades e dos processos de esterilização. Divulgar e pôr em prática normas de biossegurança; · Participar junto com a Comissão de Controle de Infecção Hospitalar do rastreamento epidemiológico dos surtos de infecção hospitalar. Fornecer periodicamente dados relacionados com a etiologia das infecções hospitalares e da resistência às drogas.
2. Comente sobre as etapas iniciais de análise das amostras, antes dos processos de cultivo em meios de cultura, e por que estas análises iniciais são importantes. Localização adequada para os equipamentos de segurança em lugar visível de fácil acesso incluindo extintores de incêndio vistoriados regularmente. Realização anual de radiografia de tórax para os funcionários que se dedicam à rotina de tuberculose seguir as orientações do Programa Nacional de Controle de Infecção Hospitalar. Proibição de fumar, com advertência sobre aumento do risco de contaminação com microrganismos potencialmente patogênicos ou produtos químicos; risco de incêndio e inconveniência com relação aos colegas de trabalho. Recomendação quanto à inconveniência de comer e beber no local de trabalho, devendo haver área destinada para esse fim. Recomendação sobre o uso de avental, para proteção da pele e das roupas. Recomendações lavar as mãos frequentemente; prender os cabelos, não usar anéis e pulseiras, não usar roupa social de mangas compridas, não usar cosméticos gordurosos. Adoção de cuidados especiais na pipetagem e no manuseio de material contaminado. Advertência as vidrarias contaminadas devem ser colocadas em desinfetante químico hipoclorito a 1%, imediatamente após o uso, antes de serem lavadas e reutilizadas. Rotulação e datação de todos os vidros que contenham reagentes. Emprego de autoclave para material clínico, placas e tubos de cultura, antes de serem descartados no lixo hospitalar ou mesmo quando encaminhados para incineração. Desinfecção, com hipoclorito a 1% ou álcool a 70%, das bancadas e de outras superfícies de trabalho no início e ao final do expediente. Utilização de material descartável seringas, agulhas, luvas, toalhas
3. Diferencie bactérias fastidiosas de não-fastidiosas. As bactérias fastidiosas são seres heterotróficos que necessitam de nutriente s e vitaminas que são específicos para seu desenvolvimento, e não se desenvolvem bem em meios de cultura considerados convencionais. Fastidiosa significa algo que é maçante, fatigante. Dizemos que uma bactéria é fastidiosa pois não é fácil sua criação em meios de cultura, despendendo de meios maçantes para conseguir observá-las.
4. Por que é necessário obter culturas puras durante a avaliação microbiológica? A cultura pura de um dado microrganismo é uma cultura de células genética e morfologicamente idênticas. A imobilização das células num meio sólido torna possível a visualização do crescimento em massas celulares isoladas denominadas colónias. As colónias microbianas são caracterizadas por uma forma e tamanho que depende do próprio organismo, de condições ambientais como sejam da quantidade de oxigénio e de nutrientes disponíveis no meio de cultura e de outros parâmetros fisiológicos. Para obter uma cultura pura podem ser usadas as técnicas de riscado em meio sólido, espalhamento em meio sólido e incorporação
5. Diferencie os meios de enriquecimento, seletivo e diferencial. Explique qual a função de cada um desses meios, e quando eles são utilizados nas rotinas de análise microbiológica. Meio Seletivo são exemplos o Ágar Manitol Salgado e Agar SS, utilizados para selecionar as espécies que serãoisoladas e impedir o crescimento de germes. Meio Diferencial promove uma mudança na coloração das colônias de bactérias, possibilitando a distinção de vários gêneros e espécies de microrganismos. A escolha do meio de cultura correto para cada amostra é fundamental. Geralmente, utiliza-se mais de um tipo para identificação de todos os patógenos possíveis.
6. Qual o fator de seleção presente no Ágar Sal Manitol? Explique como é possível diferenciar espécies diferentes de Staphylococcus nesse meio. O Agar Sal Manitol é um meio seletivo para isolamento de estafilococos patogênicos a partir de amostras clínicas e biológicas e produtos farmacêuticos.  para a identificação do S. aureus é o ágar manitol sal, seletivo para essa espécie, uma vez que o S. aureus consegue fermentar o manitol, produzindo ácido lático. Essa espécie se desenvolve também na presença de 7,5% de NaCl, que estimula a produção de coagulase, enzima que caracteriza a espécie 
7. Descreva os tipos de hemólise que podem ser evidenciados por bactérias cultivadas em ágar sangue. O meio de cultura ágar sangue de carneiro proporciona o crescimento da grande maioria das bactérias gram-positivas e gram-negativas bem como de fungos bolores e leveduras, a partir de uma base rica e suplementada, oferecendo ótimas condições de desenvolvimento para microrganismos não fastidiosos. A conservação dos eritrócitos íntegros favorece a formação de halos de hemólise nítidos, facilitando a diferenciação de algumas espécies hemolíticas.
8. Descreva o fator de seleção do ágar MacConkey, e como é possível diferenciar bactérias nesse meio de cultura.  Ágar Macconkey, que inibem o crescimento de bactérias Gram positivas atenção à diferença. Tal composição apresenta violeta cristal e ácido biliar. O meio seletivo permite o crescimento de certos tipos de microrganismos e inibe o crescimento de outros microrganismos. Ele contém inibidores, geralmente antibióticos, que tornam inviável o crescimento de certos microrganismos, sem inibir o crescimento do microrganismo alvo
9. Descreva como as provas bioquímicas podem ser utilizadas para diferenciar as espécies de bactérias. Provas Bioquímicas e servem para auxiliar o microbiologista a identificar grupos ou espécies de bactérias ou leveduras através da verificação das transformações químicas, que ocorrem num determinado substrato, pela ação das enzimas de um dado microrganismo. Como muitas vezes um determinado microrganismo possui um sistema enzimático específico, promovendo transformação bioquímica específica, as provas bioquímicas podem ser utilizadas na prática para a sua caracterização. Para a realização das provas bioquímicas é necessário utilizar meios de cultivo especiais contendo o substrato a ser analisado e fornecer ao microrganismo as condições nutritivas e ambientais necessárias ao seu desenvolvimento.
10.Descreva quais as vantagens e desvantagens dos métodos independentes de cultivo em relação aos dependentes de cultivo. Métodos de diagnóstico independentes de cultivo. Detecção e identificação de bactérias diretamente na amostra, sem necessidade de cultivo em meios de isolamento seletivo. Pode ser necessária uma etapa de enriquecimento. O cultivo de muitos microrganismos em condições e laboratório é muito difícil e impraticável.
11.Descreva o que são anticorpos, e como eles podem ser úteis para a identificação de bactérias. Anticorpos também chamados de imunoglobulinas são estruturas proteicas encontradas no plasma sanguíneo. Eles atuam contra organismos invasores do corpo, tais quais as bactérias e os vírus. Cada antígeno desencadeia a produção de um determinado anticorpo, sendo que cada anticorpo só atua em um determinado antígeno. anticorpo que só é eficaz contra um antígeno. Isso quer dizer que um anticorpo que atua defendendo-nos contra uma bactéria não será útil para nos defender contra um vírus. Esse mecanismo é fundamental para a eficiência das vacinas, substâncias feitas a partir de antígenos que são tratados a fim de não causarem doenças
12.Diferencie os métodos de aglutinação e ELISA. ELISA ou ensaio de imunoabsorção enzimática é um teste imunoenzimático que permite a detecção de anticorpos específicos. Este teste é usado no diagnóstico de várias doenças que induzem a produção de imunoglobulinas, Aglutinação, Imunoensaios são técnicas para a detecção e quantificação de antígenos e anticorpos, ou outras substâncias que desempenhem o papel de antígeno no ensaio, tais como drogas, hormônios, DNA, RNA, citocinas
13.Descreva, de forma simplificada, como o método de PCR pode ser utilizado para detectar a presença de uma bactéria específica em uma amostra A PCR pode ver se há DNA bacteriano ou viral no corpo de um paciente se o patógeno estiver presente, pode ser possível amplificar regiões de seu DNA a partir de uma amostra de sangue ou tecido.