realatorio Meio de Cultura, microbiologia, bacteriologia

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CURSO: FARMACIA 
TURMA: FAR4M1
Aula 1- Meio de Cultura:
Mueller Hinton Agar, Extrato de carne, Ácidos Casaminos, Agar e Amido.
GRUPO: 05
COMPONENTES: 
Daruhne Santos, Doriane Vieira, Deborah L. , Ikaro Gabriel, Pedro H.
 
INTRODUÇÃO
Os meios de cultura são todos preparados em laboratórios, são feitos para oferecer um crescimento e desenvolvimento para os microrganismo, oferecendo a eles nesse meio de cultura, enriquecido de nutrientes para que cresçam e possam ser estudados. Esses nutrientes são para que os fungos e bactérias possam sobreviver fora de seu habitat natural. Existem vários tipos de meios de cultura que podem ser utilizados, como: Extrato de malte, estrato de carne, Agar nutriente, Agar Muller Hinton. Em várias áreas podem ser usados para fim de pesquisa e controle de qualidade, alguns exemplos são: Industria alimentícia, cosméticos, água, microbiologia clínica, entre outros. O meio de cultura e usado com frequência em análises clínicas, usado para cultivar os microrganismos, para que seja usado em estudos, em meios de cultura seletivos. Os meios podem ser classificados em três: Sólidos, semi-solidos e líquidos. 
AGAR MUELLER HINTON
Ágar Mueller Hinton Mbiolog é um meio de cultura, recomendado para (teste de sensibilidade) ou seja a realização de antibiograma pela técnica de difusão de discos isso segundo o CLSI. Contem uma substancial fonte de proteínas e carboidratos que vão levar ao desenvolvimento e crescimento de cepas bacterianas . Possui timina e timidina e níveis adequados de Cálcio e Magnésio, isso evita falsos resultados de sensibilidade ou resistência.
COMPOSIÇÃO
·	Peptona de caseína 17,5 g/L
·	Peptona de carne 2,0 g/L
·	Amido 1,5 g/L
·	Ágar 17,0 g/L
·	Água destilada q.s.p.
 PH
·	pH final 7,3 ± 0,1
DOSAGEM DE PÓ (EM GRAMAS) PARA REALIZAÇÃO DE CULTURA
·	36g para 1 L
MATERIAIS
Foram utilizados para o preparo do meio de cultura os seguintes materiais:
	Meio de Cultura
Erlenmeyer 250ml
Copo de Becker
Proveta
Pepita de 10ml (graduada)
Pera
Espátula
Tubos com Estante
Placas de Petri
Balança
pHgometro
Auto-Clave
Agitador Magnético
	Água Destilada
Nome do Meio de Cultura
Mueller Hinton Agar
Composição do Meio de Cultura
Extrato de carne 2,0g/L
Ácidos casaminos 17,5g/L
Amido 1,5g/L
Diluição
Suspender 36g em 1L de água
Como foi dissolvida em 250ml de água, o valor é dividido por 4, que resultou em 9g/250L.
 METODOLOGIA
PREPARO
Processo 1
Foram pesados 9,12g de Mueller Hinton Agar na balança de precisão (observamos se a mesma encontrava-se zerada).
Coletado 250ml de água destilada na proveta.
Em seguida foi adicionado o “pó” no erlernmeyer, o restante de pó que ficou no copo de Becker, foi retirado com a adição de água destilada ao erlernmeyer.
Foi adicionada a metade de água destilada que estava na proveta, com o Mueller Hinton Agar já dentro do erlernmeyer.
Foi dada uma pequena misturada de forma manual em movimentos circulares e o restante de água destilada foi adicionada.
Em seguida, foi medido o Ph com o auxílio do pHgometro (já se encontrava calibrado a mais ou menos 1h antes do processo) e o erlenmeyer já estava posicionada em cima do agitador magnético, onde foi misturando a solução.
O Ph inicial da solução era de 7,8(ph base) e para chegar ao ph ideal, foi adicionado o HCl (ácido cloridrico), com a ajuda de um conta gotas, gota por gota até que a solução atingisse o ph de 7,3 + 0,01 e estava a uma temperatura de 26ºC.
Após misturada e com o ph ideal, a solução foi vedada com Walpper e fita indicadora, em seguida levada ao auto-clave por 15 minutos na temperatura de 121ºC.
Passados os 15 minutos no auto-clave, foi acendido o bico de Bunsen e as placas de Petri foram agrupadas atrás da chama, esse processo evita a contaminação por bactérias.
Foi adicionado a solução nas placas e tampadas em seguida.
Processo 2
Esse processo consiste no meio de cultura na forma líquida. Foi preparado por outro grupo de alunos. Aos demais grupos, foi pedido a realização do armazenamento da solução.
Foram entregue aos grupos, copos de Becker de 50ml já preenchidos com a solução.
Com a ajuda de uma pipeta que marcava medidas em ml, foi pedido o preenchimento dos tubos que consistia em 10ml por tubo.
Foi encaixa a pera na pipeta, pressionada a letra A, retiramos o ar que estava na mesma, em seguida pressionamos a letra S para sugar o caldo (Kasvi Muller Hinton Broth) até a marcação de 10ml, foi encaixada a ponta da pipeta no tubo e pressionado a letra E para despejar o caldo.
Enchidos e rosqueados com suas respectivas tampas os cinco tubos que estavam na estante, foram colocados dentro de um erlenmeyer.
Após vedado, foi levado ao auto-clave por 15minutos a 121ºC.
Finalizado com tempo de auto-clave, foram retirados e armazenados.
O restante do processo, será apresentado na próxima aula no laboratório de Bacteriologia.
RESULTADO
Após o termino de todo o procedimento da realização da cultura, colocado todo material em placa de petre e tubos, armazenados para solidificação para serem utilizados posteriormente. 
BIBLIOGRAFIA
	AULA DO PROFESSOR DANIEL, FACULDADE LS, laboratório de microbiologia, 20 MARÇO. 2019. 
	O QUE É MEIO DE CULTURA? IDENTIFICAÇÃO E CULTIVO DE MICROORGANISMOS. Disponível em: <http://www.splabor.com.br/blog/meio-de-cultura-2/meio-de-cultura-identificacao-e-cultivo-de-microorganismos/>. Acesso em: 23 MARÇO. 2019.
	INSTRUÇÕES DE USO, AGAR MUELLER HINTON- MBIOLOG. Disponivel em: <http://mbiolog.com.br/produtos/Agar_Mueller_Hinton.pdf>. Acesso em: 23 de MARÇO. 2019.