Prévia do material em texto
Novas tecnologias em citopatologia Convencional O exame de Papanicolaou convencional é o teste para o diagnóstico das lesões pré-cancerosas e neoplasias cervicais utilizada em toda a rede de saúde pública brasileira. Apesar da reconhecida efetividade do método, este ainda apresenta altas taxas de resultados falso-negativos. A grande oscilação nas taxas de sensibilidade, que podem variar de 2% a 90%, demonstra a vulnerabilidade do procedimento, suscetível particularmente a falhas nas técnicas de colheita das amostras e preparação dos esfregaços, assim como também à subjetividade na interpretação dos achados citológicos. Citologia em meio líquido (LBC) Implantada na década de 90; Atender às demandas de escrutínio computadorizado e também com o intuito de melhorar a sensibilidade diagnóstica da citologia; Monocamada das células e a sua melhor preservação; Outro aspecto importante é a possibilidade de realizar testes de biologia molecular para o DNA do HPV e outros micro-organismos, como a Chlamydia trachomatis e a Neisseria gonorrhoeae, no mesmo material encaminhado para o estudo citológico. Procedimento técnico da LBC Suspensão e centrifugação de células provenientes do material colhido em líquido fixador; Obtendo-se a seguir uma fina camada de células sobre a lâmina; Conhecido como citologia de monocamada ou camada fina A LBC Utilizada em vários países e está substituindo gradativamente a citologia convencional (CC) Novas tecnologias como a citologia em meio líquido automatizada (BD Sure Path e ThinPrep) permitem o estabelecimento de padrões na coleta, preparo e coloração das amostras, o que garante melhora na qualidade dos testes, pois reduzem as variáveis do processo e da interferência humana. A LBC A área de leitura é reduzida em até 81%; Um ganho de cerca de 50% no tempo de leitura; Uma melhoria de 73% na produtividade do laboratório. Quando auxiliados por equipamentos que fazem o rastreamento por guia computadorizado pode-se avaliar até 170 lâminas por dia de trabalho. Vantagens da LBC Melhor preservação celular. Melhor distribuição das células analisadas. Redução de muco, exsudato inflamatório e hemácias. Redução do tempo de leitura. Obtenção de preparações adicionais da amostra sem a necessidade de nova coleta de material. Utilização possível de resíduos para testes de biologia molecular para vírus como o HPV e outros micro-organismos patogênicos entre eles a Chlamydia trachomatis e a Neisseria gonorrhoeae. Menor percentual de amostras insatisfatórias para a avaliação. Desvantagens da citologia convencional (CC) Desperdício de aproximadamente 80% do material coletado Maior número de células para analisar (aproximadamente 300 mil células). Distribuição irregular das células com sobreposição. Dependência da habilidade do profissional na confecção dos esfregaços e na sua pronta fixação. Maior percentual de amostras insatisfatórias para a avaliação. Repetição mais frequente na colheita de material devido ao maior percentual de insatisfatórios. Impossibilidade para teste adicional de biologia molecular. Baixa produtividade do laboratório. Em amostras cervicouterinas e vaginais, a LBC tem sido referida como método de desempenho superior por proporcionar melhor representação celular, com sensibilidade aumentada na detecção de lesões, em comparação com o preparado convencional. Há vários autores que mostram uma maior sensibilidade diagnóstica nos casos de ASC (alterações em células escamosas de significado indeterminado), enquanto outros atribuem uma melhor efetividade no diagnóstico de lesões de alto grau e glandulares. A LBC Pode ser realizada através de métodos automatizados e não automatizados. Entre os automatizados, os mais utilizados são o ThinPrep (Hologic, Inc., Marlborough, MA) e o SurePath (Becton, Dickinson and Company, Franklin Lakes, NJ). Os métodos não automatizados incluem o Liqui-Prep, Gel hidroalcoólico, entre outros. A LBC Significa “preparado fino” O método permite a deposição do material coletado em uma única camada, tão fina quanto a própria espessura de uma célula; ThinPrep Frasco com líquido conservante para receber as células coletadas do colo uterino. Espátula plástica com a superfície lisa, que impede a adesão das células, devido a tratamento antiestático. Escova endocervical com ponta protegida para evitar sangramento no momento da colheita celular. Lâmina de vidro especialmente transparente com área determinada para depósito das células, garantindo uniformidade e regularidade. Processador computadorizado que prepara o material coletado, de modo a garantir que a amostra que vai para a lâmina represente, de fato, o real estado celular do colo uterino de cada paciente Kit ThinPrep ThinPrep É importante enfatizar que o material colhido do colo uterino não é espalhado na lâmina, e sim depositado em um frasco contendo meio líquido preservante; O tubo é então encaminhado para o laboratório, onde a amostra é processada eletronicamente (processador eletrônico de lâminas T2000 ou T5000), passando pelas etapas de dispersão, coleta das células e transferência das células para a lâmina.do meio líquido preservante. SurePath (BD Sure Path™ Pap test) Método automatizado Para a obtenção das amostras cervicais pelo método SurePath, utiliza-se de um kit diferenciado na colheita das amostras cervicais, contendo uma escova endocervical com morfologia específica para possibilitar boa representação celular de modo rápido e fácil, que ao ser descartada em recipiente com líquido preservante, garante o envio de 100% do material coletado para análise. Este sobrenadante preserva as células por um mês sem refrigeração, em temperatura ambiente (15º a 30º C) e por seis meses sob refrigeração ( 2º a 8º C). Kit da citologia em meio líquido BD SurePath Vantagens do SurePath Possibilidade de automação e padronização de todas as etapas do processo, ou seja, preparo, coloração e escrutínio. Leitura mais rápida e fácil, devido a menor área (13 mm). Maior produtividade. Com relação à citologia convencional, as metodologias automatizadas apresentam a desvantagem de sofrerem modificações da morfologia celular, requerendo treinamento prévio e habilitação da equipe técnica. Preparações citológicas do SurePath São homogêneas e claras Proporcionando uma leitura rápida e fácil, devido à menor área (13 mm). Esta diferenciação eleva a sensibilidade do teste e maior produtividade, pois processa e cora 48 amostras simultaneamente, em aproximadamente 58 minutos, o que representa 96 amostras por hora. A leitura automatizada BD FocalPoint™ GS Imaging System e BD FocalPoint™ GS Review Station As imagens das células são digitalizadas e avaliadas com ampliação de 20x. A partir desta etapa são quantificadas em algorítimos que identificam tanto alterações em células escamosas como em glandulares, atribuindo-se uma pontuação (0,0 a 1,0), de acordo com a probabilidade de conter anormalidades. Esta informação é usada para classificar as lâminas em grupos que necessitam de revisão e grupos que não necessitam de revisão humana A leitura automatizada No grupo que necessita de revisão, o equipamento disponibiliza quantificação de menor risco e de maior risco, permitindo o citologista a compreender melhor a probabilidade de anormalidades inerente a cada lâmina e ajudar, nestas situações, a reduzir casos de falsos- -negativos e melhorar a capacidade de processamento do laboratório. A leitura automatizada Os primeiros campos de observações (FOV) a serem revisados sempre seguem uma escala de maior importância para o de menor importância, de acordo com a ordem de classificação e probabilidade de anormalidades. Deve ser ressaltado que, apesar do equipamento FocalPoint ajudar a selecionar os campos onde há alterações celulares com maior chance de representar uma lesão cervical, a responsabilidade de interpretação citológica é do observador, pois o sistema não faz o diagnóstico. Este tem o facilitador de reduzir asdiferenças de qualificação profissional devido à automação que oferece o mesmo padrão de rastreio para todas as mulheres, porém não exime o conhecimento e experiência individual do observador. Liqui-Prep Método de processamento de citologia em base líquida Não automatizada Pode ser aplicado às amostras cervicais e a líquidos como urina, LCR e outros Vantagem de trabalhar com 100% das células coletadas, não desperdiçando material e não alterando a morfologia das células Liqui-Prep Método de processamento de citologia em base líquida Não automatizada Pode ser aplicado às amostras cervicais e a líquidos como urina, LCR e outros Vantagem de trabalhar com 100% das células coletadas, não desperdiçando material e não alterando a morfologia das células O material pode ser encaminhado para Biologia Molecular com boa reprodutibilidade dos resultados Liqui-Prep Deve também se considerar a relação do custo-benefício bastante favorável, uma vez que não é necessária a utilização de equipamentos especiais. No sistema Liqui-Prep a totalidade da amostra também é colocada no tubo com preservativo líquido, o que permite facilidade no seu transporte. A metodologia inclui ainda um líquido de limpeza e finalmente um líquido adesivo. Principais Funções das Soluções que Compõem a Metodologia Liqui-Prep Preservativo das amostras: Trata-se de uma solução que evita o crescimento de bactérias no transporte, estabiliza a amostra até 90 dias facilitando a sua chegada ao Laboratório, permite o transporte e estocagem da amostra em temperatura ambiente e não desfaz a morfologia celular clássica com a preservação das células Principais Funções das Soluções que Compõem a Metodologia Liqui-Prep Liqui-Prep Cleaning Solution: Consiste de uma solução que tem a propriedade de separação física, ou seja, as células são separadas pela densidade gradativa, o que mantém o sangue e o muco na superfície. Principais Funções das Soluções que Compõem a Metodologia Liqui-Prep Liqui-Prep Cellular Base: Atua como adesivo especial entre as células e as lâminas de vidro padrão usadas em laboratórios, não requerendo nenhum tratamento químico posterior ou lâminas de vidro especiais.