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MICROSCOPIA: · CONCEITO: · É a ciência que estuda os métodos e as aplicações em que se usa o microscópio para a observação de objetos com dimensões inferiores ao limite de resolução do olho humano · Robert Hooke, 1665: o primeiro a observar células em um pedaço de rolha com um microscópio rudimentar · Com uma única lente, o microscópio feito por ele permitia observar de glóbulos vermelhos e espermatozoides de animais até embriões de plantas e micróbios. O inglês Robert Hooke aperfeiçoou esse instrumento. ... Em 1665, Hooke publicou o livro 'Micrografia', que o consagraria no meio científico europeu. · CATEGORIAS: · Imagem caracterizada por três parâmetros: aumento, resolução e contraste · 1- microscopia luminosa ou de luz (ML): · Radiação de ondas luminosas, refratada através de lentes vidro até encontrar o olho do observador · Precisa-se que os tecidos estejam finos para serem observados · Área observada luminosa(clara) e o objeto estudado mais escuro · Permite visualização com aumento limitado: de 1800 a 2000 vezes · Mais conhecido: microscópio óptico (mais barato e mais utilizado) · 2- microscópio eletrônico (ME): · A sua fonte de energia é a radiação de feixes de elétrons, refratada por lentes eletrônicas até chegar ao olho do observador · Permite visualização com aumento bem superior ao de luz · Permite também um maior contraste e imagem mais detalhada (em 3D) · Possui um custo mais caro que o de luz · Mais conhecidos: ME de transmissão e ME de varredura ME de varredura ME de transmissão · MICROSCOPIA OPTICA: · A maioria dos componentes celulares são transparentes e muito pequenos, para que possa haver sua visualização deve-se preparar o tecido e usar a microscópio · O poder de resolução do olho humano é de no máximo: 0,1mm (100micrometros) · Possui um conjunto de lentes que permite seu aumento · Poder de resolução: 250mm (0,5micrometrtos) · Ordem entre execução e analise: · Observar (posição e o objeto como um todo) · Ajustar a intensidade luminosa · Ajustar a base para a lamina (colocar a lamina na posição correta) · Objetivas: 4,10,40,100 vezes · Calculo: multiplica a lente da ocular com a lente da objetiva · Exemplo: olho humano – 10x/ objetiva – 40x 400x · REPRESENTAÇÃO DO ML: · OCULAR: onde coloca o olho, amplia a imagem fornecida pelo sistema de objetivas em 5 a 15 vezes, essa ocular possui também uma lente. · BRAÇO: É o suporte da platina e do revolver (onde se deve carregar) · CAMHÃO: serve de suporte para o sistema ocular. Alguns modelos possuem aster (vareta) que serve para direcionar o objeto estudado · REVOLVER: suporte das objetivas e permite a sua mudança (giratória) · OBJETIVAS: amplia a imagem do objeto com aumento máximo de 100x a 120x · Obs: objetiva de 100: usa-se óleo de imersão, fazendo com que a objetiva escorregue pela lamina e não arranhe. Depois deve-se limpar a lente com álcool isopropilico · PLATINA OU MESA: suporte para a preparação do objeto que será analisado · DIAFRAGMA: regula a intensidade de luz · CONSERVADOR: distribui a luz que atravessa o diafragma de forma correta (fica embaixo da platina) · FONTE DE LUZ · PARAFUSO MACROMETRICO: permite o movimento de aproximação e afastamento entre a mesa e as objetivas · PARAFUSO MICROMETRICO: faz o ajuste final do foco · PARAFUSO DE CHARRIOT: possibilita movimentos laterais e antepropostas da mesa, usa-se quando quer movimentar a lamina · BASE OU PÉ: suporte de todos os elementos do microscópio · CUIDADOS COM O MICROSCOPIO: · Transporta-lo com ambas as mãos: uma mão por baixo da base e outra no braço · Mantê-lo a alguma distancia da borda da bancada · Evitar molha-lo · Limpar as lentes com lenços ou flanelas. Quando possível com álcool isopropilico · Usar óleo de imersão quando utilizar a objetiva de 100x · Após a utilização, encaixar a objetiva de menor aumento alinhada com a ocular · MICROSCOPIO ELETRONICO DE TRANSMISSÃO: · Permite visualizar a ultra-estrutura das células e da matriz extracelular · Poder de resolução superior ao microscópio óptico · Utiliza feixes de elétrons ao invés de luz · Tecidos corados com metais pesados: uranio ou chumbo · Possibilita aumentos finais de até 10.000.000x · MICROSCOPIO ELETRONICO DE VARREDURA: · Permite a visualização tridimensional de espécimes sólidos (ao invés de cortes) · Material corado com materiais pesados: ouro e paládio · Utiliza feixes de elétrons multiplicados
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