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Espermograma Profa. Dra. Silvia E. Crusco Espermiograma • No mínimo 2 análises • Padronização - • Pré analítico • Analítico • Pós-analítico É muito complexo ser um espermatozóide bem sucedido.... Profa. Dra. Silvia Crusco Ejaculação Transporte Armazenamento Oviduto Maturação Profa. Dra. Silvia Crusco Espermatogênese Capacitação Fertilização Ejaculado : milhões Tuba uterina : centenas Oócito : Um Es p er m at o zó id es Only the strong survive!Profa. Dra. Silvia Crusco • Espermograma tradicional • Capacitação • Testes funcionais Análise seminal Colheita • Deve ser adequada para ser fator determinante para a eficácia da realização da análise e confiabilidade dos resultados Profa. Dra. Silvia Crusco Ejaculado • 1ª Fração – Próstata – Transparente • 2ª Fração – Testículos - Epidídimos – Esbranquiçada - (contém espermatozóides) • 3ª Fração – Próstata – Volume ao sêmen Profa. Dra. Silvia Crusco Aspermia • Falha em ejacular quando se tem ereção e comportamento ejaculatório • • Causas • – Imaturidade • – fatores físicos • – dor • • Prostatite • – medicamentos • – neuropatia simpático • • Ejaculação retrógrada Profa. Dra. Silvia Crusco Espermiograma • Volume • Cor • Odor • Aspecto • Movimento de massa • Turbilhonamento • Motilidade • Vigor • Concentração • Morfologia dos espermatozóides • Outras células Profa. Dra. Silvia Crusco Macroscópica Microscópica http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0CAcQjRw&url=http://www.progensci.co.uk/page1534/Laboratory-Equipment/Scientific-Microscopes/Euromex-Blue-Line-Microscopes-For-Education&ei=ydK6VLiSHtOTNtfqgIAE&bvm=bv.83829542,d.cWc&psig=AFQjCNGPGobhrcU05SJeD9sxeJMRhQssOQ&ust=1421616126078054 Profa. Dra. Silvia Crusco Cor http://www.artmajeur.com/pt/artist/ajursp/collection/arte-naif-com-ajur-sp/1358641/artwork/henry-vitor-tema-tempo-feliz-a-venda-com-ajur-sp/5433967 Profa. Dra. Silvia Crusco Volume Profa. Dra. Silvia Crusco Aspecto Coloração x aspecto • Cor • Estimativa da concentração • Opacidade e viscosidade – aspecto • Normal é leitoso • Muito transparente – baixa concentração de spz • Sangue: injúrias, trauma, prostatite Profa. Dra. Silvia Crusco Cremoso 750–1500 x milhões spz/mL Leitoso 400–750 x 106 spz/mL Leite desnatado 250–400 x 106 spz/mL Translúcido < 250 x 106 spz/mL Aparência do sêmen e concentração Profa. Dra. Silvia Crusco Aspecto Aquoso Leitoso Cremoso Coloração Aspecto Volume Coloração Aspecto Volume Hemospermia Profa. Dra. Silvia Crusco Aspecto Coloração Volume Profa. Dra. Silvia Crusco Volume Profa. Dra. Silvia CruscoVolume Espermiograma • Volume • Cor • Odor • Aspecto • Movimento de massa • Turbilhonamento • Motilidade • Vigor • Concentração • Morfologia dos espermatozóides • Outras células Profa. Dra. Silvia Crusco Macroscópica Microscópica http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&source=images&cd=&cad=rja&uact=8&ved=0CAcQjRw&url=http://www.progensci.co.uk/page1534/Laboratory-Equipment/Scientific-Microscopes/Euromex-Blue-Line-Microscopes-For-Education&ei=ydK6VLiSHtOTNtfqgIAE&bvm=bv.83829542,d.cWc&psig=AFQjCNGPGobhrcU05SJeD9sxeJMRhQssOQ&ust=1421616126078054 Características seminais Espécie Volume (ml) Concentração milhões spz/ml Carneiro 0.8 a 1 1000 – 1500 spz/ml Bode 0.8 a 1 1000 – 1500 spz/ml Garanhão 75 – 120 100 – 200 spz/ml Cachaço 200 - 250 250 spz/ml Touro 3 – 5 1200 spz/ml (60 – 2500) Cão 0.8 Acima 100 spz/ml Gato 0.6 40 – 90 spz/ml Homem 1.5 15 spz/ml Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Turbilhonamento Profa. Dra. Silvia Crusco Motilidade e vigor Vigor • 1 - imóvel • 2 - motilidade não progressiva • 3 - motilidade progressiva lenta ou não direcional • 4 – motilidade progressiva rápida Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Casa Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração Câmara de Neubauer http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/4/4d/Neubauer_improved_counting_chamber.jpg Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração Câmara de Neubauer Profa. Dra. Silvia Crusco C o n ce n tr aç ão C âm ar a d e N eu b au er Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração Câmara de Neubauer Profa. Dra. Silvia Crusco C o n ce n tr aç ão C âm ar a d e N eu b au er x x P r o f a . D r a . S i l v i a C r u s c o x Concentração Câmara de Neubauer Concentração espermática n x 5 x diluição x 10 x 1000 Número de spz contados Fator multiplicação Total de quadrados da camara 1:100 1:200 Altura camara ml 100 x 5 x 20 x 10 x 1000 100 x 106 espermatozóides por ml Profa. Dra. Silvia Crusco Peso (kg) Milhões Total Toys 200-300 Pequenos 200-500 Médios 400-800 Grandes 500-1 bilhão Gigantes 600-2 bilhões Profa. Dra. Silvia Crusco Concentração de espermatozóides em cães Defeitos ou alterações espermáticas • Produção- espermiogênese • Armazenamento - epidídimos Profa. Dra. Silvia Crusco Contraste de fase Profa. Dra. Silvia Crusco Formol salino Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Eosina - nigrosina Profa. Dra. Silvia Crusco Eosina-Nigrosina Fonte: Paulo Menezes Holanda Barros Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco POPE Fonte: Paulo Menezes Holanda Barros Profa. Dra. Silvia Crusco DAB (Diaminobenzidina) Fonte: Paulo Menezes Holanda Barros Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Definição Alterações Normospermia Ejaculado normal Aspermia Sem ejaculado Astenospermia Baixa motilidade Astenoteratospermia Baixa motilidade e muitos defeitos Azoospermia Sem espermatozóides no ejaculado Criptospermia Somente observam-se spz após centrifugação Hemospermia (Hematospermia) Presença de hemácias no ejaculado Leucospermia (piospermia) Presença de leucócitos no ejaculado Necrospermia Grande quantidade de spz mortos Oligoastenoteratozoospermia Baixa concentração spz, motilidade e alta qdte defeitos Oligoteratozoospermia Baixa concentração e muitos defeitos Oligozoospermia Baixa concentração spz Teratospermias Grande qtde de defeitos Profa. Dra. Silvia Crusco Teratospermia • Tratamento deve surtir melhora dentro de 60 dias • • Prognóstico • – Reservado • • Nenhuma melhora depois de 3 meses • – Ruim • • Nenhuma melhora depois de 6 meses de tratamento • – Grave • • Nenhuma melhora depois de 12 meses após início do tratamento Profa. Dra. Silvia Crusco Sêmen de baixa qualidade • Azoospermia • – Sem espermatozóides • Hematospermia • – Sangue no ejaculado • Teratozoospermia • – grande auntidade de formas defeituosas • <70% spermatozóides normais • Correto é ter >80% spermatozóides normais • Astenozoospermia • – Sem motilidade Profa. Dra. Silvia Crusco Testes funcionais • Extresse oxidativo • Integridade de membrana citoplasmática • Integridade e reatividade do acrossoma • Atividade mitocondrial • Condensação da cromatina • Fragmentação do DNA • Genoma e proteoma Profa. Dra. Silvia Crusco Fluorescência - sondas Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Fragmentação de DNA • Origem – Compactação da cromatina – Apoptose – EROs Profa. Dra. Silvia Crusco Consequências fragmentação do DNA • Impacto na fertilidade – Diminuição na taxa de fertilização – Diminuição no desenvolvimento embrionário – Diminuição na taxa de gravidez • Efeitopró mutagênico – “as 3 opções do oócito” – Microdeleções no cromossomo Y Profa. Dra. Silvia Crusco Cometa Fonte: Paulo Menezes Holanda Barros Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco Anticorpos anti-espermatozóides (MAR) Presença de anticorpos no sêmen • imobilização do esperma • prejuízo do transporte do espermatozoide através do canal endocervical, • interação do com o oócito • aglutinação espermática • sobrevivência do embrião Microscopia eletrônica Profa. Dra. Silvia Crusco Profa. Dra. Silvia Crusco
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