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Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): SIRLENE ALVES VIEIRA 202003387177 Acertos: 10,0 de 10,0 11/10/2020 Acerto: 1,0 / 1,0 Identifique as principais etapas do protocolo de extração de ácidos nucleicos: Hidratação, Lise celular, Purificação e Precipitação; Lise celular, Purificação, Precipitação e Hidratação; Precipitação, lise celular, purificação e Hidratação. Lise celular, Hidratação, Precipitação e Purificação; Hidratação, Purificação, Lise celular e Precipitação. Respondido em 11/10/2020 22:55:42 Explicação: A extração de ácidos nucleicos envolve etapas sequenciais de ruptura celular e exposição do ácido nucleico, seguida da purificação do material de interesse com a remoção de contaminantes. Em seguida, realiza-se a precipitação do alvo e consequente hidratação do mesmo. Acerto: 1,0 / 1,0 (Fiocruz, 2010): Sobre a utilização da técnica de PCR com a finalidade de diagnóstico molecular, analise as afirmativas a seguir. I. Uma vez que na reação de PCR se utiliza uma DNA Polimerase dependente de DNA, somente os vírus cujo genoma é constituído por DNA podem ser detectados pela técnica de PCR. II. É possível detectar microorganismos diferentes em uma mesma reação de PCR, desde que se utilize na reação pares de iniciadores específicos para cada microorganismo que se queira detectar. III. A utilização da técnica de PCR para diagnóstico molecular terá sempre e somente caráter qualitativo. Assinale: se somente a afirmativa II estiver correta; se todas as afirmativas estiverem corretas. se somente a afirmativa I estiver correta; se somente a afirmativa III estiver correta; se somente as afirmativas I e II estiverem corretas; Respondido em 11/10/2020 22:55:29 Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); Explicação: É possível detectarmos patógenos cujo genoma seja RNA através de RT-PCR, ou seja, transcrição reversa acoplada à PCR. Também podemos quantificar o nosso alvo através da PCR em tempo real ou, indiretamente, mensurar aproximadamente a sua quantidade através de gel de agarose, reagente Low mass e sistema de coloração adequado para análise dos amplicons. Acerto: 1,0 / 1,0 (Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, assinale a opção correta: A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para averiguação de êxito na etapa de extração; A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em gel de poliacrilamida; A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; Respondido em 11/10/2020 22:58:00 Explicação: A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos fosfato, o DNA possui cargas semelhante. Acerto: 1,0 / 1,0 PCR em tempo real é uma inovação tecnológica derivada da PCR que tem se difundido rapidamente nos laboratórios de biotecnologia. Dadas as afirmativas sobre a PCR em tempo real, I. Permite quantificar os fragmentos de DNA amplificados durante a fase exponencial da reação em cadeia da polimerase. II. Apresenta um detector de fluorescência para o monitoramento da reação ao longo dos ciclos de amplificação. III. Permite a investigação de alterações genéticas e dos níveis de expressão dos genes. IV. Utiliza uma análise eletroforética para a detecção dos produtos da reação. Verifica-se que está(ão) correta(s): B) I e IV, apenas. D) I, II e III, apenas. E) I, II, III e IV. C) III e IV, apenas. A) II, apenas. Respondido em 11/10/2020 22:59:05 Explicação: Questão3 a Questão4 a A qPCR faz a quantificação do material genético em tempo real, não necessitando de processamento eletroforético pós-PCR Acerto: 1,0 / 1,0 A eletroforese em gel é uma das principais ferramentas de trabalho no campo da biologia molecular e tem sido utilizada no estudo de proteínas, DNA e RNA. Marque a opção que apresente técnicas de biologia molecular que analisam, respectivamente, proteínas, DNA e RNA. Western blot, Southern blot e Northern blot. Southern blot, Western blot e Northern blot. Southern blot, Northern blot e Western blot. Western blot, Northern blot e Southern blot. Northern blot, Southern blot e Western blot. Respondido em 11/10/2020 23:02:38 Explicação: Western blot - analisa proteína. Southern blot- analisa DNA . Northern blot - analisa RNA Acerto: 1,0 / 1,0 Uma técnica de grande utilidade e resolução utilizada em laboratórios de bioquímica e biologia molecular é a eletroforese bidimensional. Sobre essa técnica, assinale V para verdadeiro e F para falso nas afirmativas a seguir: ( ) Em uma das dimensões da eletroforese bidimensional, as moléculas são separadas em função de seus pontos isoelétricos. ( ) Em uma das dimensões da eletroforese bidimensional, as moléculas são separadas de acordo com sua massa molecular. ( ) Proteínas isoladas por essa técnica podem ser, a seguir, analisadas por espectrofotometria de massas, permitindo que sejam calculadas as massas moleculares de peptídeos derivados. ( ) Não é possível realizar western blotting a partir de um gel bidimensional. Assinale a alternativa que apresenta a sequência CORRETA de V e F de cima para baixo: V-V-F-V V-V-V-F V-V-V-V F-V-F-V F-V-V-F Respondido em 11/10/2020 23:00:52 Explicação: A eletroforese 2D também pode ser utilizada para separação de proteinas que precede o Western Blot Acerto: 1,0 / 1,0 (INSTITUTO AOCP, 2018): Considerando as técnicas de sequenciamento do DNA, a respeito das características desse tipo de procedimento, assinale a alternativa correta: A presença de ddNTPs na reação dispensa a adição de desoxinucleotídeos trifosfato normais; A utilização de vetores plasmidiais, em técnicas de subclonagem de fragmentos de DNA, é denominada "pirossequenciamento". Questão5 a Questão6 a Questão7 a Os fragmentos resultantes são separados eletroforeticamente e submetidos à autorradiografia; O método de dideoxinucleotídeos utiliza o grupo 3-hidroxila; O método Sanger também é conhecido como sequenciamento de nova geração; Respondido em 11/10/2020 23:01:33 Explicação: Devido à ausência do grupamento hidroxila no carbono 3´ da pentose, os nucleotídeos modificados não possuem capacidade de fazer ligação química com um próximo nucleotídeo. O sequenciamento de nova geração corresponde a uma metodologia mais moderna de sequenciamento genômico, de alta vazão, ao contrário do método de Sanger. A presença de ddNTPs não dispensa a necessidade de dNTPs, uma vez que, é necessário produzir moléculas de DNA com diferentes extensões para se elucidar a ordem das bases nitrogenadas. Se apenas ddNTPs estivessem presentes, as moléculas seriam abortadas precocemente, tão logo um ddNTP fosse incorporado. As reações de pirosequenciamento dispensam a necessidade de clonagem molecular. Acerto: 1,0 / 1,0 Uma das funções de um vetor (molécula de DNA,a qual pode ser um plasmídio) nos procedimentos de uma clonagem gênica é: Deletar o gene que foi nele inserido dentro da célula hospedeira. Neutralizar as cargas dos nucleotídios do DNA. Realizar atividade similar à das enzimas de restrição. Atuar como veículo que transporta o gene para o interior de uma célula hospedeira. Atuar como tamponante da PCR. Respondido em 11/10/2020 23:12:18 Explicação: O vetor apresenta este nome justamente porque ele carreia o gene da molécula alvo. Acerto: 1,0 / 1,0 (FUVEST, SP): "Teste de DNA confirma paternidade de bebê perdido no tsunami. Um casal do Sri Lanka que alegava ser os pais de um bebê encontrado após o tsunami que atingiu a Ásia, em dezembro, obteve a confirmação do fato através de um exame de DNA. O menino, que ficou conhecido como "Bebê 81" por ser o 81º sobrevivente a dar entrada no hospital de Kalmunai, era reivindicado por nove casais diferentes." Folha online, 14/02/2005 (adaptado). Algumas regiões do DNA são seqüências curtas de bases nitrogenadas que se repetem no genoma, e o número de repetições dessas regiões varia entre as pessoas. Existem procedimentos que permitem visualizar essa variabilidade, revelando padrões de fragmentos de DNA que são ¿uma impressão digital molecular¿. Não existem duas pessoas com o mesmo padrão de fragmentos com exceção dos gêmeos monozigóticos. Metade dos fragmentos de DNA de uma pessoa é herdada de sua mãe e metade, de seu pai. Com base nos padrões de fragmentos de DNA representados abaixo, qual dos casais pode ser considerado como pais biológicos do Bebê 81? Questão8 a Questão9 a Casal B; Casal D; Casal E. Casal C; Casal A; Respondido em 11/10/2020 23:10:15 Explicação: Para todos os outros supostos casais, sempre encontraremos alguma banda no bebê 81 para a qual não haverá correspondência nem materna nem paterna. Acerto: 1,0 / 1,0 (Enade, 2016): Desenvolvida recentemente, a técnica de edição de genoma denominada CRISPR/Cas9 mostra-se bastante promissora nas áreas de Biotecnologia e Medicina. Por engenharia genética, é possível direcionar o sistema CRISPR/Cas9 para clivar o DNA em um ponto específico dos genomas de vírus, de plantas, de fungos e de animais, inclusive de embriões humanos, o que tem gerado discussões a respeito dos aspectos éticos de sua utilização. (YANAGUI, K. Novas tecnologias, novos desafios. Ciência e Cultura, São Paulo, v. 68, n. 3, set. 2016 (adaptado)). Em relação às questões bioéticas envolvidas na edição genética, avalie as afirmações a seguir. I. No Brasil, não é permitido o uso de técnicas para a edição genética de embriões humanos; os estudos científicos nessa área devem ter como objetivo tratar e curar problemas de saúde e não alterar o genoma ou realizar clonagens; II. A despeito do caráter promissor da edição genética no tratamento de doenças graves, as intervenções feitas por meio da técnica de CRISPR/Cas9 em embriões podem ser passadas às gerações futuras, por esse motivo, a prática é considerada eugenista, o que ensejou a proibição de estudos desse tipo em embriões humanos em alguns países; III. Em alguns países, inclusive no Brasil, são permitidas por lei a manipulação e a modificação genética de embriões humanos para fins de pesquisa, entretanto, esses embriões devem ser descartados dentro do prazo de duas semanas. É correto o que se afirma em: Questão10 a I e II, apenas; I, apenas; I, II e III. III, apenas; II e III, apenas; Respondido em 11/10/2020 23:10:54 Explicação: No Brasil, a legislação veta qualquer experimento que envolva a manipulação genética de embriões humanos. A Lei de Biossegurança (11.105/2005) proíbe em seu artigo 6, inciso III, a ¿engenharia genética em célula germinal humana, zigoto humano e embrião humano¿. javascript:abre_colabore('38403','208790922','4172040170');
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