Transcrição e Processamento do RNA

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Transcrição e
Processamento do
RNA
Características gerais da Transcrição
➭RNA polimerase = 5´→ 3´
➭Hidrólise de ATP
➭Várias cópias de um mesmo
gene podem ser feitas em um
curto intervalo de tempo
➭Não precisa de um iniciador
➤Em eucariotos: uma unidade
de transcrição → um gene
(monocistrônico)
➤Em procariotos: uma unidade
de transcrição → conjunto de
genes (policistrônico)
➤RNA Polimerase:
a) Procariotos:1 tipo com 4
subunidades e quando se liga com
o fator sigma é chamada de
holoenzima de RNA pol.
b) Eucariotos: 3 tipos → RNA
polimerase I (sintetiza RNAr), RNA
pol II ( sintetiza RNAm) e a RNA
pol III (RNAt e pequenos RNA)
Início da Transcrição
a) Procariotos: Porção sigma
reconhece uma região promotora
com uma sequência de bases
entre a região -35 a -10 e faz com
que a RNA polimerase ligue-se
fortemente no DNA molde.
b) Eucariotos: Fatores gerais de
transcrição (TFIIA, TFIID, TFIIB…)
serão adicionados juntamente com
a RNA pol II no sítio promotor
TATAbox. Sítios reguladores:
ativadores, silenciadores e
isoladores podem afetar o início da
transcrição;
➤Sentido 5´→ 3´
a) A escolha da fita molde de cada
gene é determinada pela
localização e orientação do
promotor ( único gene)
b) A direção que ela segue determina
qual das duas fitas será utilizada
como molde
➭ Esquerda para direita: fita de baixo
➭ Direita para a esquerda: fita de
cima
Término da Transcrição
a) Procariotos: Regiões ricas em G
e C formando um grampo com
mais de 8 U
➭reconhecimento, em alguns casos, da
proteína rho rica em c (auxilia na
formação do grampo) → genes
dependentes de proteína rho
(antibióticos podem atuar nessa parte e
prejudicar o término da transcrição)
b) Eucariotos: Fator estimulador de
clivagem e fator específico de
clivagem e a poliadenilação faz
com que a RNA pol II tenha uma
mudança conformacional e
interrompe a transcrição
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Processamento do RNA
a) Procariotos: não ocorre,
conforme o RNA é sintetizado
parte dele que foi liberada já pode
ser traduzida pelos ribossomos.
b) Eucariotos:
➭ Após os 25 nucleotídeos: capeamento
5´do transcrito→ remoção do fosfato→
adição do GMP e adição de metil à
guanosina ( nucleotídeo atípico de
guanina) → diferenciando dos outros
RNAs.
➭ cauda Poli A: adenilação da cauda
3´onde enzimas adicionam uma série
repetitiva de nucleotídeos de adenina.
➤ Capeamento 5´
a) o capeamento é a primeira
modificação que ocorre na
molécula de RNA
b) Após a síntese dos 25
primeiros nucleotídeos
c) Fosfatase ( remove P da
extremidade 5´),
Guaniltransferase (adiciona
GMP 5´ para 5´),
Metiltransferase (transfere
um grupo metil a
guanosina)
d) Ajuda a diferenciar os
RNAm dos outros RNA
celulares
e) Ligação do Cap com CBC
(Cap binding complex) -
auxílio no processamento
f) Início da Tradução
➤ Splicing do RNA
a) Procariotos: O RNA
formado já possui a
sequência pronta para ser
traduzida
b) Eucariotos: Através de um
conjunto de enzimas
snRNPs formam um
complexo chamado
spliceossomos que remove
os íntrons e une as regiões
codificadoras - os éxons.
→ Splicing Tradicional!!!!
obs:
➭ Embora existam 25 mil genes
envolvidos com a produção de
proteínas, há mais do que 25 mil
proteínas existentes.
Explicação: Splicing alternativo
(permite a remoção ou
manutenção de regiões intrônicas)
( garante proteínas com isoformas
diferentes)
➤ Cauda Poli A
a) Conforme a RNA poli II move-se
no DNA identifica os sinais de
clivagem e poliadenilação
b) CstF (fator estimulador de
clivagem) e CPSF(fator específico
de clivagem e poliadenilação) →
cauda fosforilada RNA pol II →
extremidade 3´do RNAm
c) poli-A-polimerase (PAP) aciona
200 nucleotídeos A à extremidade
3´
d) RNAm maduro e sinalização para
exteriorização do núcleo
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