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Aula 1- Considerações iniciais ao estudo da morfologia HISTOLOGIA E EMBRIOLOGIA Profa: Larissa Rodrigues Gomes CONTEÚDO PROGRAMÁTICO DA AULA • Conceitos fundamentais • Aspectos gerais do desenvolvimento embrionário • Técnicas em microscopia • O exame microscópico Biologia Celular Histologia Humana Embriologia Humana Cresce/desenvolve - os seres vivos crescem e se desenvolvem a partir de formas menores e/ou mais simples. Características de um ser vivo Embriologia: É a ciência que estuda a formação dos órgãos e sistemas do ser humano a partir de uma célula. Características de um ser vivo- Embriologia • O desenvolvimento embrionário tem início com a primeira divisão mitótica do zigoto. • Resumidamente, o desenvolvimento embrionário ser dividido em 4 etapas: 1. Segmentação - período onde começa as primeiras divisões celulares (clivagens) do zigoto até a formação de um aglomerado de células (mórula), que ganha uma cavidade interna (blástula) 2. Gástrula 3. Nêurula 4. Organogênese • O desenvolvimento embrionário faz parte de um processo ainda mais complexo, a ontogenia, que é o estudo das transformações que o indivíduo passa desde o período embrionário até a fase adulta. Características de um ser vivo- Embriologia Reprodução - os seres vivos são capazes de se reproduzir Características de um ser vivo Assexuada Sexuada - fecundação Características de um ser vivo Responde a estímulos - os seres vivos respondem (reagir) a mudanças no seu ambiente Neurônio motor • Contração involuntária • Resposta rápida (comparada a sistema endócrino) Arco reflexo Hereditariedade (genética) - Todo ser vivo passa suas características para seus descendentes. Características de um ser vivo • Doenças relacionadas à genética (recessivas, dominantes, ligada ao sexo) • Fenótipo Principal Característica de um ser vivo Matthias Schleiden (1804-1881) Theodor Schwann (1810-1882) Todos os seres vivos são formados por células Características de um ser vivo Exceção: Vírus? Parasita intracelular obrigatório Procariotos Eucariotos Zigoto 1 célula 1014 células Complexidade dos organismos vivos Biologia celular Embriologia Histologia (células), que formam órgãos e sistemas • São as células que compõe o ser humano. • A célula eucarió6ca possui três componentes principais: - O núcleo, que cons6tui um compar6mento limitado por um envoltório nuclear. -O citoplasma compar6mento onde localizam-se as organelas - A membrana plasmá0ca cons6tuído por uma bicamada fosfolipídica. CÉLULAS EUCARIONTES Células Eucariontes- Membrana plasmá6ca • Fluida, viscosa e flexível • Modelo mosaico fluído • Proteínas integrais • Permeabilidade sele9va– interações hidrofóbicas Estabelecimento de sistemas de transporte (proteínas carreadoras) Regulação das interações célula-célula (JA – células justapostas) Receptores: Transdução de sinais extracelulares em eventos intracelulares Proteína integral • Caracterís)cas básicas semelhantes Células Eucariontes Células vegetais tem cloroplastos Citologia: É a ciência que estuda as células, tanto eucariontes como procariontes, no que diz respeito à suas estruturas internas ou externas, funções, e sua importância na constituição, benéfica ou maléfica, dos seres vivos. • A palavra célula foi usada pela primeira vez em 1667 pelo inglês Robert Hooke. - Com um microscópio muito simples, ele observou pedacinhos de cor6ça (tecido vegetal morto). Hooke percebeu que a cor6ça era formada por numerosos compar6mentos vazios. - A esses compar6mentos ele deu o nome de célula, palavra diminu6va do la6m cella que significa cavidade. História da Biologia Celular Schleiden Schwann • Brown, 1831 - descoberta do núcleo em células vegetais. • Schleiden, 1838 (estrutura dos tecidos vegetais) • Schwann, 1839 (estrutura dos tecidos animais) “Teoria Celular” Schleiden Schwann -Todos os organismos são compostos de uma ou mais células -A célula é a unidade estrutural da vida História da Biologia Celular Virchow Virchow, 1855 As células podem surgir somente por divisão de uma célula pré-existente História da Biologia Celular “Teoria celular” 1) As células são as unidades morfológicas e fisiológicas de todos os organismos vivos; 2) As propriedades de um dado organismo dependem daquelas de cada uma de suas células; 3) As células originam-se somente de outras células, das quais herdam suas características; 4) A célula é a menor unidade da vida. História da Biologia Celular Histologia é o estudo das células e dos tecidos do corpo e de como essas estruturas se organizam para constituir os órgãos. Tecidos Células epiteliais Fibroblastos – células do tecido conjuntivo Estudo histológico • Apesar de toda a complexidade e inúmeras células, o organismo humano é constituído de 4 tipos básicos de tecidos. – Tecido epitelial – Tecido conjuntivo – Tecido muscular – Tecido nervoso Órgãos e sistemas Grupos de células semelhantes quanto à estrutura, função e origem embrionária formam cada tecido do corpo humano Desenvolvimento da microscopia • Em razão das pequenas dimensões das células, seu estudo é realizado com auxílio de microscópios. • A invenção do microscópio: final do século XVI (1595) por Hans Janssen e Zacharias Janssen Desenvolvimento da microscopia • Mais tarde, Antoine Van Leeuwenhoek (1632-1723) usou um microscópio de uma única lente com capacidade de aumento de 300 vezes para observar material biológico. • Nos tempos atuais, as técnicas de observação microscópicas avançaram em função de novas técnicas e aparelhos mais precisos. Microscópio óp*co Microscópio eletrônico Desenvolvimento da microscopia Potencial de aumento muito superior ao óptico • Microscópio eletrônico de transmissão • Permite ampliações de 1.000.000 de vezes Desenvolvimento da microscopia • Microscópio eletrônico de varredura • Permite ampliações de 1.000.000 de vezes Desenvolvimento da microscopia SUPERFÍCIE DA LÍNGUA, SEV Microscopia eletrônica de varredura ou reflexão CÉLULA GERMINATIVA PRIMORDIAL, SEV Microscopia eletrônica de varredura ou reflexão • Microscopia confocal - Os microscópios confocais dependem de grande capacidade de computação. - Um plano focal delgado é focalizado de cada vez - reconstrução em objeto tridimensional. Desenvolvimento da microscopia Desenvolvimento da microscopia • Microscopia de fluorescência - Substâncias irradiadas por luz de um certo comprimento de onda, elas emitem luz com um comprimento de onda mais longo - fluorescência. • Microscópio óp6co • Aumento de 4-100 vezes Desenvolvimento da microscopia Esôfago Estômago Microscopia de contraste de fase e de contraste diferencial de interferência Desenvolvimento da microscopia • Microscópio óp6co – Microscopia de contraste de fase - Permite a observação de células e cortes não corados. - Espécimes biológicos não corados são geralmente transparentes e difíceis de serem observados com detalhes, pois todas as partes do espécime tem quase a mesma densidade óptica). - Observação de células vivas. • A técnica de u6lização de corantes permi6u a iden6ficação do núcleo e estruturas celulares. • Principais corantes biológicos: hematoxilina e eosina (HE). Desenvolvimento da microscopia - Hematoxilina: Cor roxa. Se liga aos radicais ácidos dos tecidos. Coloração do núcleo das células. - Eosina: Cor laranja. Se liga aos radicais básicos dos tecidos. Coloração (em rosa) do citoplasma Desenvolvimento da microscopia Hematoxilina Eosina Preparação de espécimes para microscopia 1. Coleta • A primeira etapa de todo o processo de preparação de uma lâmina histológica consiste em coletar a amostra, ou seja, obtê-la e isto pode ser feito de cinco diferentes maneiras: a) Biópsia cirúrgica – obtenção da amostra de tecido ou órgão através de uma incisão cirúrgica; b) Biópsia endoscópica – usada para órgãos ocos (estômago, intestino) através de endoscopia; c) Biópsia por agulha – a amostra (cilindro) é obtida pelapunção do órgão, sem precisar abrir a cavidade natural; d) Cirurgias amplas – a amostra corresponde a peças grandes (ex. tumores) ou órgãos (ex. mama, útero). Nesse caso pega um fragmento da peça para inclusão; e) Necrópsia – procedimento utilizado para estudo anatômico de todos os órgãos ou tecidos, no animal morto. 2. Fixação • Objetivo: I. Evitar a digestão do tecido por enzimas presentes nas próprias células (autólise) ou em bactérias II. Endurecer os fragmentos III.Preservar em grande parte a estrutura e composição molecular dos tecidos. • Fixadores - Formaldeído à 4% - Glutaraldeído e tetróxido de ósmio Preparação de espécimes para microscopia 3. Inclusão • Substâncias que proporcionam rigidez aos tecidos - Microscopia de luz - parafina e resina - Microscopia eletrônica - resina • Processo de Inclusão em parafina - Desidratação (soluções crescentes de etanol) - Diafanização ou clareamento (xilol) - Inclusão em parafina (hidrofóbica) derretida (56-60oC) Preparação de espécimes para microscopia 4. Micrótomo Preparação de espécimes para microscopia Preparação de espécimes para microscopia 5. Preparação da lâmina 6. Coloração Preparação de espécimes para microscopia ácidos nucléicos, glicosaminoglicanos e glicoproteínas ácidas mitocôndrias, grânulos de secreção, proteínas citoplasmáticas, colágeno • Esta última operação consiste em fechar o material entre a própria lâmina que suporta o espécime e uma lamínula de vidro, para protege-los. 6. Montagem Preparação de espécimes para microscopia • Preparações coradas são observadas por iluminação que atravessa o espécime. Microscopia de luz Microscopia de luz Obrigada!!! Até semana que vem!
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