Preparação de laminas para biópsia

Prévia do material em texto

RECEBIMENTO DO MATERIAL: 
• Coloca em potes, que sõo utilizados em 
amostras de urina, por exemplo, com a 
presença de formol. 
• Importante lembrar que a quantidade de 
formol seja em média o dobro da peça a 
ser acondicionada.- O material deve ficar 
pelo menos 24 hrs fixado no formol. 
• Importante vedar a peça, para que não 
haja perdas. 
• Ao retirar o material do pote para fazer a 
coleta é importante analisar a hipótese de 
diagnóstico do cirurgião dentista, por 
exemplo. 
 
1. COLETA DO MATERIAL 
• Indicar a quantidade de amostras que 
foram enviadas- Forma delas, se é firme e 
elástica e sua coloração. 
• Faz a medição. 
• Será acondicionado em cacetes que serão 
identificados. 
• Colocação nos cacetes. 
Se o material é grande: 
• A coleta do material é realizada por meio 
de uma navalha, que secciona a área que 
tem interesse. 
• Corte de uma área que consiga ser 
acondicionada nos cacetes. 
Identifica o cacete tanto do lado de dentro, como 
do lado de fora, sendo escrito com um lápis. 
2. FIXAÇÃO EM FORMALINA OU FORMOL 
TAMPONADO. 
• Colocar o material em uma solução fixadora, 
que tem o objetivo de evitar ou retardar ao 
máximo o processo de autólise. Além de 
evitar a proliferação bacteriana, que pode 
levar a degradação do material e torná-lo 
inadequado para o exame histológico. 
• Solução de formol a 10% tamponado. 
• Importante lembrar que a quantidade de 
formol seja em média o dobro da peça a 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ser acondicionada.- Processamento 
histológico: 
 
3. MATERIAL VAI PARA O HISTOTÉCNICO: 
• Material vai ser desidratado. 
• Pode ser feito de forma manual ou 
automatizada-pelo histotécnico. 
• Colocado na cesta metálica, para passar 
por vários banhos, que cada um dura 1 hr. 
• Inicia no formol, depois vai para o álcool-
formol (desidratação), álcool-formol 
novamente, 2 de álcool absoluto, 3 banhos 
em xilol (molécula lipossolúvel) e por fim nas 
duas últimas cubas são as de parafina a 
65º, terminando o processamento 
histológico. 
 
4. INCLUSÃO EM PARAFRINA, NA CENTRAL 
DE INCLUSÃO (CONTÉM PARAFRINA 
DERRETIDA) 
• Confecção do bloco de parafrina, que vai 
permitir o corte em micrótomo. 
1. Pega caixinhas metálicas. 
2. Material vai ser submesso em 
parafrina dentro da caixinha. 
3. Parafrina vai ser solidificada, em 
uma placa fria. 
4. Material recebe mais um pouco 
de parafrina 
5. Material vai para a placa 
refrigerada 
6. Parafina vai ser totalmente 
solidificada, processo que dura 
em média 25 min. 
 
5. CONFECÇÃO DOS CORTES 
HISTOLÓGICOS- MICROTOMIA 
• Acontece nos micrótomos. 
• Corte deve ser fino o bastante para permitir 
a passagem da luz no microscópio. 
1. Começa a seccionar o bloco de 
parafina, para depois escolher o 
melhor corte a ser colocado na 
lâmina, sendo primeiro feito um 
desgaste para retirar o excesso de 
parafina. (os cortes são de em média 
4 micrometros) 
Giulianna Barreto 
2. Cortes vão ser colocados em um 
banho de água, em temperatura 
ambiente, para permitir que o 
material que foi cortado seja 
esticado e posteriormente ser 
escolhido para colocar na lãmina- 
PESCARIA. 
3. Coloca a lâmina por baixo dos 
cortes, para pega-las. 
4. Coloca a lâmina em água quente, 
que ajuda a esticar mais ainda a 
parafina-Artefatos pré analíticos. 
5. Passa pela estufa para tirar o 
excesso de parafina, em torno de 20 
a 30 min, em uma temperatura de 
cerca de 70ºC. 
 
6. ETAPA DE COLORAÇÃO DA LÂMINA. 
1. Dispor as lâminas no porta-lâminas e 
mergulhá-las totalmente no primeiro 
xilol, durante 5 min. – Para dissolver a 
parafina. 
2. Mergulha-las novamente no segundo 
xilol, por mais 5 min. 
3. Mergulha em álcool absoluto durante 
3 min.- Passa em meio anfipático, 
para remover o excesso de xilol 
4. Álcool 90% durante 3 min. -Para 
introduzir água. 
5. Álcool 70% durante 3 min.- Remove 
totalmente as moléculas de xilol, 
reidratando 
6. Lava-se as lâminas por 3 min em 
água corrente, com fluxo baixo 
7. Mergulha na hematoxilina durante 5 
min. 
8. Lavar até obter um líquido incolor, em 
fluxo baixo de água. 
9. Mergulha a lâmina em eosina durante 
5 min. 
10. Mergulho em água. 
11. Rápido mergulho em álcool absoluto 
12. Rápido mergulho em álcool absoluto. 
13. Rápido mergulho em álcool absoluto 
14. Mergulha em xilol durante 5 min 
15. Mergulha novamente em xilol durante 
5 min. 
 
• Coloração de hematoxilina-eosina. 
• Coloca as lâminas em uma caixinha 
específica que vai passar por uma bateria 
de coloração. 
• Essa bateria de coloração vai ter álccois 
em diferentes concentrações, xilol e 
hematoxilina e eosina; 
• Hematoxilina-confere coloração aos núcleos 
da célula, que depois passa por um banho 
de água para tirar o excesso. 
• Em seguida vai para a eosina, que vai 
conferir coloração rosa, principalmente para 
os constituintes citoplasmáticos da célula. 
• Depois passa por uma bateria de álcoois, 
para no fim passar pelo xilol, que vai tirar o 
excesso de álcool. 
 
7. MONTAGEM EM MEIO PERMANENTE: 
Coloca a lâmina na resina, colocando uma gota em 
cada lamínula. 
Colocar uma gota de uma espécie de verniz, resina, 
para depois colocar uma lamínula de vidro-
permitindo que o material tenha uma maior duração, 
para que seja feita a avaliação microscópica.