Staphylococcus sp - Diagnóstico - Parte 3

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Diagnóstico Microbiológico
Staphylococcus sp. Coagulase 
positiva e negativa
Diagnóstico Microbiológico
• Procedimentos
Coloração de Gram
Microscopia 
Cocos Gram 
Positivos
Diagnóstico Microbiológico
Diagnóstico Microbiológico
• Teste de catalase
• A catalase é uma enzima que decompõe o peroxido de hidrogênio (H2O2) em
água e oxigênio (O2).
• Após a aplicação da solução de H2O2 a 3%, a produção de bolhas (devido a
produção de gás oxigênio) evidencia o resultado positivo para catalase.
Catalase positiva
Gênero Staphylococcus sp. 
Catalase negativa
Gênero Streptococcus sp.
Diagnóstico Microbiológico
Diagnóstico Microbiológico
• Teste do Manitol
• O Ágar Manitol é um meio de cultura com
indicador vermelho de fenol, seletivo para
Staphylococcus sp. patogênicos e para a
diferenciação de S. aureus (coagulase negativa)
de outros Staphylococcus coagulase negativa.
• Esta meio verifica a capacidade de fermentar o
manitol contendo 7,5% de cloreto de sódio. O
meio tem coloração rosa, e a formação de halo
amarelo ao redor das colônias indica então S.
aureus. Positivo: S. Aureus 
Negativo: S. epidermidis 
S. saprophyticus
Ágar Manitol
Diagnóstico Microbiológico
• Teste da Coagulase
• Verifica a capacidade de microrganismos reagirem com o plasma sanguíneo
(de coelho) e formarem um coagulo, já que a coagulase é uma proteína com
atividade similar à protrombina, capaz de converter o fibrinogênio em fibrina.
• Separa as espécies de Staphylococcus aureus (coagulase positiva) de outras
espécies do mesmo gênero coagulase negativas.
Incubar por 4 h a 35±2ºC em estufa ou banho-maria; caso 
não haja formação de coágulo, incubar por 24 h.
Coagulase 
livre e 
ligada
Coagulase ligada na superfície da parede celular
Formação de grumos em 10 segundos.
S. aureus
S. epidermidis
S. saprophyticus 
Diagnóstico Microbiológico
• Teste da Dnase
• Verificar se a bactéria possui enzima desoxiribonuclease, a qual degrada o 
ácido nucléico (DNA) presente no meio Ágar DNase.
• Fazer um inóculo denso de forma circular em uma 
pequena parte do meio;
• Incubar a 35±2ºC por 18 - 24 h. (A placa pode ser 
inoculada com várias cepas);
• Após a incubação, no momento da leitura colocar o 
HCl de maneira que cubra as colônias, aguardar 30 
segundos.
• Formação de halo transparente, identifica Staphylococcus aureus;
• Ausência de formação de halo transparente, identifica Staphylococcus coagulase negativa
Diagnóstico Microbiológico
Diagnóstico Microbiológico
É um antibiograma realizado
(Novobiocina) para diferenciar o S.
saprophyticus do S. epidemides.
Sem halo = resistente Com halo = Sensível 
Disco de novobiocina 5 µg
Ágar sangue ou Ágar Müeller-Hinton
• Teste de sensibilidade à Novobiocina
FIM