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IMUNODIFUSÃO EM GEL DE ÁGAR J A Q U E L I N E M O M B A C H ; J U L I A S C H L I N D W E I N ; L U I Z C O L T U R AT O E R O N I F A Z A N O QUE É A IDGA? • Reação de precipitação entre antígenos e anticorpos; • Formação de uma linha precipitada; • Avaliar os componentes antigênicos encontrados em misturas complexas; • Revelar as substâncias que são imunologicamente idênticas ou independentes COMO FUNCIONA A TÉCNICA? LEITURA DO TESTE PASSOS PARA A REALIZAÇÃO DO IDGA 1 2 3 4 VANTAGEM E DESVANTAGENS VANTAGENS • Simples execução e implementação; • Baixo custo; • Sensibilidade razoável; • Resultados em curto tempo. DESVANTAGENS • Sensibilidade limitada; • Qualidade dos antígenos é crítica; • Apenas qualitativo. CUSTO • AIE – em torno de R$45,00 FATORES QUE INFLUENCIAM NA VELOCIDADE DA DIFUSÃO DO IDGA • Tamanho dos poros de gel; • Temperatura; • Concentração e pureza do ágar; • Concentração das substâncias reagentes; • Tamanho e forma dos reagentes. MATERIAIS PARA A IDGA • Lâmina ou placa de petri com ágar (0,6-1,5%); • Pipeta; • Micropipetadores; • Solução dos antígenos; • Soro imunizado com anticorpos; • Molde perfurador de ágar para IDGA; • Tubos de ensaio • Estantes; • Solução Salina. METODOLOGIA • Realizar 7 furos na placa com ágar; • Distribuir o soro em 5 tubos com solução salina; • Em um apenas o soro; • Centralmente, ficará o antígeno; • Incubadora; • Leitura. POSITIVO OU NEGATIVO? • Reação negativa- não ocorre precipitação (A) • Reação positiva- Ocorre linha de precipitação (B) • Reação positiva fraca- precipitação curva (C) APLICAÇÃO NA MEDICINA VETERINÁRIA • AIE- Lentivirus • Língua azul- Orbivirus • CAEV- Retrovirus • Influenza aviária- Influenza • Brucelose- Brucella O B R I G A D O P E L A AT E N Ç Ã O ! !