PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV BIOLÓGICAS

Prévia do material em texto

Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS   
	Aluno(a): DAHIANI MICHELLE SILVA
	202002143101
	Acertos: 9,0 de 10,0
	25/10/2020
		1a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa INCORRETA. 
		
	
	O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 nm/ 280 nm.
	
	A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 260 nm.
	 
	Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas (abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da extração ácido nucleico (alta pureza).
	
	Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a concentração de DNA na amostra.  
	
	 A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza.
	Respondido em 25/10/2020 17:21:38
	
	Explicação:
Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4  podemos sugerir a presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico.  
	
		2a
          Questão
	Acerto: 0,0  / 1,0
	
	(Fiocruz, 2006): São elementos necessários na técnica de amplificação de DNA através da reação da polimerase em cadeia (PCR):
		
	
	DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e endonucleases;
	 
	DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, etanol e termociclador;
	
	DNA molde, DNA polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador;
	
	DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs, endonucleases e termociclador;
	 
	DNA molde, Taq polimerase, primers, dNTPs e termociclador;
	Respondido em 25/10/2020 17:05:15
	
	Explicação:
As endonucleases são enzimas de restrição utilizadas nas técnicas de clonagem molecular. O etanol é utilizado no processo de extração de ácido nucleico, antes da técnica de PCR. DNA polimerase ou Taq DNA polimerase são a mesma enzima.
	
		3a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(SESAU, RO, 2017) - Técnica baseada na separação de partículas em um determinado gel de acordo com sua massa e carga. Pode ser utilizada para separação de diversas moléculas orgânicas, como lipoproteínas, proteínas, RNA e DNA. A técnica de separação descrita no texto é denominada:
		
	
	centrifugação;
	
	cromatografia.
	
	floculação;
	 
	eletroforese;
	
	filtração;
	Respondido em 25/10/2020 17:04:18
	
	Explicação:
As demais técnicas citadas não envolvem a utilização de campo elétrico para a separação das partículas em função de seus respectivos pesos moleculares.
	
		4a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(PC, DF, 2012) - O propósito da PCR é fazer um número imenso de cópias de um determinado fragmento gênico, cujo tamanho pode variar de poucos pares de base até milhares de pares de base. A PCR é constituída de três ciclos. Assinale a alternativa que apresenta esses ciclos:
		
	
	fase de desnaturação, fase de extensão ou anelamento e fase de fixação;
	
	fase de desnaturação, fase de hibridização e fase de fixação ou anelamento;
	 
	fase de desnaturação, fase de hibridização ou anelamento e fase de extensão;
	
	fase de desnaturação, fase de captação e fase de extensão.
	
	fase de desnaturação, fase de fixação e fase de hibridização ou anelamento;
	Respondido em 25/10/2020 17:08:40
	
	Explicação:
As fases de fixação e captação não fazem parte da reação de PCR. Além disso, só é possível a fase de extensão se, na fase imediatamente anterior, houver a hibridização ou anelamento dors primers com a fita molde.
	
		5a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(UFRJ, 2013): Selecione a opção que contém as etapas necessárias para execução do protocolo de Western blotting:
		
	
	Imobilização em coluna de afinidade, eluição com tampão glicina, neutralização do eluato, dot blot.
	
	Transferência do DNA do gel para membrana; incubação com sonda hibridizadora radioativa; revelação.
	
	Desnaturação de proteínas; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação.
	 
	Transferência de proteínas do gel para membrana; bloqueio da membrana; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação.
	
	Cromatografia de afinidade; incubação com anticorpo primário; incubação com anticorpo secundário; revelação.
	Respondido em 25/10/2020 17:12:21
	
	Explicação:
É necessária a transferência das proteínas para uma membrana, onde as reações antígeno x anticorpo se processarão. Colunas de afinidade não são necessárias nesse procedimento.
	
		6a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(Fiocruz, 2010): Nas análises rotineiras de eletroforese bidimensional, após a ruptura dos tecidos e/ou das células, as proteínas são solubilizadas e desnaturadas em soluções contendo detergentes não iônicos ou zwiteriônicos, agentes caotrópicos e pequenas quantidades de agentes redutores, para posterior análise em gel. Assinale abaixo a única alternativa que não descreve exemplos, respectivamente, destas três classes de substâncias:
		
	 
	Duodecil sulfato de sódio, uréia e Ditiotreitol;
	
	CHAPS (3-[(3-Cloroamidopropil)dimetilamônio]-1 propanosulfonato), uréia e iodoacetamida;
	
	sulfobetaínas, tiouréia e β-mercaptoetanol.
	
	Triton-X100, tiouréia e β-mercaptoetanol;
	
	Triton X-100, hidrocloreto de guanidina e Ditiotreitol;
	Respondido em 25/10/2020 17:13:04
	
	Explicação:
O duodecil sulfato de sódio (SDS) é um agente caotrópico.
	
		7a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(INSTITUTO AOCP, 2018): Considerando as técnicas de sequenciamento do DNA, a respeito das características desse tipo de procedimento, assinale a alternativa correta:
		
	
	A presença de ddNTPs na reação dispensa a adição de desoxinucleotídeos trifosfato normais;
	 
	Os fragmentos resultantes são separados eletroforeticamente e submetidos à autorradiografia;
	
	A utilização de vetores plasmidiais, em técnicas de subclonagem de fragmentos de DNA, é denominada "pirossequenciamento".
	
	O método Sanger também é conhecido como sequenciamento de nova geração;
	
	O método de dideoxinucleotídeos utiliza o grupo 3-hidroxila;
	Respondido em 25/10/2020 17:16:46
	
	Explicação:
Devido à ausência do grupamento hidroxila no carbono 3´ da pentose, os nucleotídeos modificados não possuem capacidade de fazer ligação química com um próximo nucleotídeo. O sequenciamento de nova geração corresponde a uma metodologia mais moderna de sequenciamento genômico, de alta vazão, ao contrário do método de Sanger. A presença de ddNTPs não dispensa a necessidade de dNTPs, uma vez que, é necessário produzir moléculas de DNA com diferentes extensões para se elucidar a ordem das bases nitrogenadas. Se apenas ddNTPs estivessem presentes, as moléculas seriam abortadas precocemente, tão logo um ddNTP fosse incorporado. As reações de pirosequenciamento dispensam a necessidade de clonagem molecular.
	
		8a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(FIOCRUZ, 2010): Plasmídeos são moléculas circulares de DNA encontrados em bactérias. Elas são utilizadas como vetores para a clonagem de genes e, portanto fundamentais para o estudo de genes.
Sobre as características típicas encontradas em plasmídeos utilizados para clonagem, assinale a alternativa incorreta:
		
	
	O plasmídeo usualmente tem sítio múltiplo de clonagem que permite a utilização de várias enzimas de restrição durante a clonagem;
	
	O plasmídeo precisa ter um marcador de seleção que confere resistência a bactéria a um antibiótico específico;
	 
	O plasmídeo precisa ter mais de 10.000 pb de forma que seja estável na bactéria;
	
	O plasmídeo usualmente tem um sítio para anelamento de iniciadores de PCR para sequenciamento M13 próximo a sítio de inserção.
	
	O plasmídeo precisa ter uma origem de replicação, que permite a multiplicaçãoindependente do DNA bacteriano;
	Respondido em 25/10/2020 17:18:07
	
	Explicação:
Os plasmídeos são vetores ideais para insertos de DNA menores.
	
		9a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(PUC-Rio, 2015): A figura abaixo representa o resultado de um teste de paternidade. Este teste baseia-se na identificação de marcadores genéticos compartilhados ou não por pai, mãe e filhos.
Considerando a figura, não é correto afirmar que:
		
	
	I é filho biológico do casal;
	
	IV e I são irmãos gêmeos monozigóticos.
	 
	V não pode ser filho biológico deste casal;
	
	III é irmão biológico de I;
	
	II não é filho deste pai;
	Respondido em 25/10/2020 17:22:22
	
	Explicação:
V pode ser filho biológico do casal, dado que metade das suas bandas apresentam compatibilidade com a mãe e, a outra metade, compatibilidade com o pai.
	
		10a
          Questão
	Acerto: 1,0  / 1,0
	
	(Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção hipotética de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia associado à Cas9 bacteriana?
 
 
		
	
	GGGATATCCC;
	
	CCCTCTCGGG.
	 
	GGGAUAUCCC;
	
	CCCTATAGGG;
	
	CCCUAUAGGG;
	Respondido em 25/10/2020 17:23:53
	
	Explicação:
A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser complementar ao DNA que será inativado.