resumo microbiologia NP1

Esta é uma pré-visualização de arquivo. Entre para ver o arquivo original

Célula Procariota e Eucariota
Eucarionte
· Células mais evoluídas, material genético dentro do núcleo
Procariota
· Bactérias, primitivos, unicelulares, material genético no citoplasma
· Sem carioteca
Parede Celular
· Gram positiva = Peptidioglicano + Ácido Teicóico
· VIOLETA
· Expeça camada de pepitideo glicano (associação de aa)
· pepetideoglicano = Rigidez, forma, lise e controla entrada e saída de sustânciasÁCIDO TEICÓICO
PEPTIDEOGLICANO
Membrana Celular
· Gram negativa = Peptidioglicano + Membrana Externa 
· ROSA
· LPS – Lipopolissacarídeos e Lipoproteín
· Mais resistente a antibiótico, pela maior quantidade de membrana
MEMBRANA EXTERNA
PEPTIDEOGLICANO
Membrana Celular
ESPAÇO PERIPLASMÁTICO
ESPAÇO PERIPLASMÁTICO
Morfologia 
Fatores de virulência Bacteriana
1. Capsídeo
2. Fibrinas
3. Flagelos
4. Toxinas Bacterianas
· Endotoxinas – produzidas por Bactérias Gram Negativas;
· Exotoxinas – produzidas por Bactérias Gram Positivas;
· Provocam quadros de INTOXICAÇÃO
Importância do diagnostico microbiano
· Microbiota normal; 
· 3% => Patogênicos ou Oportunistas;
· Multi-resistência;
· Identificação de agentes etiológicos;
· Vias de transmissão;
· Medidas de tratamento e prevenção
Laboratório de microbiologia
Estrutura física:
· Estufa bacteriana, forno Pasteur, autoclave, microscópio biocular, centrifugador de baixa rotação, homogeneizador, banho-maria de pequena dimensão, destilador para água, balança para tarar tubos, balança comum com uma ou duas casas decimais, Bico de Bunsen, geladeira, capela de fluxo laminar
Pré- analítico
· Maioria dos erros
· Informar o paciente até a obtenção de amostra
· Instruções apropriadas para coleta, manipulação e transporte de amostras;
· Preparo do paciente e coleta antes da antibióticoterapia;
· Anti-sepsia de todos os materiais clínicos;
· Coleta do local onde o microrganismo suspeito tenha maior probabilidade de ser isolado;
· Quantidade suficiente de material;
· A amostra deve ser encaminhada diretamente para o laboratório com identificação adequada.
· Amostras sem identificação;
· Amostras visivelmente contaminadas;
· Meios de transporte ou swab inadequados;
· Tempo excessivo de transporte do material;
· Quando houver rejeição de amostras: notificar o responsável envolvido e o médico imediatamente; manter a amostra por, no mínimo, 24 horas.
 Analítico
· Realização do exame
· Análise Microscópica através de diversas técnicas (gram)
· Processamento de Amostras em Meios de Cultivo
· Realização de Testes Bioquímicos
Conduta de Risco e Segurança no Laboratório de Microbiologia
· Biossegurança: medidas adotadas para prevenção, controle e eliminação de riscos presentes nas atividades de pesquisa, ensino, produção e diagnóstico que possam comprometer a saúde humana, animal e ambiental.
· No Brasil, existem duas vertentes da biossegurança: a legal e a praticada. 
· Legal: voltada à manipulação de organismos geneticamente modificados (OGMs) e de células tronco, regulamentada pela Lei n° 11.105/05.
· Praticada: relacionada aos riscos químicos, físicos, biológicos, ergonômicos e de acidentes encontrados nos ambientes laborais, amparada principalmente pelas normas regulamentadoras do Ministério do Trabalho e Emprego (MTE), Resoluções da Agência Nacional de Vigilância em Saúde (ANVISA) e do Conselho Nacional do Meio Ambiente (CONAMA), 
· Equipamentos de segurança: são considerados como barreiras primárias de contenção e, juntamente com as boas práticas em laboratório, visam à proteção dos indivíduos e dos próprios laboratórios, sendo classificados como equipamentos de proteção individual (EPI) e coletiva (EPC).
· Técnicas e práticas de laboratório: nos laboratórios, os indivíduos necessitam receber treinamento em relação às técnicas de biossegurança. Cada unidade deve desenvolver seu próprio manual de biossegurança, identificando os riscos e os procedimentos operacionais de trabalho, o qual deverá ficar à disposição de todos os usuários do local
· Estrutura física do laboratório (barreiras secundárias):  incluem tanto o projeto como a construção das instalações e da infraestrutura do laboratório. A estrutura física laboratorial deve ser elaborada e/ou adaptada mediante a participação conjunta de especialistas, incluindo: os pesquisadores, técnicos do laboratório, arquitetos e engenheiros, de modo a estabelecer padrões e normas a fim de garantir as condições específicas de segurança de cada laboratório
· Gestão Administrativa: levantamento detalhado dos agentes biológicos manipulados, das rotinas e das tecnologias empregadas, da infraestrutura disponível
· Classificação em níveis de biossegurança:
· virulência, modo de transmissão, resistência, concentração, volume, dose infectante e da origem dos agentes biológicos.
· riscos a disponibilidade de medidas profiláticas e de tratamento eficazes, caso aconteça a exposição dos indivíduos ao risco; além dos procedimentos técnicos realizados e dos fatores inerentes aos indivíduos que atuam nos laboratórios 
· Classe de Risco 1 – pouco infectantes.
· Classe de Risco 2 – risco individual moderado e risco limitado para comunidade.
· Classe de Risco 3 – risco individual alto e risco moderado para comunidade .
· Classe de Risco 4 – risco individual e comunitário elevado.
· 
Descontaminação e Descarte
Crescimento Microbiano
· O crescimento de uma população é o aumento do número de células.
· Tanto os fatores físicos (temperatura, pH e pressão osmótica) como os químicos (água, fontes de C, N, O2 e minerais) são necessários para o crescimento.
Influência dos Fatores Físicos
Temperatura
· Os microrganismos são classificados, conforme as variações na temperatura de crescimento, em 
· Psicrófilos- vivem em baixas temperaturas, cresce entre -10 e 20 ºC e ápice 12 ºC
· mesófilos - vivem em temperaturas moderadas, cresce entre 10 e 50 ºC e ápice 37 ºC
· termófilos - vivem em altas temperaturas, cresce entre 40 e70 ºC e ápice 65 ºC
· A temperatura mínima de crescimento é a temperatura mais baixa que permite o crescimento da espécie; a temperatura ótima de crescimento é aquela em que o organismo melhor se reproduz; a temperatura máxima é a maior temperatura em que a espécie ainda é capaz de crescer.
Ph
· A maioria das bactérias cresce melhor entre os valores de pH 6,5 e 7,5.
Influência dos Fatores Químicos
· Todos os organismos necessitam de fonte de carbono. Os organismos quimio-heterotróficos utilizam moléculas orgânicas e os autotróficos usam tipicamente o CO2.
· O nitrogênio é necessário para a síntese de ácidos nucléicos e proteínas e pode ser obtido através da decomposição de proteínas. Poucas bactérias realizam a fixação do nitrogênio.
· enxofre (aminoácidos, vitaminas)
· fósforo (ácidos nucleícos e fosfolipídeos) 
· potássio, magnésio e cálcio (co-fatores)
· elementos traços (Fe, Cu, Zn)
· fatores orgânicos de crescimento (vitamina)
· Agua, Dessecação – destruição e Alimentos desidratados
· Oxigênio:
· aeróbios: organismos que necessitam de O2 para sua sobrevivência 
· anaeróbicos: bactérias que não utilizam o O2 e este é tóxico.. Ex. Clostridium
· anaeróbicos facultativos: que utilizam o O2 quando está disponível mas na sua ausência são capazes de continuar seu crescimento. Ex. E. coli
· microaerófilos: crescem em conc. O2 < atm
Reprodução Bacteriana
· Assexuada
· Crescimento de forma exponencial
1. Fase lag : imediatamente após sua inoculação no meio, as células começam a se ajustar às condições físicas e aos nutrientes disponíveis, sintetizando enzimas e coenzimas necessárias para seu crescimento. 
2. Fase log : durante esta fase todas as células dividem-se a intervalos regulares de tempo resultando num aumento exponencial do número de indivíduos na população. Nela ocorre intensa multiplicação que permanece enquanto não houver limitação de nutrientes.
3. Fase estacionária: a diminuição do ritmo de crescimento, que ocorre ao fim da fase exponencial, dá início à fase estacionária em que o número de indivíduos permanece constante no decorrer
do tempo. 
4. Fase de declínio: após a fase estacionária, a taxa de morte começa a exceder a de divisão, ocasionando um decréscimo no número de bactérias, entrando a cultura na fase de morte, cuja duração é também bastante variável. 
Testes Usados para a Identificação
· Fazendo-se um pequeno número de testes simples a partir da cultura pura de um patógeno, o gênero ou a espécie do organismo pode ser determinado:
· -coloração de Gram: permite dizer se é Gram (positiva ou negativa), morfologia (coco, bacilos, curvado ou em forma de espirais), formação de grupos (pares, cadeias, tétrades ou cachos) 
· -colônia isolada em vários meios: forma, tamanho, cor, tipo de hemólise que produz.
· - semeadura em meios seletivos e diferenciais e testes bioquímicos: ajudam a determinar o gênero e espécie; se necessário fazer a sorotipagem. Ex. ágar MacConkey, catalase e oxidase 
Meio de cultura
· Um meio de cultura é o material nutriente preparado em laboratório para o crescimento de microrganismos. Sempre estéril.
· O meio de cultura no qual já existe o microrganismo crescendo é denominado inóculo.
· Os microrganismos crescidos em meio de cultura são denominados cultura bacteriana.
· Ágar é o agente solidificante utilizado nos meios de cultura.
· Meios Sintéticos
· Composição química qualitativa e quantitativamente conhecida
· Pode ser enriquecido, também conhecidos como “simples”
· composição química definida.
· Meios Complexos
· Contém produtos cuja composição química não é perfeitamente definida
· Maior parte dos meios utilizados
· composição química não definida
· O meio seletivo é utilizado para favorecer o crescimento de um desejado organismo através da inibição do crescimento dos outros, pela adição, ao meio de cultura, de sais, corantes ou outros compostos químicos. Ex. MacConkey
· Favorecem o desenvolvimento de determinados microrganismos em detrimentos de outros 
· Geralmente pela adição de substâncias inibidoras
· contém substâncias que inibem o desenvolvimento de determinados grupos de microrganismos, permitindo o crescimento de outros.
· O meio diferencial é utilizado para distinguir diferentes organismos. Ex. ágar sangue, MacConkey
· Permite o desenvolvimento de microrganismos com características relativamente definidas
· Permite diferenciar um grupo um uma espécie de microrganismo
· contém substâncias que permitem estabelecer diferenças entre microrganismos muito parecidos. 
· 
· Um cultivo de enriquecimento é utilizado para favorecer o crescimento de um determinado microrganismo presente em uma cultura mista.
· nutrientes adequados ao crescimento de microrganismos presentes em baixos números ou de crescimento lento. 
· Sólidos – contém 1% a 2% de ágar.
· Maior de 2% de ágar
· Tubos ou placas de Petri
· Semi-Sólidos – contém 0,0075% a 0,5% de ágar com consistência intermediária de modo a permitir o crescimento de microrganismos em tensões variadas de oxigênio e para verificação da motilidade.
· Pequena porcentagem de ágar
· Observar motilidade bacteriana
· Líquidos (Caldos) – não contém ágar, utilizado para enriquecimento de culturas e provas bioquímicas.
· Nutrientes em solução aquosa
· Crescimento bacteriano: turvação
Obtenção de Culturas Puras
· As culturas puras normalmente são obtidas através do método de semeadura em placa.
· Uma colônia é uma massa de células bacterianas visíveis, originadas, teoricamente, a partir de uma única célula.
Meios e Metodologia para o Crescimento de Anaeróbicos A eliminação do O2, que pode afetar o crescimento dos organismos anaeróbicos, é realizada através da utilização de compostos químicos como redutores no meio de cultura.
· As placas de Petri podem ser incubadas em jarras de anaerobiose ou em ambientes (estufas) anaeróbicos
Técnicas Especiais de Cultivo
· Os incubadores de CO2 ou jarras contendo vela são utilizados para o crescimento de bactérias que necessitam de concentrações mais altas de CO2.Ex. Campylobacter.
Preservando Culturas Bacterianas
· As bactérias podem ser conservadas por longos períodos de tempo através dos métodos de congelamento em baixas temperaturas e liofilização.
Crescimento de Culturas Bacterianas
· Divisão Bacteriana
· A divisão binária é o método normal de reprodução bacteriana, no qual uma única célula se divide dando origem a duas células idênticas.
· Algumas bactérias se reproduzem por brotamento, formação de esporos aéreos ou por fragmentação.
Tempo de Geração
· O tempo necessário para uma célula se dividir ou uma população duplicar é denominado tempo de geração.
· A maioria das bactérias apresenta um tempo de geração de 1 a 3 h. 
Representação Logarítmica das
Populações Bacterianas
· A divisão bacteriana ocorre conforme uma progressão logarítmica (2 células, 4 células, 8 células, etc.)