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Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): ANA CRISITNA RODRIGUES DE ALMEIDA 202003413674 Acertos: 7,0 de 10,0 03/10/2020 1a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa INCORRETA. A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm. Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a concentração de DNA na amostra. Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido nucleico (alta pureza). O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 280 nm. A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza. Respondido em 03/10/2020 16:32:35 Explicação: Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4 podemos sugerir a presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico. 2a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 A técnica de PCR (reação em cadeia da DNA polimerase) é utilizada com o objetivo de se obter várias cópias (amplificação) de um fragmento específico de DNA. Entretanto, um dos problemas que pode ocorrer durante a PCR é a amplificação inesperada de fragmento(s) inespecífico(s). Dados os fatores que influenciam nesse tipo de problema, I. Sequência de nucleotídeos dos primers. II. Temperatura de anelamento dos primers. III. Concentração do DNA template. IV. Concentração dos primers. Verifica-se que está(ão) correto(s): E) I, II, III e IV. C) III e IV, apenas. A) I, apenas. D) I, II e IV, apenas. B) II e III, apenas. Respondido em 03/10/2020 17:06:24 Explicação: Todos os fatores influenciam. 3a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (Adaptada de IF, RN, 2017) - Entre as técnicas usadas na biotecnologia: a biobalística usa microprojéteis revestidos com DNA para identificar trechos que se repetem no DNA; na reação em cadeia da polimerase (PCR), utiliza-se a DNA helicase para separar as fitas de DNA a 94° C; Nenhuma das alternativas acima. a eletroforese é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes a partir de corrente elétrica; na técnica do DNA recombinante, utilizam-se as endonucleases e a Taq polimerase para unir as duas fitas de DNA; Respondido em 03/10/2020 17:04:29 Explicação: Na técnica de PCR, promovemos a desnaturação das fitas de DNA através de processo térmico, e não enzimático. Na técnica de DNA recombinante, além de endonucleases, utilizamos as DNA ligases para promover o restabelecimento das ligações químicas. A biobalística corresponde a uma estratégia de transferência gênica/transformação de organismos. 4a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (INCA, 2014): Qual afirmação descreve com precisão o processo de PCR? Os produtos de PCR são inibidores da reação em cadeia da polimerase; O peso molecular do fragmento de DNA não é diagnóstico de especificidade de um PCR; A reação de PCR requer um tipo especial de enzima de restrição; A reação de PCR amplifica geometricamente um fragmento de DNA. É necessário um par de primers para a amplificação de um fragmento de DNA; Respondido em 03/10/2020 17:03:34 Explicação: Os produtos de uma etapa da reação de PCR servem como substrato para as etapas subsequentes. Não é necessário utilizar enzima de restrição para essa metodologia. O uso de pesos moleculares auxilia na deteção de amplificações inespecíficas. A amplificação é considerada exponencial. 5a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da biologia molecular, assinale a alternativa correta: Southern, Northern e Western Blotting podem ser utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Southern Blotting; Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar expressão gênica. A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Western Blotting; A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo expressão gênica é o Northern Blotting; Respondido em 03/10/2020 16:59:40 Explicação: A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de hibridização de moléculas de RNA com sondas de oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma metodologia útil, portanto, na detecção de RNA mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, na avaliação da degradação de RNA e splicing, por exemplo. 6a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 (Adaptada de UERJ, 2015): A eletroforese foi realizada pela primeira vez em 1937, por Arne Tiselius, trabalho que lhe rendeu um prêmio Nobel. Desde então, variações dessa técnica têm sido usadas na prática analítica. A técnica que separa proteínas de acordo com seus pontos isoelétricos e suas massas moleculares é conhecida como: cromatografia líquida; eletroforese capilar; zimografia; eletroforese bidimensional; Nenhuma das alternativas acima. Respondido em 03/10/2020 17:12:06 Explicação: A corrida eletroforética tem duas dimensões, por isso, é chamada bidimensional. Na primeira dimensão, as proteínas são separadas de acordo com seus pontos isoelétricos. Na segunda dimensão, as mesmas são separadas de acordo com as suas massas moleculares. 7a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Com relação ao sequenciamento de DNA, método Sanger, assinale a alternativa correta. O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela utilização de substâncias radioativas marcando os ddNTPs Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5' de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a cadeia complementar. Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são separados pelas respectivas cores. Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de forma que não apresentam um terminal hidroxila (3-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os quatro tipos de nucleotídeos marcados nas extremidades. Respondido em 03/10/2020 16:55:52 Explicação: Os nucleotídeos empregados nessa técnica são os didesoxinucleotídeos que são quimicamente modificados por não apresentarem um terminal hidroxila (3-OH), impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. 8a Questão Acerto: 0,0 / 1,0 Na clonagem, "células competentes" são: B) a fase de crescimento da estirpe. C) o processo de eletroporação. as alternativas "c" e "d" estão corretas A) a marca comercial da estirpe empregada. D) sinônimo de "células transformadas" Respondido em 03/10/2020 16:56:33 Explicação: Células competentes ou células transformadas são aquelas que adquiriram o plasmídeo contendo o gene alvo. 9a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 Na figura precedente é apresentado um padrão de polimorfismos de DNA obtido em exame de paternidade após eletroforese em gel de poliacrilamida. Com base nos dados da criança, da mãe e de três homens ¿ os supostos pais ¿, assinale a opção correta. O homem 2 éo pai biológico da criança. O homem 1 é o pai biológico da criança. O resultado do teste não permite distinguir se o homem 2 ou o homem 3 é o pai biológico da criança. O homem 3 é o pai biológico da criança. Não é possível determinar a paternidade da criança com base no padrão apresentado. Respondido em 03/10/2020 17:11:31 Explicação: Apartir da análise de bandas é possível concluir que o homem 2 é o pai da criança. 10a Questão Acerto: 1,0 / 1,0 (IADES, 2018): Avanços recentes em engenharia genética dão início a uma revolução; cientistas são capazes de manipular DNA humano de forma prática e barata, abrindo portas para uma gama de novos estudos genéticos nas áreas de medicina e de biotecnologia. O sistema CRISPR-Cas9 constitui uma maquinaria celular que é natural em diversos organismos vivos e oferece um enorme potencial, desde a cura de doenças causadas por mutações e danos no DNA até a criação de fármacos com organismos geneticamente modificados, entre outras aplicações em biotecnologia. Em relação ao sistema CRISPR-Cas9, é correto afirmar que: identifica e quantifica moléculas de RNA em uma amostra de interesse, para estudo de expressão gênica; amplifica em milhares de vezes uma região específica da molécula de DNA; visualiza antígenos nos tecidos ou em suspensões celulares utilizando corantes fluorescentes; corresponde a pequenas moléculas de RNA associadas a uma enzima de restrição, com capacidade de reconhecer e clivar sequências específicas de DNA exógeno. isola genes individuais do DNA humano e os insere em DNA plasmidial; Respondido em 03/10/2020 17:10:18 Explicação: A técnica de CRISPR-Cas9 isoladamente não é capaz de quantificar ou amplificar moléculas de ácido nucleico. Além disso, não é utilizada para fins de DNA recombinante ou ensaios baseados em detecção de proteínas.
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