Microbiologia Relatorio coloração de Gram

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Instituto Federal de Pernambuco –IFPE
Curso Técnico de Meio Ambiente
Campos Garanhuns
Microbiologia 
Johnes Miranda Ramos
Relatório de Aula Pratica
Coloração Simples
Coloração de Gram
Junho 2017
Introdução
Coloração significa corar os microrganismos com um corante que mostre certas estruturas. As técnicas de coloração servem para mostrar diversas estruturas dos microrganismos, e especificar suas estruturas internas e externas. A coloração pode ser simples ou coloração de Gram. As colorações podem ser feitas com um ou mais corante.
O mecanismo de coloração de Gram se refere à composição da parede celular, sendo que as Gram-Positivas possui uma espessa camada de peptideoglicano e ácido teicóico, e as gram. Negativas, uma fia camada de peptideoglicano, sobre a qual se encontra uma camada composta por lipoproteínas, fosfolipídios, proteínas e lipolissacarídeos.
A coloração de gram. é umas mais importantes dentro do laboratório de análises clínica e microbiológica. A técnica de coração de gram. é usada principalmente para identificar a morfologia das bactéria s ou pra estabelecer se há um número que considere as bactérias que não se coram ou coram-se francamente.
Objetivo 
Aprender o método de coloração.
Realizar a técnica de coloração de Gram.
Comparar a estrutura da parede celular das bactérias de Gram-Positivas e Gram-Negativas
Aprender a preparar esfregaço de bactérias
Observar e descrever o que a estrutura presente em cada lamina.
Material e Métodos
Laminas para microscopia 
Óleo de imersão 
Água destilada 
Álcool a 70% 
Álcool- acetona 
Corante Cristal Violeta
Lugol 
Lamparina 
Fucsina
Cebola
Lamínulas
Corante Azul -metileno 
Placa de Petri contendo crescimento bacteriano
Alça de platina 
Prendedor de madeira
Na pratica de coloração simples foi utilizada duas películas de cebola, uma para cada lamina, e uma gota com corante azul-metileno em uma lamina com película de cebola e uma gota de lugol na outra lamina com cebola, depois coloca-se a lamínula em cada lamina para melhor observação no microscópio com lentes objetivas de 4x com aumento de total de 40x para o lugol e lentes objetivas de 10x com aumento total de 100x para o azul-metileno.
 Na prática sobre coloração de Gram foi utilizada álcool 70% nas mãos para reduzir os microrganismos em sua superfície. Então Pegar uma lamina limpa no recipiente e identificar o lado da lamina onde será feito o esfregaço, flambar a alça bacteriana deixa-la esfriar próximo a chama, depois abri a placa de petri com o crescimento bacteriano e tocar a colônia escolhida para a retirada da amostra, depois esfregar o material com movimentos de rotação da alça bacteriológica, para se obter um esfregaço de forma oval, bem fino e uniforme e deixar secar nas proximidades da chama, então fixar o esfregaço passando a lamina lado oposto do esfregaço 5 vezes na chama do bico de bunsen rapidamente. 
 O segundo momento é cobrir o esfregaço com o cristal violeta, aguardar por um minuto e logo em seguida lavar rapidamente com água destilada. Depois cobrir o esfregaço novamente com o lugol (mordente) e aguardar por um minuto e lavar com água destilada. Cobrir o esfregaço com álcool-acetona por 30 segundos, e em seguida lavar com água destilada. E por ultimo cobrir o esfregaço com fucsina e aguardar por 30 segundos e lavar com água destilada.
 Para finalizar com a colocação do óleo de imersão no esfregaço para então inserir no microscópio e fazer a observação na objetiva de 100x. 
Resultados e discussão
A observação do bulbo da cebola em cortes extremamente finos proporciona uma percepção de diferentes componentes celulares, como a epiderme, amiloplastos, núcleo e parede celular. 
Epiderme: reveste as partes tenras da cebola, parecendo um escudo coberta continua de células vivas incolores.
Amiloplastos: são organitos celulares especificados em armazenamento dos amidos no caso amilose + amilopectina que se acumula em grãos de variados tamanhos e são facilmente encontrados em caules subterrâneos.
Núcleo: é a estrutura central da célula, onde mantém as informações hereditárias encontrada em toda célula eucariontes, já a celula procariontes o núcleo é conhecido como nucleóide, a diferença entre nucleio e nucleóide e a presença de carioteca.
A parede celular: é uma organela multifuncional envolvida com a proteção e forma celular, ligações moléculas do meio (atividade receptora), formação de atividades enzimáticas especificas em interações celulares. 
Na coloração de Gram a lamina observada de bactérias cultivadas na placa de petri pode-se perceber que as mesmas eram Gram-Positivas, pois apresentavam coloração roxa com característica justificada devida ao corante cristal violeta seu formato de cocos, também foi encontrada bactérias de Gram-Negativas no seu formato de célula de bacilo, por tanto as bactérias com coloração vermelha.
 
Corante azul-metileno Corante Lugol Coloração Gram+
 Gram -
Conclusão
Com essse experimento podemos comprovar que cada corante atua de forma diferenciada na célula. Por que ultiliza-se corantes para esse tipo de experimento: Os corantes absorvem certos comprimentos de luz visível e tem afinidade de determinados constituintes, facilitando a visualização das células. Na coloração de gram Conforme o esperado, conseguimos ver em pratica a técnica de coloração de Gram. É necessário conseguir o preparo da coloração dos esfregaços como também ver as bactérias tanto de Gram-Positiva e Gram-Negativa e assim poder ver as formas das células bacterianas cocos e bacilos. 
Referencias 
http://microbiologia.comunidades.net/coloracao-simples
www.infoescola.com/bioquimica/coloracao-de-gram
www.uff.br/bacteriologia/coloração-de-gram
http://profluiscarloscarvalho.com.br/coloracao-simples
CEBOLA – Allium cepa. Jardineiro.net. Disponível em:
<http://www.jardineiro.net/br/banco/allium_cepa.php>
/www.sroque.org/index.php?option=com_content&task=view&id=161&Itemid=103>