2° SIMULADO DE PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV BIOLÓGICAS

Prévia do material em texto

Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS 
Aluno(a): 
Acertos: 9,0 de 10,0 15/11/2020 
 
 
1a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
A respeito da quantificação de DNA utilizando espectofotometria, marque a alternativa 
INCORRETA. 
 
 Quando a razão das leituras no comprimento 260nm/280nm estão baixas 
(abaixo de 1,4 aproximadamente) podemos sugerir uma boa qualidade da 
extração ácido nucleico (alta pureza). 
 
A quantificação de DNA por espectrofotometria é realizada por medição da 
quantidade de luz absorvida pelo DNA em solução no comprimento de onda de 
260 nm. 
 
O benefício da utilização de análise por espectrofotometria é a capacidade de 
determinar a pureza da amostra usando o cálculo de razão das leituras no 260 
nm/ 280 nm. 
 
Na espectrofotometria quanto maior for a absorção de luz pela amostra, maior a 
concentração de DNA na amostra. 
 
 A técnica é capaz de determinar as concentrações médias dos ácidos nucléicos 
DNA ou RNA presentes em uma amostra, bem como sua pureza. 
Respondido em 18/11/2020 00:27:23 
 
Explicação: 
Quando a razão das leituras no 260 nm/ 280 nm é abaixo de 1,4 podemos sugerir a 
presença de proteínas ou outros contaminantes na amostra de ácido nucleico. 
 
 
2a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
(Fiocruz, 2010): A retrotranscrição de RNA genômico viral em moléculas de DNA 
complementar para a sua detecção por técnica de PCR é denominada: 
 
 
sequenciamento. 
 
microscopia ótica; 
 
Imunoperoxidase; 
 RT-PCR; 
 
PCR em tempo real; 
Respondido em 18/11/2020 00:28:14 
 
Explicação: 
Do inglês: Reverse transcription polymerase chain reaction. 
 
 
3a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
(Polícia Científica, PE, 2016): A respeito de eletroforese, uma metodologia amplamente 
empregada para separação, isolamento, análise e manipulação dos ácidos nucleicos, 
assinale a opção correta: 
 
 
Os ácidos nucleicos possuem uma carga geral total positiva, devido aos seus 
grupamentos fosfato do arcabouço e, consequentemente, quando aplicados em 
um gel de agarose ou poliacrilamida, migram em direção ao ânodo. 
 A quantificação de DNA em gel de agarose é uma técnica de menor precisão, 
comparada a eletroforese em acrilamida, sendo utilizada como instrumento para 
averiguação de êxito na etapa de extração; 
 
A identificação dos fragmentos amplificados de DNA não pode ser realizada em 
gel de poliacrilamida; 
 
A eletroforese em gel de agarose é usada para separar proteínas de tamanhos 
diferentes, que podem ser detectadas por fluorescência; 
 
A eletroforese consiste na migração das partículas de uma solução coloidal sob a 
influência de um campo magnético onde a polaridade negativa atrai as moléculas; 
Respondido em 18/11/2020 00:28:15 
 
Explicação: 
A eletroforese em gel de agarose destina-se apenas a ácidos nucleicos, enquanto a 
eletroforese em gel de poliacrilamida pode ser empregada para ácidos nucleicos e 
proteínas. Na técnica de eletroforese, graças à aplicação de campo elétrico, as partículas 
são induzidas a migrar no polímero. O movimento das partículas é determinado em função 
da repulsão do pólo negativo uma vez que, em função dos seus respectivos grupamentos 
fosfato, o DNA possui cargas semelhante. 
 
 
4a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
A PCR em Tempo Real também denominada qPCR, foi descrita pela primeira vez em 
1993 por Higuchi e seus colaboradores. Sobre esse tema, marque V para as afirmativas 
verdadeiras e F para as falsas. 
( ) Ela é uma variante da reação de PCR convencional, pois a amplificação e a detecção 
ocorrem simultaneamente, com possibilidade de gerar resultados quantitativos com 
maior precisão. 
( ) A quantificação na PCR em Tempo Real é mensurada pela quantidade de produto 
amplificado durante cada ciclo (através da fluorescência emitida). Essa metodologia 
utiliza um equipamento com sistema de monitoramento da emissão de fluorescência. 
( ) Na PCR convencional, é necessária a preparação de gel de agarose para 
visualização; na PCR em tempo real não ocorre manipulação pós-PCR. 
Assinale a alternativa correta. 
 
 
F, V, F 
 
V, F, F 
 V, V, V 
 
F, F, F 
 
F, F, V 
Respondido em 18/11/2020 00:31:42 
 
Explicação: 
V, V, V 
 
 
5a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
Considerando os princípios das técnicas de hibridização e suas aplicações dentro da 
biologia molecular, assinale a alternativa correta: 
 
 Não existe técnica de hibridização capaz de avaliar 
expressão gênica. 
 A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo 
expressão gênica é o Northern Blotting; 
 A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo 
expressão gênica é o Southern Blotting; 
 Southern, Northern e Western Blotting podem ser 
utilizadas para estudos envolvendo expressão gênica; 
 A técnica de hibridização ideal para estudos envolvendo 
expressão gênica é o Western Blotting; 
Respondido em 18/11/2020 00:32:16 
 
Explicação: 
A técnica de Northern blot corresponde a uma técnica de 
hibridização de moléculas de RNA com sondas de 
oligonucleotídeos marcadas. Trata-se de uma 
metodologia útil, portanto, na detecção de RNA 
mensageiro (RNAm), nos estudos de expressão gênica, 
na avaliação da degradação de RNA e splicing, por 
exemplo. 
 
 
6a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
(UnB, Cespe): Em um experimento de proteômica, ao se analisar géis de eletroforese 
bidimensional provenientes de amostras de eritrócitos humanos, comparando-se duas 
situações diferentes (exposto versus não exposto a um medicamento), foram analisadas 
amostras de 3 indivíduos em cada condição, sendo cada amostra analisada em triplicata, 
em um total de 18 géis. Para que seja possível determinar quais proteínas devem ser 
identificadas como presentes em quantidades distintas nas duas condições, é necessário 
realizar determinadas etapas. Assinale opção que apresenta a ordem correta de 
realização dessas etapas: 
 
 
pareamento dos spots entre todos os grupos; análise estatística comparando as 
coordenadas cartesianas dos spots; detecção, para delimitação das áreas 
dos spots; 
 
análise estatística comparando massa molecular e pI dos spots; detecção, para 
delimitação das coordenadas cartesianas de cada spot; pareamento entre 
os spots de cada grupo; 
 
detecção, para determinação das coordenadas cartesianas dos spots; análise 
estatística da variação de massa molecular de cada spot; pareamento com base 
nas intensidades de cada spot. 
 
detecção, para delimitação das áreas dos spots; pareamento dos spots em cada 
grupo e, a seguir, entre os grupos; análise estatística comparando as 
intensidades dos spots; 
 pareamento, para delimitação das coordenadas e da intensidade de 
cada spot; detecção, para a comparação entre os grupos; análise estatística para 
validação dos dados de detecção; 
Respondido em 18/11/2020 00:34:50 
 
Explicação: 
Existem softwares que comparam os géis bidimensionais permitindo a contagem do número 
de spots, a caracterização automática dos valores de pI e massa molecular, análise de 
níveis de expressão e etc, validando os dados estatisticamente ao final. 
 
 
7a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
Com relação ao sequenciamento de DNA, método Sanger, assinale a alternativa 
correta. 
 
 
 
Após a etapa de desnaturação do DNA, é colocado um primer na extremidade 5' 
de uma das cadeias e, com a ajuda de uma DNA polimerase, sintetiza-se a 
cadeia complementar. 
 
Os métodos de sequenciamento têm base na produção de fragmentos de DNA de 
comprimento crescente, que começam em um ponto comum e possuem todos os 
quatro tipos de nucleotídeos marcados nas extremidades. 
 Os nucleotídeos empregados nessa técnica são quimicamente modificados de 
forma que não apresentam um terminal hidroxila (3-OH), impedindo a inserção 
de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. 
 
O método de Sanger revolucionou o sequenciamento de DNA pela utilização de 
substâncias radioativasmarcando os ddNTPs 
 
Após o término da reação de sequenciamento, ela é submetida à eletroforese 
capilar. Todos os fragmentos recém-sintetizados, cada um terminado em um 
nucleotídeo diferente e cada um marcado com um diferente fluoróforo, são 
separados pelas respectivas cores. 
Respondido em 18/11/2020 00:39:35 
 
Explicação: 
Os nucleotídeos empregados nessa técnica são os didesoxinucleotídeos que 
são quimicamente modificados por não apresentarem um terminal hidroxila (3-OH), 
impedindo a inserção de um novo nucleotídeo pela DNA polimerase. 
 
 
8a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
 Na clonagem, "células competentes" são: 
 
 
B) a fase de crescimento da estirpe. 
 
A) a marca comercial da estirpe empregada. 
 
C) o processo de eletroporação. 
 D) sinônimo de "células transformadas" 
 
 as alternativas "c" e "d" estão corretas 
Respondido em 18/11/2020 00:40:06 
 
Explicação: 
Células competentes ou células transformadas são aquelas que adquiriram o plasmídeo 
contendo o gene alvo. 
 
 
 
9a 
 Questão 
Acerto: 1,0 / 1,0 
 
(UEL, 2017): O teste de DNA abaixo foi solicitado por uma 
mulher que queria confirmar a paternidade dos filhos. Ela 
levou ao laboratório amostras de cabelos dela, do marido, dos 
dois filhos e de um outro homem que poderia ser o pai. Os 
resultados obtidos estão mostrados na figura abaixo: 
 
 
 
A partir dos resultados podemos obter as seguintes conclusões, exceto: 
 
 
o filho 2 é do marido; 
 o filho 2 não é dessa mãe; 
 
o marido e o outro homem não são irmãos. 
 
o filho 1 é do outro homem; 
 
o filho 1 compartilha metade de seu material genético com a mãe; 
Respondido em 18/11/2020 00:35:27 
 
Explicação: 
Não podemos excluir a maternidade nesse caso, pois metade das bandas do filho 2 
apresenta compatibilidade com a mãe em questão. 
 
 
10a 
 Questão 
Acerto: 0,0 / 1,0 
 
(Adaptado de UNIFESP, 2017): Considere uma infecção 
hipotética de uma bactéria por um vírus patogênico. Supondo 
que no DNA viral exista a sequência de bases nitrogenadas 
CCCTATAGGG, qual será a sequência de bases no RNA-guia 
associado à Cas9 bacteriana? 
 
 
 
 
CCCTATAGGG; 
 GGGATATCCC; 
 GGGAUAUCCC; 
 
CCCUAUAGGG; 
 
CCCTCTCGGG. 
Respondido em 18/11/2020 00:41:37 
 
Explicação: 
A sequência de bases do RNA-guia associado deve ser 
complementar ao DNA que será inativado.