plataformas moleculares

Prévia do material em texto

(SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. A técnica de separação descrita no texto é denominada:
	
	
	
	floculação;
	
	
	centrifugação;
	
	
	cromatografia.
	
	
	eletroforese;
	
	
	filtração;
	
Explicação:
As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a separação das partículas em função de seus respectivos pesos moleculares.
	
	
	
	 
		
	
		2.
		(Prefeitura de Barra Mansa, RJ, 2010) - Eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial. Em relação à eletroforese em gel é correto afirmar que:
	
	
	
	na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA positivamente carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo;
	
	
	as moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, as de menor massa situam-se na porção superior do gel e as de maior massa na porção inferior;
	
	
	após a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA normalmente são corados com brometo de etídeo, que possui afinidade pelo DNA e fluoresce (torna-se visível) vivamente em contato com a luz infra-vermelha.
	
	
	Na migração do DNA em um gel de agarose, sendo o DNA negativamente carregado, ele é atraído pelo eletrodo negativo;
	
	
	as moléculas são separadas de acordo com o seu tamanho, as de maior massa situam-se na porção superior do gel e as de menor massa na região inferior;
	
Explicação:
O DNA possui carga negativa, o que faz com que a migração ocorra do polo negativo (repulsão) em direção ao polo positivo (atração). A facilidade com que isso ocorre depende do tamanho das partículas. As maiores ficam atrasadas na trama do polímero, e são retardadas na migração, fazendo com que ocupem posições superiores no gel. Para a revelação do resultado, é necessário excitar o brometo de etídeo com luz UV.
	
	
	
	 
		
	
		3.
		(FIOCRUZ, 2010) - Analise as afirmativas a seguir:
I. A eletroforese em gel é uma técnica de separação de moléculas que envolve a migração de partículas em um determinado gel durante a aplicação de uma diferença de potencial.
II. A eletroforese em gel é utilizada para separar proteínas e moléculas de DNA e RNA.
III. Existem vários tipos de eletroforese em gel para analisar proteínas durante o processo de purificação. Entre elas, estão a eletroforese em gel de poliacrilamida contendo dodecil de sódio sulfatado (SDS-PAGE), a eletroforese em gel de poliacrilamida não desnaturante (Native PAGE) e o gel em duas dimensões.
Assinale:
	
	
	
	se apenas a afirmativa III estiver correta;
	
	
	se apenas as afirmativas I e III estiverem corretas.
	
	
	se apenas as afirmativas I e II estiverem corretas;
	
	
	se apenas a afirmativa I estiver correta;
	
	
	se apenas a afirmativa II estiver correta;
	
Explicação:
A eletroforese bidimensional não é utilizada para avaliação do grau de pureza, mas sim para a separação simultânea de um conjunto de proteínas presentes em uma amostra, através da diferença entre seus pesos moleculares e pontos isoelétricos.
	
	
	
	 
		
	
		4.
		(Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta:
	
	
	
	Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo.
	
	
	A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas;
	
	
	A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida;
	
	
	A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência;
	
	
	A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração;
	
Explicação:
A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante.
	
	
	
	 
		
	
		5.
		(Adaptada de UFMG, 2013) - Em relação à espectrofotometria, é incorreto afirmar que:
	
	
	
	a luz visível para o olho humano é a região do espectro eletromagnético com comprimento de onda entre 390 e 780 nm;
	
	
	a espectrofotometria permite estimar a concentração de soluções.
	
	
	a espectrofotometria é a medida da intensidade da luz em comprimentos de onda selecionados;
	
	
	a energia é transmitida por ondas eletromagnéticas que são caracterizadas pela frequência e comprimento de onda;
	
	
	a absorvância é a capacidade de uma substância em absorver ou transmitir radiação;
	
Explicação:
Absorbância e transmitância são conceitos não sinônimos e inversamente proporcionais; isto é, quanto maior a absorbância, menor a transmitância, e vice-versa.
	
	
	
	 
		
	
		6.
		(Unesp, 2012): A eletroforese em gel de agarose é uma técnica bastante utilizada em laboratório de biologia molecular para separação de ácidos nucleicos pelo seu tamanho. Assim, é correto afirmar que, na eletroforese em gel de agarose:
	
	
	
	as moléculas de RNA não migram sob campo elétrico em agarose;
	
	
	as moléculas maiores de DNA vão migrar mais rápido que as menores;
	
	
	as moléculas menores de DNA vão migrar mais rápido que as maiores;
	
	
	quanto maior a concentração da agarose no gel mais rápido as moléculas de DNA vão migrar.
	
	
	as moléculas de DNA vão migrar sob campo elétrico para o polo negativo;
	
Explicação:
As moléculas de DNA, dotadas de carga negativa, migram do polo negativo (por repulsão), em direção ao polo positivo (atração). A concentração do gel irá determinar o tamanho dos poros e, consequentemente, influenciará na velocidade com que as partículas migrarão na malha. O tamanho do amplicon será inversamente proporcional à sua velocidade de deslocamento. 
	
	
	
	 
		
	
		7.
		(Adaptada de IF, RN, 2017) - Entre as técnicas usadas na biotecnologia:
	
	
	
	na reação em cadeia da polimerase (PCR), utiliza-se a DNA helicase para separar as fitas de DNA a 94° C;
	
	
	na técnica do DNA recombinante, utilizam-se as endonucleases e a Taq polimerase para unir as duas fitas de DNA;
	
	
	a biobalística usa microprojéteis revestidos com DNA para identificar trechos que se repetem no DNA;
	
	
	Nenhuma das alternativas acima.
	
	
	a eletroforese é usada para separar fragmentos de DNA de tamanhos diferentes a partir de corrente elétrica;
	
Explicação:
Na técnica de PCR, promovemos a desnaturação das fitas de DNA através de processo térmico, e não enzimático. Na técnica de DNA recombinante, além de endonucleases, utilizamos as DNA ligases para promover o restabelecimento das ligações químicas. A biobalística corresponde a uma estratégia de transferência gênica/transformação de organismos.
	
	 
		1
        Questão
	
	
	(IBFC, 2013, Perito Criminal/ Biologia): O DNA (ácido desoxirribonucléico) é constituído por uma longa fita dupla de nucleotídeos. O sequenciamento de DNA é um processo que determina a ordem desses nucleotídeos. A fita dupla é formada pelo pareamento das bases. Desta forma, referente ao pareamento desses nucleotídeos, não é correto afirmar:Adenina se pareia com timina;
	
	A sequência desse pareamento é responsável pelas características genéticas do homem e de todos os seres vivos;
	
	As bases dos nucleotídeos são adenina (A), timina (T), guanina (G) e citosina (C);
	
	A guanina se pareia com citosina;
	 
	A guanina se pareia com adenina.
	Respondido em 30/09/2020 23:57:21
	
Explicação:
O pareamento nucleotídico de guanina é feito única e exclusivamente com citosina.
	
	
	 
		2
        Questão
	
	
	Na técnica de extração de ácidos nucleicos (DNA/RNA), quais os reagentes que podem ser utilizados?
		
	
	Proteinase K
	
	Etanol 70% e isopropanol;
	
	Detergente
	 
	DNAse
	
	Fenol e clorofórmio;
	Respondido em 30/09/2020 23:50:53
	
Explicação:
Todos os ítens listados podem ser utilizados para viabilizar a técnica de extração de acidos nucleicos.
	
	
	 
		3
        Questão
	
	
	Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos:
		
	
	Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação;
	
	Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação.
	 
	Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação;
	
	Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação;
	
	Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação.
	Respondido em 30/09/2020 23:52:04
	
Explicação:
A extração de ácidos nucleicos envolve etapas sequenciais de ruptura celular e exposição do ácido nucleico, seguida da purificação do material de interesse com a remoção de contaminantes. Em seguida, realiza-se a precipitação do alvo e consequente hidratação do mesmo.
	
	
	 
		4
        Questão
	
	
	O processo de extração do DNA tem como objetivo isolar os ácidos nucleico dos demais componentes celulares. Baseado neste processo marque a alternativa incorreta.
		
	
	A primeira etapa da extração é a lise de membranas onde são utilizados substância com ação de um detergente.
	
	Durante a extração do DNA é necessária fazer a remoção de outros componentes como proteínas, lipídeos e RNA.
	 
	Substâncias com ação de precipitação são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra
	
	A precipitação final do DNA pode ser realizada com etanol ou álcool isopropílico.
	
	Na etapa de purificação do DNA são utilizadas substâncias que fazem a remoção de carboidratos e proteínas presente nas amostras, isolando apenas o DNA
 
	Respondido em 01/10/2020 00:00:54
	
Explicação:
  Substâncias com ação de DETERGENTES são utilizadas para remoção dos lipídios da amostra.
	
	
	 
		5
        Questão
	
	
	(SESAU, 2010): O RNA difere quimicamente do DNA por apresentar:                                         
		
	 
	ribonucleotídeos e por possuir a base uracila;
	
	desoxirribonucleotídeos e por possuir a base timina;
	
	ribonucleotídeos e possuir a base timina.
	
	desoxirribonucleotídeos e possuir a base uracila;
	
	ribonucleotídeos e possuir as bases timina e uracila;
	Respondido em 30/09/2020 23:53:25
	
Explicação:
Desoxirribonucleotídeos e a base nitrogenada timina são encontrados apenas no DNA.
	
	
	 
		6
        Questão
	
	
	São exemplos de ácidos nucleicos:
		
	
	Timina e uracila.
	
	Proteínas e lipídios;
	
	Monossacarídeos e dissacarídeos;
	 
	DNA e RNA;
	
	Adenina e guanina;
	Respondido em 30/09/2020 23:54:39
	
Explicação:
As demais alternativas fornecem exemplos de outras macromoléculas ou bases nitrogenadas.
	
	
	 
		7
        Questão
	
	
	A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa INCORRETA. 
		
	
	 A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza.
	
	O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 280 nm.
	
	Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a concentração de DNA na amostra.  
	
	A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm.
	 
	Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido nucleico (alta pureza).
	Respondido em 01/10/2020 00:01:57
	
Explicação:
Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4  podemos sugerir a presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico.