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Resumo de Microbiologia – AV1 – Luísa Assis – 4º Farmácia Introdução à Microbiologia – 05/08/2020 O que é microbiologia? Miicrobiologia = do grego: mikros (“pequeno”), bios (“vida”), e logos (“ciência”). Estuda os organismos microscópicos e suas ativ. biológicas = verificam as diversas formas, estruturas, reprodução, aspectos bioquímico-fisiológicos, e seu relacionamento entre si e com o hospedeiro, podendo ser benéficos e prejudiciais. A importância da microbiologia VER MAIS NA VIDEOAULA Importante para sobrevivência dos seres humanos, plantas e animais Infecções primárias e secundárias Reciclagem de resíduo Produção de antibióticos, vitaminas, outras substâncias Industria de alimentos e combustíveis; Engenharia genética, etc... Doenças antes do século XVIII Doença era atribuída à maldição divina, acreditava-se que a doença era algo enviado por Deus para castigar os pecadores A história do surgimento da Microbiologia e evolução Antony Van Leeuwenhoek = em 1674 o pesquisador alemão criou o primeiro microscópio Teorias Abiogênese = defende que os “animálculos” (microrganismos) se originavam da composição de plantas e tecidos de diversos animais seres vivos podiam brotar a partir da matéria orgânica Biogênese = surgiu para contrapor a teoria da abiogênese, defendendo que todos os seres vivos são originados de outros seres vivos preexistentes Pasteur = em 1864, através de 2 experimentos conseguiu demonstrar a impossibilidade da geração espontânea; Teoria microbiana da fermentação, descobriu as leveduras, criador da PASTEURIZAÇÃO; comprovou que os micróbios não podem surgir de matéria não viva Joseph Lister = em 1865, ele compartilhava os mesmos pensamentos de Pasteur, acreditava que os micróbios que estavam presentes no ar, eram os responsáveis pelos mais diversos processos infecciosos; criador do primeiro método de desinfecção, propôs que durante a realização da cirurgia fosse vaporizado ácido fênico, sobre a região que fosse ser realizado o ato cirúrgico; Após a adoção deste método por diversos profissionais da saúde diminuiu muito o número de mortes por infecção pós-operatória Robert Koch = em 1876 conseguiu relacionar os microrganismos com as doenças; Fez inúmeras contribuições à microbiologia como (Engelkirk, 2015): Contribuiu significativamente para a teoria germinal das doenças; provou que o bacilo antraz (B. anthracis), que já tinha sido descoberto era a verdadeira causa do antraz Descobriu que o B. anthracis produzia esporos capazes de resistir a condições diversas Desenvolveu métodos de fixar, corar e fotografar bactérias Desenvolveu métodos para cultivar bactérias em meio sólido Descobriu a bactéria que causa a tuberculose (M. tuberculosis) e a que causa a cólera (Vibrio cholerae) Seu trabalho com a tuberculina (proteína derivada do M. tuberculosis) levou ao desenvolvimento de um teste cutâneo, de grande valor para o diagnóstico da tuberculose, o PPD Fleming = observou que o ác. fênico utilizado por Lister, afetavam mais os glób. brancos, do que os próprios micróbios; em um dos seus experimentos realizado em 1928, descobriu e descreveu o microrganismo Penicilium; o microrganismo Penicillium fungus, produzia uma substância (Penicilina) que matava os S. aureus; em 1940 a penicilina foi testada clinicamente e produzida para comercialização Avanços da microbiologia VER MAIS NA VIDEOAULA Microscópios com maior poder de resolução Técnicas de cultivo Técnicas de coloração de estruturas celulares Microscópio Óptico Microscópio Eletrônico de Varredura (MEV) Microscópio eletrônico de Transmissão (MET) Áreas da microbiologia Microbio. Básica = estuda a natureza fundamental e as propriedades dos microrganismos Microbio. aplicada = estuda como os microrganismos podem ser usados ou controlados com finalidades práticas Microbiologia aplicada VER MAIS NA VIDEOAULA Microbiologia médica Microbiologia de alimentos Microbiologia ambiental Microbiologia do solo Microbiologia industrial O profissional da saúde e a microbiologia O trabalho do microbiologista depende do interesse da sua área de atuação. Além de escolher a área de atuação o profissional deve-se qualificar e tornar especialista nessa área. Biomédicos Resolução nº 78, de 29 de Abril de 2002 Dispõe sobre o Ato Profissional Biomédico, fixa o campo de atividade do Biomédico e cria normas de Responsabilidade técnica. Capítulo II- Do campo de atuação das atividades do biomédico 3- Parasitologia 4- Microbiologia 5- Hematologia... Enfermeiros Resolução nº 389, de 18 de outubro de 2011 Atualiza, no âmbito atualiza no âmbito do Sistema Cofen / Conselhos Regionais de Enfermagem, os procedimentos para registro de título de pós-graduação lato e stricto sensu concedido a Enfermeiros e lista as Especialidades e as áreas de abrangência da profissão. ANEXO Especialidades/ residência de enfermagem áreas de abrangência 7- Enfermagem e doenças infecciosas e parasitárias 15 Enfermagem em infecção hospitalar 43 Enfermagem em vigilância 43.2 epidemiológica Farmacêuticos Resolução nº 572 de 25 de Abril de 2013 Dispõe sobre a regulamentação das especialidades farmacêuticas, por linhas de atuação Art. 1º- As linhas de atuação que agrupam as especialidades farmacêuticas são: I- Alimentos- microbiologia de alimentos, controle de qualidade de alimentos; II- Análises clínico – laboratoriais - bacteriologia clínica; VI- Farmácia industrial- biotecnologia industrial, pesquisa e desenvolvimento e tecnologia de fermentação; ----------------------------------------------------------------------------------------------------------- Introdução à Microscopia Óptica – 12/08/2020 Microscopia Óptica A microscopia óptica é uma técnica empregada para ver próxima uma amostra com a ampliação de uma lente com a luz visível; O microscópio é a ferramenta mais básica e antiga utilizada pelo microbiologista no estudo das estruturas microbianas; Para a observação dos microrganismos, é necessária a utilização de um microscópio de qualquer tipo, seja óptico ou eletrônico; Em geral microscópios ópticos são utilizados para a observação de células em ampliações relativamente baixas, e os microscópios eletrônicos são utilizados para observação de células e estruturas celulares em ampliações relativamente altas Aspectos gerais dos microscópios Empregam lentes que ampliam a imagem original; O que limita a observação de microrganismos não é a amplitude e sim a resolução: A resolução, a capacidade de distinguir dois objetos adjacentes como distintos e separados- que comanda a nossa habilidade de observar o muito pequeno; A ampliação pode ser aumentada de forma ilimitada; A resolução, não, uma vez que ela é uma função determinada pelas propriedades físicas da luz Resolução e características gerais de alguns microscópios Microscópio Simples Um microscópio simples é definido como um microscópio que contém apenas uma lente de aumento; Na verdade, uma lente de aumento poderia ser considerada um microscópio simples; Quando se utiliza uma lente de aumento, as imagens visualizadas aparecem, em geral, de 3x – 20x maiores do que o tamanho do objeto Microscópio Óptico Composto É um microscópio que contém mais de uma lente de aumento; Os microscópios ópticos compostos ampliam os objetos em cerca de 1.000 vezes; Esse microscópio utiliza a luz visível para iluminar as estruturas celulares ; Vários tipos de microscópios ópticos são utilizados em microbiologia: de campo claro, de campo escuro, de contraste de fase e de fluorescência. Tipos de microscópios ópticos compostos Microscópio óptico composto ou de campoclaro Os microrganismos são observados contra um fundo luminoso ou campos claro, por isso muitas vezes esse microscópio é denominado microscópio de fundo claro. Se o condensador utilizado for substituído por um condensador de fundo escuro, os microrganismos iluminados serão observados contra um fundo escuro, por isso são denominados microscópio de campo escuro; Na microbiologia, esse microscópio é rotineiramente utilizado para o diagnóstico da sífilis, causada por uma bactéria espiralada, denominada Treponema pallidum, que não pode ser observada num microscópio de campo claro, pois tem espessura menor que 0,2 mm, e consequentemente está abaixo do poder de resolução do microscópio óptico composto ou de campo claro Microscópio óptico e seus componentes Componentes do microscópio óptico 1 - Lente Ocular: aumenta a imagem do objeto após o aumento já proporcionado pela objetiva. É através desta lente que o observador vê a imagem do objeto (por isso o nome ocular, uma vez que o olho do observador está colocado à frente dela); 2 - Tubo ou Canhão: parte mais superior do microscópio, contém um conjunto de espelhos que projetam a imagem em direção às oculares nele encaixadas; 3 - Revólver ou tambor: peça encontrada abaixo do canhão na qual se inserem várias lentes objetivas; 4 - Objetivas: são lentes que projetam uma imagem aumentada do objeto nas oculares. A objetiva de 100x é também chamada objetiva de imersão (utilizada com óleo especial, que permite maior refração da luz para dentro da objetiva, corrigindo a pouca luminosidade nas observações feitas em grandes aumentos). Após o uso, o óleo é removido com xilol, éter ou benzina, embebido em algodão. 5 - Braço ou coluna: é a peça que liga a base até a parte superior do microscópio e onde se deve segurar o microscópio para ser transportado. 6 - Platina ou Mesa: é uma placa de metal com um orifício no centro, por onde passam os raios luminosos. O objeto que vai ser observado é colocado sobre uma lâmina de vidro e esta, sobre a platina, exatamente em cima do orifício. 7 - Condensador com diafragma: situado entre a platina e a base, converge os raios luminosos provindos da lâmpada e projeta-os como um cone de luz sobre o material que está sendo examinado. O diafragma fica acima do receptáculo do filtro, se liga a uma alavanca que permite sua abertura ou fechamento, levando ao controle da passagem total ou parcial da luz; 8 - Fonte de luz: normalmente é uma lâmpada ou, em modelos mais antigos, um espelho, que se apoia na base do microscópio. 9 - Pé ou Base: é o suporte do microscópio, peça que sustenta todas as outras; 10 - Parafusos macrométrico e micrométrico: o macrométrico permite grandes avanços ou recuos da platina em direção à objetiva. O micrométrico permite pequenos avanços ou recuos. Esse movimento da platina leva à focalização do material observado em diferentes aumentos. 11 - Charriot: localizado acessória e superficialmente à platina, é formado por uma presilha, dois botões giratórios e dois trilhos que têm a função de movimentar a lâmina no plano horizontal (da frente para trás e da esquerda para a direita, ou vice - versa) e assim permitir a observação de toda a sua área. Imagem proporcionada pelo microscópio óptico Virtual e invertida Como manusear um microscópio óptico 1- Descubra o microscópio, desenrole o cabo de força e conecte-o na voltagem correta. 2- Gire o revólver, encaixando a objetiva de menor aumento (4x ou 10x). 3- Coloque a lâmina sobre a platina, segurando-a com uma das mãos e abrindo a presilha com a outra. 4- Acenda a luz do microscópio (acione primeiramente o interruptor e em seguida o pontenciômetro de intensidade) e centralize o material no orifício da platina utilizando os parafusos do charriot. Faça isso olhando lateralmente, o que facilita a operação. 5- Movimentando o parafuso macrométrico, levante a platina até o ponto máximo, sem que a lâmina encoste na objetiva. 6- Ajuste a distância interpupilar, olhe através das oculares e, ainda utilizando o parafuso macrométrico, desça lentamente a platina até que se possa visualizar o material a ser analisado. 7- Acerte o ponto exato do foco com o parafuso micrométrico. 8- Corrija a intensidade de luz e abertura do diafragma para evitar ofuscamento e permitir a percepção de profundidade de campo e o contraste desejados. OBS: o condensador deve ser mantido na sua posição mais alta. 9- Observe o material atentamente trabalhando o foco fino com o parafuso micrométrico. Para percorrer outro campo da lâmina, utilize o charriot. 10- Gire o revólver para passar para a próxima objetiva de maior aumento, lembrando sempre de regular a intensidade de luz e a abertura do diafragma, bem como corrigir a focalização com o parafuso micrométrico. 11- Para utilizar a objetiva de 100X é imprescindível o emprego do óleo de imersão sobre a lâmina, o qual deverá será removido da objetiva com os devidos cuidados logo após o uso. 12- Terminada a observação, encaixe a objetiva de menor aumento, baixe um pouco a platina, deixe a intensidade de luz no mínimo e desligue-a, retire a lâmina, limpe o microscópio e cubra-o com a capa. Microscópio eletrônico O microscópio eletrônico utiliza um feixe de elétrons como fonte de iluminação e magnetos para focalizar o feixe. Como o comprimento de onda dos elétrons no vácuo é muito menor que o comprimento de onda da luz- 100.000 vezes menor, o microscópio eletrônico possui um poder de resolução muito maior que o microscópio óptico composto; Há dois tipo de microscópios eletrônicos: MEV e MET ----------------------------------------------------------------------------------------------------------- ...... – .../.../2020 ------
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