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Santa Emilia de Rodat Biomedicina-P6 Disciplina: Imunologia Professora: Ana Carolina Aluna: Amanda Evangela Construção de mapa conceitual e ilustrativodos métodos de imunoensaios Imunoensaio tipagem sanguínea Tipagem sanguínea é um teste realizado para estabelecer qual tipo sanguíneo e fator Rh que um indivíduo possui. Feito pelo o imunoensaio de aglutinação direta. Grupo sanguíneos: Sistema ABO Substâncias dissolvidas no plasma (aglutininas); As aglutininas são os anticorpos (Anti- A) e (Anti-B). Substâncias presentes na membrana dos eritrócitos (aglutinogênios); Os aglutinogênios são os antígenos: aglutinogênio-A e aglutinogênio-B. Sistema ABO Transfusão de Sangue Grupo Pode doar para Pode receber de A+ A+ AB+ A+ A- O+ O- B+ B+ AB+ B+ B- O+ O- AB+ AB+ A+ A- B+ B- AB+ AB- O+ O- O+ A+ B+ AB+ O+ O+ O- A- A+ A- AB+ AB- A- O- B- B+ B- AB+ AB- B- O- AB- AB+ AB- A- B- AB- O- O- A+ A- B+ B- AB+ AB- O+ O- O- Testes laboratoriais: Tipagem sanguínea TESTES DIRETOS – ABO E RH • Verificam a presença do antígeno eritrocitário (sangue total), • Utilização das hemácias do doador e receptor. Podem ser realizados em : – Tubo – Lâmina – Gel de centrifugação Tipagem direta: pesquisa a presença de antígenos na membrana dos eritrócitos. TESTES INDIRETOS – ABO REVERSO • Verificam a presença de anticorpos anti- antígenos eritrocitários (soro- plasma). • Utilização do soro/plasma do paciente. Podem ser realizados em : – Tubos – Lâminas – Gel de centrifugação Tipagem Reversa: pesquisa a presença de anticorpos naturais Fator RH Os principais antígenos do Sistema RH são: D, C/c, E/e. É um antígeno encontrado também na membrana plasmática das hemácias de indivíduos RhD positivos. Falamos em RhD negativo quando este fator antigênico está ausente. Sendo estas pessoas capazes de responder com a produção de anticorpos anti-Rh (anti-d), quando entram em contato com o antígeno (através da placenta ou transfusão incompatível) . Uma pessoa com fator Rh positivo não pode doar sangue a alguém com Rh negativo. RhD negativo: ausência do antígeno D na membrana. RhD positivo: quantidade normal de antígenos e epitopos de D na membrana. RhD fraco: quantidade reduzida de antígeno D. RhD variante: quantidade normal de antígenos, porem, eles são diferentes, podendo apresente ou ausência de 1 ou 2 epitopos. Determinação do fator Rh Método direto • Verificação da presença de antígeno Rh. • Pode ser realizado em lâmina, tubos e cartão de gel. • As técnicas são as mesmas utilizadas para verificação do sistema ABO. • A reação de aglutinação positiva indica a presença do antígeno D na membrana. • A reação de aglutinação negativa nem sempre indica ausência de antígeno D na membrana - necessário fazer a pesquisa de D-fraco Tipagem Sanginea 1. Fazer a LAVAGEM DAS HEMÁCIAS: 1. Colocar 500μL da amostra de sangue total em EDTA em um tubo de ensaio; 2. Acrescentar 2mL de soro fisiológico 3. Centrifugar por 1 min a 2.500 rpm 4. Desprezar o sobrenadante e repetir a operação por mais 2 vezes. 5. Após a última lavagem, retirar o excesso de água do tubo cuidadosamente. 2. Em outro tubo de ensaio identificado, prepara-se uma SUSPENSÃO DE HEMÁCIAS: 1. Colocar 1mL de soro fisiológico a 0,9% e 100μL de concentrado de hemácias lavado. 2. Homogeneizar bem. 3. SEPARAR 3 TUBOS, IDENTIFICAR em cada tubo: “A”, “B” e “Rh”. 4. Colocar 2 gotas de suspensão de hemácias em cada tubo. 5. Colocar os reagentes (anti-soros): 1. Tubo A: pingar 2 gotas de ANTI-A 2. Tubo B: pingar 2 gotas de ANT-B 3. Tubo RH: pingar 2 gotas de Anti-D 6. Centrifugar por 1 min. e proceder a leitura: Formação de grumos ou botão: POSITIVO, Ausência de grumos ou botão: NEGATIVO. Leitura da Tipagem Sanguínea Tipagem Sanguínea ABO em Lamina Tipagem em Gel Sistema de cartões Maior sensibilidade Padronização na intensidade de aglutinação no momento da leitura do resultado Testes estáveis por 2 dias Realização de teste de Coombs sem lavagens de hemácias Menor contato do profissional com o sangue (biossegurança)
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