Transcrição DNA

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25/08/2021 BCM 2 Victória Zuppo 
 Universidade Nove de Julho 
 
 
✓ Regulação da expressão 
✓ Tipos diferentes de RNAs com funções distintas 
✓ Diferentes tipos de proteínas 
 
RNA 
✓ São polímeros constituídos por uracila, adenina, 
guanina e citocina. 
✓ Ribonucleotídeos ligados por ligações fosfodiéster 
(açúcar-fosfato). 
✓ Fita simples (formas tridimensionais). 
✓ Sintetizado de forma complementar a fita-molde 
de DNA. 
 
TRANSCRIÇÃO 
✓ Cópia de um segmento específico da sequência de 
nucleotídeos do DNA sob a forma de uma 
sequência de nucleotídeos de RNA. 
✓ A informação na forma de RNA, embora copiada 
em uma forma química distinta, ainda é escrita 
essencialmente na mesma linguagem do DNA – a 
linguagem de uma sequência de nucleotídeos. 
 
 
 
EXPRESSÃO GÊNICA DIFERENCIAL 
✓ A célula pode controlar a expressão de cada um de 
seus genes de acordo com a necessidade do 
momento. 
✓ Cada gene pode ser transcrito e traduzido sob 
taxas diferentes, permitindo que a célula sintetize 
 
 
enormes quantidades de certas proteínas e 
mínimas quantidades de outras. 
✓ Os genes podem ser expressos em diferentes graus 
de eficiência. 
 
 
 
A POLIMERASE DO RNA 
✓ As polimerases do RNA são enzimas que catalisam 
a síntese de RNA tendo como molde uma fita de 
DNA. 
✓ Procariotos possuem apenas um tipo de polimerase 
do RNA 
✓ Eucariotos possuem três tipos de polimerase do 
RNA. 
 
DNA x RNA POLIMERASE 
 
 
 
DNA Polimerase RNA Polimerase 
Catalisa ligações fosfodiéster 
entre dexorribonucleotídeos. 
Catalisa ligações fosfodiéster 
entre ribonucleotídeos. 
Necessita de primers para iniciar 
sua polimerização. 
Não necessita de primers para 
iniciar sua polimerização. 
Tem autocorreção (107) Tem autocorreção (104) 
Cofator Inorgânico Mg+2 Cofator Inorgânico Mg+2 
Transcrição do DNA 
25/08/2021 BCM 2 Victória Zuppo 
 Universidade Nove de Julho 
UNIDADE DE TRANSCRIÇÃO 
✓ Procarioto: carrega a informação de um conjunto 
de genes que são transcritos em uma molécula 
única de RNAm que carrega a informação para 
várias proteínas distintas. 
✓ Eucarioto: carrega informação de apenas um gene, 
e portanto codifica ou para uma única molécula de 
RNA, ou para uma única proteína (ou grupo de 
proteínas relacionadas, se o transcrito de RNA 
inicial for processado de diferentes maneiras 
produzindo diferentes RNAm – Splicing 
Alternativo). 
✓ Nos procariotos há apenas uma RNA polimerase, 
enquanto que nos eucariotos são 3 isoformas. 
 
TRANSCRIÇÃO EM PROCARIOTOS 
✓ Ocorre no citoplasma. 
✓ Promotor: local de ligação do Fator Sigma, local do 
DNA onde se inicia a transcrição 
✓ Fator Sigma: função de reconhecimento específico 
da região promotora, não precisa desenrolar a 
dupla hélice. 
✓ Estão localizados perto do sítio de início da 
transcrição de genes, na mesma fita e a montante 
no DNA (para 5' da fita código). 
RNA Polimerase +Fator Sigma (holoenzima) 
✓ Cofator Inorgânico (Mg+2) 
✓ Ativa na presença do Fator Sigma (σ) 
✓ RNA-polimerase: 
o Abertura da dupla-hélice 
o Liberação do Fator Sigma. 
o Polimerização (5’-3’). 
 
 
 
✓ O processo de parada ocorre quando a RNA 
polimerase encontra uma região terminadora. 
 
TRANSCRIÇÃO EM EUCARIOTOS 
✓ Ocorre no núcleo e então o RNA (maduro) vai ser 
transportado para o citoplasma. 
✓ CTD = Domínio Carboxi-Terminal 
✓ A fosforilação de CTD faz com que componentes da 
maquinaria do processamento do RNA se 
acumulem sobre a RNA-polimerase e estejam 
próximos para modificar o RNA recém-transcrito 
assim que ele emergir da RNA-polimerase. 
✓ Molde é sempre 3’ > 5’ então a transcrição é 
sempre 5’ > 3’. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
PROCESSAMENTO DO RNAm DE 
EUCARIOTOS 
1. Capeamento da Extremidade 5’ (CAP 5’) 
Ocorre logo que a extremidade 5’ emerge. 
a) Retirada de um fosfato 
b) Adição de uma Guanosina Monofosfato (GMP) 
c) Metilação do GMP 
 
Fatores Gerais de Transcrição Função 
TFII-D (TBP) Reconhece o TATA Box (-25) 
TFII-B Reconhece o BRE (-35). 
TFII-F Estabiliza a RNA-polimerase II 
com TFII-D e TFII-B. Atrai TFII-
E e TFII-H. 
TFII-E Atrai TFII-H. 
TFII-H Abre a dupla-hélice. Fosforila 
CTD (separação dos TFIIs). 
Libera a RNA-polimerase II do 
promotor. 
1. A TBP liga-se a TATA-box. 
2. O TFIIB liga-se a TBP e recruta o complexo TFIIF RNA 
Polimerase. 
3. TFIIF liga-se a RNA Polimerase II e ao TFIIB, e alinha 
a polimerase no promotor. 
4. O TFIIE recruta o TFIIH e possui atividade de 
helicase. 
5. O TFIIH desenrola o DNA na região promotora e 
fosforila a RNA Polimerase, ativando-a. 
6. Após a síntese de um polinucleotídeo, o TFIIH e o 
TFIIE se dissociam do complexo 
7. O RNA é alongado pela ação de fatores de 
alongamento e, após a término da transcrição, a 
RNA Polimerase é desfosforilada e inativada. 
25/08/2021 BCM 2 Victória Zuppo 
 Universidade Nove de Julho 
2. Splicing 
a) Remove os íntrons de pré-RNAm recém-
transcritos. 
b) Enorme gasto energético (ATP). 
c) Reação de Transesterificação 
✓ Spliceossomo: Complexo ribonucleoprotéico que 
realiza o splicing. 
o snRNAs: U1, U2, U4, U5, U6 (reconhecem as 
sequências para que o splincing ocorra) 
o snRNPs (snurps): snRNA + proteínas 
3. Poliadenilação 
o Adição de uma cauda poli-A na extremidade 3’ 
pela enzima Polimerase poli-A. 
o Essa extremidade é inicialmente clivada por 
uma enzima que corta a cadeia de RNA em 
uma sequência determinada de nucleotídeos 
 
RNAs 
✓ As células produzem diversos tipos de RNA a partir 
da transcrição do DNA: 
o Maioria dos genes: RNA codificantes 
▪ Será traduzido em uma proteína 
▪ RNAm 
o Minoria dos genes: RNA não-codificantes 
▪ Não será traduzido em uma proteína 
▪ RNA é o produto final 
▪ Função catalítica ou estrutural (fita 
simples com formas tridimensionais) 
 
 
 
 
 
 
 
ANTIBIÓTICOS (QUE AGEM NA TRANSCRIÇÃO) 
✓ Rifampicina: inibe a RNA polimerase bacteriana 
✓ Actinomicina D: contém um pentapepitídeo que se 
liga aos sulcos do DNA, impedindo que este sirva 
como molde para a replicação e a transcrição. 
 
EXERCÍCIOS 
1. Sobre o spliceossomo é CORRETO afirmar: É 
constituído por um complexo de proteínas e RNAs que catalisam as 
duas reações de transesterificações para união de éxons e remoção 
dos íntrons. 
2. Sobre o Splicing alternativo é correto 
afirmar: Processo da Regulação Pós-Transcricional, Aumento da 
variabilidade proteica, Proteoma maior que genoma. 
3. Para sair do núcleo o RNA eucariótico necessita 
passar por modificações importantes. Assinale a 
alternativa correta quanto às alterações ocorridas 
no RNA mensageiro eucariótico. Na extremidade 3’ é 
adicionada uma sequência de nucleotídeos contendo adenina. 
 
 
RNA FUNÇÃO 
RNAm RNAs mensageiros da informação, codificam 
proteínas. 
RNAt RNA transportadores, funcionam como 
adaptadores entre RNAm e os aminoácidos. 
RNAr RNAs ribossomais, formam a estrutura básica 
do ribossomo e catalisam a síntese proteica. 
snRNAs Pequenos RNAs nucleares, auxiliam no 
processo de splicing. 
microRNA (Íntrons) Silenciamento gênico, bloqueio da tradução 
no ribossomo e desadenilação. 
siRNA (Sintético) Silenciamento gênico, degradação do RNAm. 
Telomerase Possuem um molde de RNA, síntese dos 
telômeros. 
Ribozimas RNA catalisador. 
Introns são sequências de nucleotídeos que não codificam 
para aminoácidos. Um intron começa com uma sequência 
5’-GU e termina com uma sequência 3’-AG. 
As modificações (campeamento e poliadenilação) 
aumentam a estabilidade de uma molécula de RNAm, 
facilitando sua saída para o citoplasma.