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Espermograma Sêmen Espermatozóides + Fluido secretado pelos órgãos sexuais acessórios + Células redondas / debris celulares Espermatozóides - Função testicular - Função do epidídimo - Qualidade da espermatogênese Plasma seminal - Função das glândulas acessórias (próstata e vesícula seminal) - Coagulação seminal: Vesícula seminal - Liquefação seminal: Próstata - pH - 60%: Líquido vesicular –Coagulação e pH - 30%: Próstata –Enzimas proteolíticas (liquefação) - 5%: Glândulas bulbouretrais –Lubrificante Células redondas - Infecção genitourinária - Falha na espermatogênese (células jovens) - Câncer testicular Coleta do sêmen - Sala privada próxima ao lab - Período de abstinência: 2 a 7 dias - Reportar qualquer perda da amostra - Deve ser completa (inclui a primeira porção ejaculada) - Limpeza do pênis antes da coleta - Masturbação - Frasco (Plástico ou vidro) estéril - 20 º a 37 º Ficha dos pacientes - Nome - Data de nascimento / idade - Data da coleta - Tempo de abstinência sexual (dias) - Hora da coleta - Método da coleta - Tipo de frasco - Perda do material coletado Coletas excepcionais - Coleta em casa: Coletar e entregar no laboratório em até uma hora - Coleta com preservativo: Preservativo especializado (atóxico e sem lubrificante). Coletar e entregar no laboratório em até 1 hora - Respeitar a temperatura de 36,7-37°C. Coleta do sêmen Coletor estéril Estufa Temperatura 60 minutos Coágulo → líquido Análise seminal Exame macroscópico Espermograma - Coagulação ➢ Após a ejaculação, a amostra seminal se transforma em um gel pela presença de proteínas produzidas pela vesícula seminal ➢ Presença/ausência de coágulos - Liquefação ➢ Período em que o sêmen passa da forma coagulada para o estado líquido ➢ Por isso a importância de ser relatada a hora da coleta ➢ Liquefazer em até 60 minutos (acima de 60 min = anormal) - Viscosidade ➢ Analisada após a liquefação ➢ Com auxílio de uma pipeta graduada ➢ Gotejamento ou filamento <2cm = normal ➢Filamento superior a 2 cm = Viscosidade aumentada - Aspecto/Cor ➢ Após a Coleta: Heterogêneo/Espesso/ Gelatinoso ➢ Após Liquefação: Homogêneo/ Opalescente Esbranquiçado / acinzentado ➢ Anormal: Vermelho (presença de sangue) Amarelada (presença de leucócitos - Volume ➢ Avaliada com pipeta sorológica de 5ml ➢ Volume < 1,5ml = anormal ➢ ↑Vol-exsudato ➢ ↓Vol-obstrução, ejaculação retrógrada, deficiência de andrógenos - pH ➢ Avaliada com papel indicador de pH ➢ < 7,2 = anormal ➢ Reflete o funcionamento das glândulas anexas Diagnósticos Parâmetro Normalidade Alteração Coagulaçã o Ausência de coágulos após 60 minutos Presença de coágulos após 60 minutos Liquefação Presente em até 60 minutos Ausente após 60 minutos Viscosidad e Ausente ou <2 cm >2cm Aspecto/ cor Esbranquiça do Homogêneo Opalescente Amarelado Avermelhado Translúcido Volume ≥1,5ml <1,5 ml pH >7,2 <7,2 Exame microscópico Câmara de Neubauer 1. Aglutinação Espermograma 2. Concentração espermática - É definida como o número de espermatozóides em milhões por mililitro de sêmen (x106por ml); - A contagem dos espermatozóides deve ser realizada por meio de uma câmara de Neubauer - Para se determinar a concentração espermática, conta-se o número de espermatozoides presentes nos 25 quadrados grandes (cinco fileiras) de ambas as câmaras, obtendo-se a média entre as duas contagens; - A concentração de espermatozoides em milhões por mililitro é resultante da média daqueles contados pelo fator de diluição da câmara. N°de sptz por campo Diluiçã o Volum e sême n (μl) Volum e diluent e (μl) Fator de diluição >400 1:20 (1+19) 50 950 20 61 a 400 1:5 (1+4) 50 200 5 5 a 60 1:2 (1+1) 50 50 2 Até 5 Não diluir 1 Concentração = N°de sptz que contou x Fator de Diluição N°de quadrantes contados Diagnósticos Parâmetro Normal Alteração Aglutinação Ausente Presença de aglutinação Concen. espermátic a ≥ 15 milhões de sptz/ml < 15 milhões de sptz/ml -oligozoosper mia - Oligozoospermia leve: concentração varia de 5,0 milhões/ml até 14,9 milhões/ml. - Oligozoospermia moderada: concentração de espermatozoides de 1,0 milhões/ml até 4,9 milhões/ml. - Oligozoospermia grave: < 1 milhão de sptz/ml. - Azoospermia: Ausência de espermatozoides - Criptozoospermia: Presença de espermatozóides após centrifugação. 3. Motilidade espermática - A motilidade é definida como o movimento espontâneo dos espermatozoides. - Avaliação: ➢ Uma alíquota do sêmen liquefeito ➢ Microscopia óptica ➢ Contraste de fase ➢ Aumento de duzentas ou quatrocentas vezes ➢ Preferencialmente, sob condições controladas de temperatura (37ºC) Espermograma - Os espermatozoides podem ser classificados de acordo com três padrões de motilidade (OMS, 1999): ➢ Grau a: Sptz móveis com progressão rápida ou linear ➢ Grau b: Sptz móveis com progressão lenta ou não-linear ➢ Grau c: Sptz sem progressão ➢ Grau d: Sptz imóveis 4. Contagem total - É o número absoluto de espermatozóides em uma amostra. - N° total de espermatozoides (milhões) = Concentração de espermatozóides volume da amostra Diagnósticos Parâmetro Normalidad e Alteração Motilidade Motilidade progressiva acima de 32% Motilidade progressiva espermática abaixo de 32% -Astenozoospe rmia 5. Concentração de células redondas e leucócitos - Teste de Endtz, ou teste da peroxidase: permite identificar os neutrófilos polimorfonucleares (diferenciando - os das células redondas), que são os de maior importância clínica e geralmente provêm do epidídimo. Os neutrófilos também são chamados de granulócitos, pois possuem grânulos contendo uma enzima chamada peroxidase. - Número elevado de leucócitos no sêmen pode indicar infecção genital clínica ou subclínica. Diagnósticos Parâmetro Normalidade Alteração Células redondas Abaixo de 1 milhão/ml Acima de 1 milhão/ml (realizar a identificação das células redondas) Neutrófilos Abaixo de 1 milhão/ml Acima de 1 milhão/ml 6. Morfologia espermática - Forma e aspecto dos espermatozoides - Sistemas de classificação: manual da OMS e critério estrito de Kruger - Espermatozóide normal: ➢Cabeça regular/ lisa, oval, acrossomo de 40 a 70% do segmento cefálico; ➢Peça intermediária delgada, sem defeito ➢Cauda uniforme, sem defeito - Conta - se 100 espermatozóide, classificando-os de acordo com as características a seguir Preparo da lâmina Espermograma 1.Esfregaço 2.Secar por 10 minutos 3.Mergulhar em cada corante do panótico 1 x 4.Secar 5.Leitura em aumento de 1000x Espermograma Diagnósticos Parâmetro Normalidade Alteração Morfologia espermátic a ≥4% de sptz normais Abaixo de 4% de sptz normais -teratozoospe rmia Diagnósticos final Parâmetro Normalida de Alteração Concentração espermática ≥15 milhões de sptz/ml Oligozoospermi a Motilidade espermática ≥32% de motilidade progressiv a (a+b) Astenozoosper mia Morfologia ≥4% de sptz normais Teratozoosper mia Espermograma normal Normozoosper mia
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