Aula 3 - Microbiologia e Meios de Cultura II

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MICROBIOLOGIA
MEIOS DE CULTURA
(aula 3)
TÉCNICO DE LABORATÓRIO
BIOMÉDICO e FARMACÊUTICO
PROFA ANA CAROLINA ROCHA
O meio de Ágar sangue oferece ótimas condições de crescimento a 
maioria dos microrganismos. A conservação dos eritrócitos íntegros 
favorecem a formação de halos de hemólise nítidos, úteis para a 
diferenciação de Streptococcus spp. E Staphylococcus spp.
ÁGAR SANGUE
UTILIDADE: Usado para o isolamento de microrganismos não fastidiosos.
Verificação de hemólise dos Streptococcus spp. e Staphylococcus spp.
Usado na prova de satelitismo (para identificação presuntiva de 
Haemophilus spp.).
ÁGAR SANGUE
PREPARO:
1. Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante;
2. Esterilizar em autoclave;
3. Esfriar a base à +/- 50ºC;
4. Adicionar 5 ml de sangue desfibrinado de carneiro para cada 100 ml de 
base (1:20)
5. Homogeneizar delicadamente para não formar bolhas;
6. Distribuir em placas de Petri de 90 mm de diâmetro.
Não usar sangue humano, pois alguns microrganismos não apresentam hemólise;
Não adicionar o sangue na base do meio quente, pois as hemácias rompem-se, 
dificultando a formação de hemólise;
ÁGAR SANGUE
INTERPRETAÇÃO
Cor original do meio: vermelho.
Beta hemólise: presença de halo transparente ao redor das colônias semeadas (lise total dos
eritrócitos).
Alfa hemólise: presença de halo esverdeado ao redor das colônias semeadas (lise parcial dos
eritrócitos).
Gama hemólise (sem hemólise): ausência de halo ao redor das colônias (eritrócitos
permanecem íntegros).
Ano: 2017 Banca: UFMT Órgão: UFSBA Prova: UFMT - 2017 - UFSBA -
Técnico de Laboratório - Análises Clínicas
O preparo do meio de cultura ágar sangue envolve a adição de sangue de
carneiro ou coelho desfibrinado a um meio de cultura base. A proporção
(em volume) entre a quantidade de sangue adicionado e quantidade de
meio base é:
•A1:5.
•B1:10.
•C1:40.
•D1:20.
Questão 1
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/ufmt
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufsba
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/ufmt-2017-ufsba-tecnico-de-laboratorio-analises-clinicas
Ano: 2014 Banca: IADES Órgão: UFBA Prova: IADES - 2014 - UFBA – Biomédico
O meio de ágar sangue, usando uma base rica, oferece ótimas condições de crescimento
a maioria dos microrganismos. Quanto ao seu preparo, assinale a alternativa correta.
•AMeio com cor escura pode ser devido a uso de sangue vencido.
•BÉ recomendado o uso de sangue humano.
•CO sangue deve ser adicionado ao meio quente.
•DA homogeneização do meio com o sangue deve ser vigorosa.
•EPode ser conservado por até 90 dias em temperatura de 4 ºC a 10 ºC.
QUESTÃO 2
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https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufba
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/iades-2014-ufba-biomedico
Ano: 2014 Banca: IADES Órgão: EBSERH Prova: IADES - 2014 - EBSERH -
Nível Superior - Biomédico
O meio de ágar sangue, usando uma base rica, oferece ótimas condições de
crescimento a maioria dos microrganismos. Quanto ao seu preparo, assinale
a alternativa correta.
•AMeio com cor escura pode ser devido a uso de sangue vencido.
•BÉ recomendado o uso de sangue humano.
•CO sangue deve ser adicionado ao meio quente.
•DA homogeneização do meio com o sangue deve ser vigorosa.
•EPode ser conservado por até 90 dias em temperatura de 4 ºC a 10 ºC.
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/iades
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/iades-2014-ebserh-nivel-superior-biomedico
Ano: 2016 Banca: INSTITUTO AOCP Órgão: EBSERH Prova: INSTITUTO AOCP - 2016 - EBSERH -
Biomédico (CH-UFPA)
O crescimento de microrganismos nos diferentes meios de cultura utilizados fornece as primeiras
informações para a sua identificação. É importante conhecer o potencial de crescimento de cada
meio de cultura e adequar ao perfil bacteriano esperado para cada material. Um meio de cultura
muito utilizado é o ágar sangue (AS). Qual é sua principal finalidade?
•AIsolamento de microrganismos não fastidiosos, verificação de hemólise dos Streptococcus spp.
e Staphylococcus spp. e usado na prova de satelitismo (para identificação presuntiva de Haemophilus spp.).
•BAnálise de água, alimentos e leite como meio para cultivo preliminar das amostras submetidas a exames
bacteriológicos e isolamento de organismos para culturas puras, conservação e manutenção de culturas
em temperatura ambiente, como método opcional para os laboratórios que não dispõem do método da
criopreservação (congelamento das cepas em freezer à - 70ºC) e observação da esporulação de espécies
de bacilos Gram-positivos.
•CCrescimento de microrganismos exigentes Haemophilus spp., Neisseria spp. Branhamella
catarrhalis e Moraxella spp.
•DIsolar bacilos Gram-negativos (enterobactérias e não fermentadores) e verificar a fermentação ou não da
lactose.
•ESelecionar e isolar espécies de Salmonella e Shigella, em amostras de fezes, alimentos e água.
QUESTÃO 3
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/instituto-aocp
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ebserh
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/instituto-aocp-2016-ebserh-biomedico-ch-ufpa
Usado para isolamento e quantificação de microrganismos presentes 
em amostras urina. A deficiência de eletrólitos inibe o véu de cepas 
de Proteus.
ÁGAR CLED
UTILIDADE: Isolar e quantificar microrganismos Gram positivos, Gram 
negativos e leveduras.
ÁGAR CLED
PREPARO:
1. Pesar e hidratar o meio conforme instruções do 
fabricante;
2. Esterilizar em autoclave;
3. Resfriar à +/- 50°C e distribuir de 20 a 25 ml em placas de 
Petri 90 mm estéreis;
4. Deixar em temperatura ambiente até resfriar.
Espécies de Shigella não crescem em meios deficientes 
em eletrólitos.
ÁGAR CLED
INTERPRETAÇÃO
Cor original do meio: azul claro.
Colônias lactose positiva: cor amarela.
Colônias lactose negativa: cor azul.
CARACTERÍSTICAS DE CRESCIMENTO
Escherichia coli: colônias opacas, amarelas com ligeira cor amarelo escuro no centro,
com cerca de 1,25 mm de diâmetro, as não fermentadoras de lactose colônias azuis
Klebsiella: colônias muito mucosas, cor variável de amarelo a branco azulado
Proteus: colônias azul translúcidas, geralmente menor que E.coli
Salmonella: colônias planas, cor azul
Enterococcus faecalis: colônias amarelas, com cerca de 0,5 mm de diâmetro
Staphylococcus aureus: colônias amarelas, com cerca de 0,75 mm de diâmetro
Staphylococcus coagulase negativa: colônias amarelo palha e brancas
Corynebacterium: colônias pequenas e cinza
Lactobacilos: colônias pequenas e com superfície rugosa
Pseudomonas aeruginosa: colônias verdes, com superfície prateada e periferia rugosa
ÁGAR CLED
Ano: 2014 Banca: INSTITUTO AOCP Órgão: UFC Prova: INSTITUTO AOCP - 2014 - UFC
– Biomédico
Assinale a alternativa que aponta a(s) característica(s) de crescimento em ágar
CLED da bactéria Escherichia coli
•AColônias amarelo palha e brancas.
•BColônias planas, cor verde.
•CColônias opacas, amarelas com ligeira cor amarelo escuro no centro, com cerca de
1,25 mm de diâmetro, as não fermentadoras de lactose colônias azuis.
•DColônias verdes, com superfície prateada e periferia rugosa.
•EColônias pequenas e cinzas.
QUESTÃO 4
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/instituto-aocp
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufc
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/instituto-aocp-2014-ufc-biomedico
Ano: 2018 Banca: CESPE Órgão: FUB Prova: CESPE - 2018 - FUB - Técnico de Laboratório - Análises Clínicas
No que se refere a bactérias e meios de cultura utilizados na rotina bacteriológica, julgue o item subsecutivo.
Para a cultura de urina, pode ser utilizado o meio ágar CLED, seletivo para a identificação de bactérias gram-positivas.
•Certo
•Errado
QUESTÃO 5
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/cespehttps://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/fub
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/cespe-2018-fub-tecnico-de-laboratorio-analises-clinicas
É um meio derivado de nutrientes de cérebro e coração, 
peptona e dextrose.
A peptona e a infusão são fontes de nitrogênio, carbono, 
enxofre e vitaminas.
A dextose é um carboidrato que os microrganismos utilizam 
para fermentação.
CALDO BHI
UTILIDADE: Meio para cultivo de estreptococcos, pneumococos, meningococos, 
enterobactérias, não fermentadores, leveduras e fungos. Pode ser utilizado na preparação 
do inóculo para teste de susceptibilidade aos antimicrobianos, para realização de teste de 
coagulase em tubo, para teste de crescimento bacteriano a 42 e 44°C e para teste de 
motilidade em lâmina.
CALDO BHI
PREPARO:
1. Pesar e hidratar o meio conforme instruções do fabricante;
2. Distribuir 3,0 ml em tubos com tampa de rosca;
3. Esterilizar em autoclave;
4. Retirar os tubos da autoclave e deixar esfriar em temperatura ambiente.
INOCULAÇÃO
Para isolamento de fungos incubar por até 5 dias.
CALDO BHI
INTERPRETAÇÃO
Cor original do meio: amarelo claro, límpido.
Positivo: presença de turvação = crescimento bacteriano.
Negativo: ausência de turvação.
A base do meio é constituída por ovos integrais, o 
que permite amplo crescimento das micobactérias
e o crescimento é satisfatório para o teste de 
niacina (que é positivo para Mycobacterium 
tuberculosis).
LÖWENSTEIN JENSEN
UTILIDADE: Isolamento primário das micobactérias.
LÖWENSTEIN JENSEN
PREPARO
• Meio comercial: Meio TB para Bacilos de Koch Seg. 
Löwenstein Jensen ou Löwenstein Medium Base
• Ovos de galinha frescos
Meio base - fórmula:
Fosfato monopotássico 1,2 g
Sulfato de magnésio 0,12 g
Citrato de magnésio 0,3 g
L-asparagina 1,8 g
Fécula de batata 15,0 g
Glicerol 6,0 ml
Ovos totais 500 ml
Solução de Verde de malaquita a 2% 10 ml
Solução de Verde de malaquita à 2% - Fórmula:
Verde de malaquita 2 g
Água destilada 100 ml
LÖWENSTEIN JENSEN
INTERPRETAÇÃO
Cor original do meio: verde claro
Positivo: Crescimento de colônias amarelas
Negativo: ausência de crescimento.
Não liberar culturas negativas com tempo inferior 
a 60 dias de incubação, pois as micobactérias
desenvolvem-se lentamente;
Fazer um esfregaço do crescimento e corar pela 
técnica de Ziehl para confirmar ser um Bacilo
Álcool Ácido Resistente, pois alguns 
contaminantes podem crescer com pigmento 
amarelo.
Ano: 2015 Banca: CCV-UFC Órgão: UFC Prova: CCV-UFC - 2015 - UFC - Técnico 
de Laboratório - Análises Clínicas
A urocultura, também chamada de urinocultura ou cultura da urina, é um exame 
laboratorial realizado com a urina que complementa o diagnóstico de infecção 
urinária causada por bactérias. O meio de cultura mais utilizado é o meio de:
•ACled. 
•BMacConkey.
•CÁgar Chocolate.
•DÁgar Saboroud.
•ELowenstein-jensen.
QUESTÃO 6
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/ccv-ufc
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufc
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/ccv-ufc-2015-ufc-tecnico-de-laboratorio-analises-clinicas
Ano: 2017 Banca: UFMT Órgão: UFSBA Prova: UFMT - 2017 - UFSBA -
Técnico de Laboratório - Análises Clínicas
A escolha do meio de cultura é fundamental para o sucesso do diagnóstico 
microbiológico. Para a cultura de amostras biológicas com suspeita 
de Mycobacterium tuberculosis, para diagnóstico da tuberculose, o meio de 
cultura adequado é o
•AÁgar Lowenstein Jensen.
•BÁgar Chocolate.
•CÁgar Thayer Martin.
•DÁgar MacConkey.
QUESTÃO 7
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/bancas/ufmt
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/institutos/ufsba
https://www.qconcursos.com/questoes-de-concursos/provas/ufmt-2017-ufsba-tecnico-de-laboratorio-analises-clinicas