Transcrição do DNA

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BASES: GENÉTICA LUIZA LOPES CARVALHO 
Transcricao do Dna 
 Dogma Central da Biologia Molecular: 
DNA-->RNA-->PROTEÍNAS 
 A molécula de RNA é sintetizada a partir da 
informação genética da fita molde. A enzima RNA 
polimerase só consegue sintetizar RNA no sentido 
5’->3’, logo a fita molde de DNA será a de sentido 
3’->5’. 
 Transcrição + Tradução= Expressão gênica 
 
Gene: 
-É uma região da molécula de DNA que apresenta 
uma informação para a síntese de uma proteína. 
- Regiões estruturais de um gene: 
 
 
 
 
 
*PROMOTOR: É a região reconhecida pela RNA pol. 
*CODIFICANTE: É a informação para formar um 
RNA. 
*TERMINAL: Informa que o gene acabou. 
 
Classes de RNA: 
-RNA DE INFORMAÇÃO: 
*Intermediários no processo de síntese de 
proteínas. 
*São traduzidos em polipeptídios. 
*RNA m. 
 
 
 
 
 
 
-RNA’s FUNCIONAIS: Os que não se tornam 
proteínas. 
*Produto funcional 
*Não são traduzidos em polipeptídios 
*RNA t, RNA r, RNA Sn, RNA sno, RNA sca, RNA mi, 
RNA si. 
Transcrição em procariontes: 
-REGIÃO PROMOTORA DE UMA BACTÉRIA: Se 
encontra na região -35 e -10 (Duas sequências da 
região promotora da bactéria). +1 – Inicia a 
transcrição. 
*O sítio de iniciação é geralmente uma purina 
(CAT)- Adenina e Guanina. 
*A sequência -35 (Domínio de reconhecimento pelo 
fator sigma da RNA pol) 
*A sequência -10 (Domínio de desenrolamento da 
molécula de DNA) 
*A separação entre as sequências -10 e -35. 
OBS 1: Polisistrônico- Uma mesma região 
promotora e um mesmo término de transcrição 
apresentam informações para sintetizar diversas 
proteínas. 
OBS 2: RNA mensageiro Polisistrônico: Um mesmo 
RNAm com diferentes sequências codificadoras. 
-A bactéria apresenta o fator transcricional sigma: 
Inicia o processo transcricional; Auxilia o 
reconhecimento da região promotora pela RNA pol. 
Há diversos tipos de fatores sigmas e cada um 
reconhece uma região promotora diferente. 
-RNA pol completa/Holoenzima: Apresenta várias 
subunidades- 2 subunidades alfa, uma subunidade 
beta, beta linha, sigma e w. 
ETAPAS DA TRANSCRIÇÃO: 
-A RNA pol reconhece 
-Rompe as ligações de hidrogênio entre as bases e 
inicio a transcrição 
-Libera o fator sigma (Sinal para o alongamento) e 
Alongamento do RNA. 
DUAS FORMAS DE TERMINAR A TRANSCRIÇÃO EM 
BACTÉRIA: RHO é uma proteína 
-RHO Independente 
*Depende da formação de um grampo na molécula 
de DNA- Capaz de desestabilizar o complexo 
separando o DNA, RNA e RNA pol. 
*Grampo formado- As bases são complementares, 
o que induz a formação de ligação de hidrogênio 
dobrando a molécula de RNA. Também apresenta 
uma sequência final com várias Uracilas (ligações 
fracas)- Facilita o término do pareamento entre o 
RNA e DNA. 
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-RHO dependente 
*Em região up-stream há o reconhecimento pela 
proteína RHO. Conforme a RNA polimerase vai 
sintetizando o RNA, essa proteína caminha em 
direção a RNA pol, chega um determinado 
momento no qual a RNA pol diminui a velocidade de 
síntese, nesse momento a proteína RHO (atividade 
de helicase) se liga a RNA pol, ela rompe as ligações 
de H que compõe o híbrido de RNA com DNA e 
libera o RNA puro. 
PROTEÍNAS ANTI-TERMINAÇÃO: 
-Quando a RNA pol chega a região terminadora ela 
deveria se desligar, porém essas proteínas 
impedem essa atitude, ela continua transcrevendo 
a molécula- RNA muito maior- Informação de mais 
genes. 
Transcrição em eucariontes: 
-ETAPAS: 
1- Iniciação: Ligação do complexo RNA pol II ao 
DNA. 
2-Alongamento: Adição de nucleotídeos ao RNAm 
crescente. 
3-Terminação: Liberação de RNAm e RNA pol II. 
4-Processamento (Exclusivo em procariotos). 
-Diferentemente do processo em procariotos, em 
eucariotos há vários fatores de transcrição 
(conduzem a RNA pol até a região promotora do 
gene). 
-TATA BOX: Situado a -35pb à montante do gene. 
Semelhante à sequência consenso -10 de 
procariotos (TATAAT). Mutações nessa sequência 
diminuem bastante a eficiência do promotor e 
diminuem a taxa de transcrição do gene. Mutação 
em TATA não impede o início da transcrição, mas 
desloca seu ponto de início. 
 
 
-FATORES DE TRANSCRIÇÃO: 
*Cada fator de transcrição que ajuda a RNA 
polimerase II para o início da transcrição é chamado 
de TFIIX (X é a letra que identifica o fator individual). 
*TFIIF é estruturalmente semelhante ao fator sigma 
de procariontes. 
*TFIID: Apresenta as subunidades TBP + 13-14 TAFs 
(Esse fator é o primeiro a interagir com o promotor- 
Sua proteína de ligação é a TBP- Se liga ao TATA) 
*TFIIA, TFIIB e TFIIF se ligam à RNA polimerase II e 
depois ao complexo de iniciação e promove o 
desenrolamento do DNA. 
*TFIIE se junta ao complexo de iniciação ligando-se 
ao DNA e em seguida ao ponto de iniciação da 
transcrição. 
*TFIIH e TFIIJ se juntam ao complexo após o TFIIE. 
*TAF: Fator associado a TBP 
*TAF1 liga a TBP 
*TFA2 liga ao elemento iniciador (Inr) 
*TAF6 e TAF9 ligam ao elemento promotor 
downstream. 
-O primeiro fator de transcrição que se associa ao 
TATA BOX é o TFIID, o qual apresenta em sua 
composição o TBP (tata binding protein). 
OBS: A TFIIA não é absolutamente requirida para 
que esse processo se inicie, mas ela se liga a TFIID. 
-Posteriormente, o TFIIB se liga ao complexo: É 
fundamental para posicionar a RNA pol II. 
-TFIIF estabiliza a RNA pol II com TBP e TFIIB, além 
disso auxilia o recrutamento do TFIIE e TFIIH. 
-TFIIF chega juntamente com a RNA pol II. 
 
-TFIIE atrai o TFIIH, o qual apresenta atividade de 
helicase, ou seja, rompe as pontes de hidrogênio 
abrindo a dupla hélice. Além disso, o TFIIH fosforila 
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a ‘’cauda’’ da RNA pol II, a partir de ATP 
principalmente- Sinal para que a RNA pol II comece 
o processo de transcrição. Após a fosforilação, 
fatores de transcrição saem dessa região, com 
exceção do TBP (Presente no TFIID). 
-Após o início do processo de transcrição, há a 
presença de fatores de extensão, que são proteínas 
que diminuem a probabilidade de dissociação da 
RNA pol II antes que o gene termine. A RNA pol 
também é auxiliada por complexos remodeladores 
de cromatina. 
-Os genes transcritos pela RNA pol II não 
apresentam sítios de término de transcrição, sendo 
assim a polimerase transcreve até perder a 
afinidade pelo DNA. 
-O último complexo a ser liberado é o TFIID. RNA pol 
II e RNA m imaturo se dissociam depois. 
PROCESSAMENTO DO RNA: 
OBS: A enzima RNA pol II é fundamental nesse 
processamento pois apresenta em sua ‘’cauda’’ as 
proteínas que participarão desse processo 
(Proteínas de capeamento e proteínas de 
processamento da extremidade 3’). As outras RNA 
pol não apresentam cauda, logo, outros tipos de 
RNA não apresentam cauda poli-A e quepe 5’. 
-Capeamento na extremidade 5’ 
*GTP com o radical metil ligado a extremidade 5’. 
(Três enzimas participam do processo: Fosfatase-
Retira um fosfato; Guanosil-transferase- Adiciona 
uma guanosinamonofosfato; Metil-transferase- 
Adiciona o radical metil). 
*O CAP protege a extremidade 5’ da ação de 
exonucleases, as quais catalisam dos ácidos 
nucléicos nas suas extremidades. 
*Importante para o endereçamento do núcleo ao 
citoplasma (Onde ocorre a tradução). 
*Início da tradução- Será reconhecido pelo 
ribossomo. 
-Poliadenilação: Adição da cauda poli-A na 
extremidade 3’ do RNA m) 
*Adição de aproximadamente 200 resíduos de 
Adenina para formar uma cauda poli A. 
- Splicing: Extração de Íntrons e junção dos Éxons 
(codificadoras). 
*Spliceossomo: Apresenta 5 RNAs e cerca de 300 
proteínas. RNAsn- PequenosRNAs Nucleares e 
RNPsn- Pequenas partículas de ribonucleoproteínas 
nucleares. (RNAsn associado a proteínas). 
*Local: Regra GU-AG e sequência de Pirimidinas. 
*Etapas: 
1-Clivagem na junção de cadeia 5’. 
2-Ataque ao nucleotídeo. 
3-Clivagem na junção 3’. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
BASES: GENÉTICA LUIZA LOPES CARVALHO