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Textos_e_materiais_de_apoio_4_Ano_Bacteriologia_Taxonomia (1)

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Taxonomia bacteriana
DIVERSIDADE DOS MICRORGANISMOS
● BACTÉRIAS
● FUNGOS
● VÍRUS
● PROTOZOÁRIOS 
● ALGAS
Taxonomia
Sistemas de classificação dos seres vivos
Linnaeus (séc. XVIII): Reinos Animal e Vegetal
Haeckel (1866): Inclusão do reino Protista: "animais" e "vegetais“ unicelulares
Whittaker (1969): Cinco reinos - características morfólogicas e fisiológicas:
Monera: Procariotos
Protista: Eucariotos unicelulares 
Fungi: Eucariotos aclorofilados
Plantae: Vegetais
Animalia: Animais
Haeckel 
(1894)
Três reinos
Whittaker
(1959)
Cinco reinos
Woese 
(1977)
Seis reinos
Woese 
(1990)
Três domínios
Protista
Monera
Eubacteria Bactéria
Archaebacteria Archaea
Protista Protista
Eukarya
Plantae
Fungi Fungi
Plantae Plantae
Animalia Animalia Animalia
http://pt.wikipedia.org/wiki/Protista
http://pt.wikipedia.org/wiki/Monera
http://pt.wikipedia.org/wiki/Bact%C3%A9ria
http://pt.wikipedia.org/wiki/Bact%C3%A9ria
http://pt.wikipedia.org/wiki/Archaea
http://pt.wikipedia.org/wiki/Archaea
http://pt.wikipedia.org/wiki/Protista
http://pt.wikipedia.org/wiki/Protista
http://pt.wikipedia.org/wiki/Eukaryota
http://pt.wikipedia.org/wiki/Plantae
http://pt.wikipedia.org/wiki/Fungi
http://pt.wikipedia.org/wiki/Fungi
http://pt.wikipedia.org/wiki/Plantae
http://pt.wikipedia.org/wiki/Plantae
http://pt.wikipedia.org/wiki/Animalia
http://pt.wikipedia.org/wiki/Animalia
http://pt.wikipedia.org/wiki/Animalia
Virus?
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/12/Phylogenetic_tree_pt.svg
http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/1/12/Phylogenetic_tree_pt.svg
Carl Woese (1990) - O DNA poderia ser considerado um “fóssil” molecular.
Classificação baseada em aspectos evolutivos (filogenéticos)
Comparação das sequências de genes que codificavam o rRNA
Esta nova proposta de classificação subdivide os seres vivos em 3 domínios:
Archaea: Composto por procariotos – Ancestrais das bactérias
Bacteria: Composto por procariotos – Bactérias em geral
Eukarya: Composto por eucariotos – Animais, vegetais, algas, protozoários e 
fungos
Taxonomia
 A sistemática é a ciência dedicada a inventariar e descrever a
biodiversidade e compreender as relações filogenéticas entre os
organismos.
 Taxonomia: do grego tassein = "para classificar" e nomos = lei.
È a ciência de administrar a descoberta, descrição e
classificação das espécies e grupo de espécies, com suas
normas e princípios
 Filogenia: relações evolutivas entre os organismos
 Classificação definitiva: métodos fenotípicos e genotípicos
Novas Classificações
• Existem dois grupos de procariotos que são 
chamados de archaea e a bactéria.
• Pelo trabalho de Woese (1990), levando em 
conta dados de filogenia molecular, elas são tão 
diferentes que ocupam dois reinos, e as archaea 
são mais próximas dos eucariotos do que as 
bactérias
Evolutivamente falando, a classificação de 
Whittaker em cinco reinos: Animalia, Plantae, 
Fungi, Protista e Monera é antiquada, e 
existem hoje apenas três reinos: Archaea, 
Bacteria e Eukarya.
As Archaea vivem em ambientes extremos, onde não há 
possibilidade de vida para outros seres. 
Há Archaea em fontes termais a quase 100oC (Thermus 
aquaticus), no Mar Morto, com salinidade altíssima, em 
ambientes próximos a vulcões, em fontes de enxofre, 
etc. 
Comparando: Archaea Eukarya
Temperatura ideal de crescimento 2oC - >100oC
20oC -
40oC
pH ideal de crescimento 1 - 12 7
Capacidade de suportar altas pressões 
atmosféricas
sim não
Capacidade de suportar altas salinidades sim não
As bactérias podem ser classificadas por 
várias características:
Fonte de carbono Fonte de ATP Fonte de NADPH
autotróficas 
fotolitotróficas
CO2 luz
substrato 
inorgânico (NH4
+)
autotróficas 
quimiolitotróficas
CO2
substrato 
inorgânico (NH4
+)
substrato 
inorgânico (NH4
+)
heterotróficas 
fotoorganotróficas
compostos 
orgânicos (lactato)
luz
compostos 
orgânicos (lactato)
heterotróficas 
quimioorganotróficas
compostos 
orgânicos (lactato)
compostos 
orgânicos (lactato)
compostos 
orgânicos (lactato)
FORMA
COLORAÇÃO GRAM
TOLERÂNCIA AO O2:
NUTRIÇÃO
Fenotípicas X Genotípicas
As bactérias podem ter diversas formas: 
 As esféricas são chamadas cocos (geralmente G+)
 Quando alongadas, recebem o nome de bacilos
(geralmente G-)
 Em formas helicoidais, em geral móveis, são 
denominadas espirilos (não se coram bem pelo GRAM)
Mas ocorrem com 3 formas fundamentais 
Métodos fenotípicos
Cocos: De forma esférica ou subesférica (ex: Staphylococcus) 
Bacilos ou Bastonetes : Em forma de bastonete (Ex: Bacillus) 
Vibrios ou Vibriões : Em forma de vírgula (Ex: Vibrio) 
Espirilos ou Espiroquetas : Em forma de espiral (Ex: Treponema e Leptospira)
Bacilos ou Bastonetes
Cocos
Vibrios
Espiroqueta
Freqüentemente as células bacterianas 
aparecem em grupos, e não isoladas. 
Os cocos quando aparecem aos 
pares, formam os diplococos
Quando dispostos em fileiras são 
chamados streptococos
Quando aparecem como cachos de 
uvas, denominam-se estafilococos
Os bastonetes podem raramente se apresentar em cadeia 
ou na forma de diplobacilos, mas os espirilos somente se 
apresentam isoladamente.
Morfologia Bacteriana (M.E.)
Todas as bactérias, com exceção dos micoplasmas, 
apresentam uma parede rígida responsável pela forma
da célula e que a protege contra a ruptura. Apesar de 
ser rígida e resistente, a parede é permeável, o que 
facilita a nutrição da célula. 
Uma das formas de classificar as bactérias é em função 
da composição da parede bacteriana
A parede das bactérias Gram (+) é simples, formada por 
uma espessa camada de peptidioglicano. 
A parede das bactérias Gram (-) é mais complexa, pois 
além da camada de peptidioglicano ser mais fina que as 
Gram (+), apresenta uma camada de lipoproteínas e 
outra de lipossacarídeos. 
GRAM +
Tem uma espessa camada de peptidioglicano (mureína) e duas
classes de ácidos teicoicos: Ácido Lipoteicóico que está na
superfície, próximo a camada de peptidioglicano e unido a
membrana citoplásmática e o da superfície da parede que se une
só a capa de peptidioglicano. O ácido Teicóico é responsavel pelo
determinante antigênico do organismo.
GRAM -
Possui fina camada de peptidioglicano(mureína) unida a uma
membrana exterior por lipoproteínas. A membrana exterior é feita de
ptn, fosfolípidio e LPS. No LPS, a porção de lípideo está no interior do
fosfolípidio e o polisacárideo (antígeno O) está na superficie. O
Lipídeo se chama Lipídeo A e é tóxico, mas o LPS inteiro se chama
Endotoxina. A parede da célula possui poros chamados porinas que
transportam substâncias de baixo peso molecular. Entre a membrana
citoplasmática e a parede celular há um espaço periplásmico com
enzimas hidrolíticas, enzimas inativadoras de antibióticos e ptns de
transporte.
Podemos diferenciar as bactérias em 2 grandes 
grupos, segundo às propriedades de suas 
paredes, através da coloração de GRAM:
Gram (-)
• Aparecem com cor avermelhada ao 
microscópio óptico quando 
submetidas a coloração e GRAM
Gram (+)
• Aparecem com cor arroxeada ao 
microscópio óptico quando 
submetidas a coloração e GRAM
Propriedades Tintoriais
•Gram-positivas
•Gram-negativas
•Bacilos álcool ácido resistentes -
BAAR
•Não se coram pelo Gram
Gram-positivas
Gram-negativas BAAR
http://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:Gram-Cell-Wall.jpg
http://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:Gram-Cell-Wall.jpg
O Tamanho das bactérias
• As bactérias medem milésimos de milímetro ou 
sejam os micrômetros (m), (microscopia ótica)
• Os vírus  dimensões inferiores a 0,2 m (limite 
de visibilidade do microscópio ótico)  não 
podem ser observados neste instrumento.
• A maioria das bactérias estudadas em 
laboratório medem  0,5 a 1,0 por 2,0 a 5,0 m
Morfologia Colonial
Lisa? Rugosa? Pigmentada? Côncava? Convexa?
Morfologia Colonial
Exigências nutricionais
Autotróficas x Heterotróficas
Provas bioquímicas
Fermentação açúcar Citrato de sódio
Tipagemenzimática: enzimas do metabolismo
 Enzimas respiratórias 
• Pesquisa da Catalase
 Metabolismo glicídico
A maioria das bactérias utiliza os hidratos de carbono
hidrolizando-os até à formação de ácidos com consequente 
alteração do pH do meio. Em alguns casos essa hidrólise 
conduz à formação de gases. 
 Pesquisa de coagulase : a presença desta enzima indica
patogenicidade; na presença de plasma, os produtores de coagulase
(como o Staphylococcus aureus) vão desencadear os mecanismos da
coagulação.
 Pesquisa de enzimas hidrolíticas: esta prova tem a sua principal
aplicação na caracterização de espécies do género Streptococcus,
alguns dos quais elaboram enzimas hemolíticas
Enzimas extracelulares e toxinas
Sorotipagem
Microrganismos inertes às provas bioquímicas
Microrganismos de cultivo difícil
Fins epidemiológicos
Métodos genotípicos
1. Tamanho do DNA
2. Índice Crioscópico 
3. Índice Citosina-Guanina (C+G)
4. Hibridização de DNA 
5. Sondas moleculares: 50-100pb 
6. Sequenciamento de DNA
7. Ribotipagem: RNAr 16S
8. Análise plasmidial
http://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:DNA_Overview.png
http://pt.wikipedia.org/wiki/Ficheiro:DNA_Overview.png
Nomenclatura binomial
• Atribuição de nomes científicos às espécies.
• Formado por duas palavras – o nome do gênero e o restritivo 
específico (adjetivo que qualifica o gênero)
Ex:
Escherichia coli ou Escherichia coli
nome homenageia Theodor Escherich, 
coli: lembra que habita o cólon humano ou intestino grosso.
Staphylococcus aureus ou Staphylococcus aureus
Staphylo (tipo de agrupamento) + coccus (forma esférica)
aureus (cor de ouro).
Staphylococcus sp. X Staphylococcus spp. 
Fora da árvore Filogenética da 
“vida”
Vírus 
Vírus ciclo lítico
As bactérias são células procarióticas, possuindo 
estruturalmente:
• parede celular 
• membrana citoplasmática 
• citoplasma com numerosos ribossomos
• Núcleo disperso (sem membrana nuclear) 
E pode apresentar outras 
estruturas como flagelos,
fímbrias, esporos, cápsulas 
e também inclusões 
citoplasmáticas
Membrana celular ou citoplasmática
• Constituída de lipídeos e proteínas,  semelhante a eucarióticos.
• membrana semi-permeável, seletiva, sede de várias enzimas, 
limita o citoplasma.  transporte de íons e metabólitos (ex. 
enzimas permeases e porinas)  também atua em numerosos 
processos biossintéticos. 
Citoplasma com núcleo disperso e numerosos ribossomos
• Uma área  citoplasmática , (granular e rica em RNA)  Uma 
área cromatínica ou nuclear, (rica em DNA) e uma porção fluída 
com nutrientes dissolvidos
• Na área citoplasmática junto com o RNA  partículas protéicas, 
formando corpúsculos com cerca de 20nm de diâmetro 
ribossomas  Estes possuem enzimas que atuam na biossíntese 
da célula.
• Na área cromatínica temos o cromossoma bacteriano formado 
por DNA circular.
Flagelos
• Organelas especiais de locomoção responsáveis pela 
mobilidade bacteriana.
• São representados por longos filamentos ondulados de 3-
12m e compostos por subunidades proteicas (flagelina)
Fímbrias
• Também conhecidas como pili  são apêndices 
filamentosos encontrados em algumas bactérias Gram -, 
mais finos, mais curtos e geralmente mais numerosos 
que os flagelos, sem papel na mobilidade  funções: 
• aderência à superfícies 
• porta de entrada para material genético na conjugação 
bacteriana. 
Esporos
• São estruturas de “repouso” altamente 
resistentes à agentes físicos e químicos, 
formadas por certas bactérias (Bacillus e 
Clostridium)  composição  alto teor de 
cálcio associado ao ácido dipicolínico.
• A presença do ácido dipicolínico no esporo 
está relacionado à desidratação, alta 
resistência e termorresistência.
Cápsulas
• Envoltório viscoso que cerca a parede celular, 
• ocorre somente em certas bactérias, 
• natureza química,  maior parte polissacarídica, é 
variada, e depende da espécie bacteriana. 
• Fornece um envoltório protetor e também pode servir de 
reservatório de alimentos armazenados e despejo de 
escória, (????)
• Papel principal: virulência 
de algumas bactérias patogênicas 
e sua imunogenicidade.
Inclusões Citoplasmáticas
• Em algumas células identificam-se depósitos 
concentrados de certas substâncias, 
• Os grânulos podem conter diferentes materiais, 
(dependendo da célula em questão). 
• ex. grânulos de volutina (metacromáticos) –
metafosfatos e polifosfatos
• grânulos de amido, grânulos
polissacarídeos, etc...

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