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MEIOS DE CULTURA 2(1)

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9/16/2019
1
Crescimento microbiano
Biologia IV
Profa. Ilana Camargo
2
Crescimento microbiano
Células natatórias (expansivas)
Pedúnculo
1
2
http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=pq3CtDYo5g-1PM&tbnid=GeUNyqJwN1WACM:&ved=0CAUQjRw&url=http://www.promolux.com/portuguese/retail_meat_beef_temperature_pt.php&ei=j10WUoiwOonm8wSTw4GoCw&bvm=bv.51156542,d.eWU&psig=AFQjCNGPK5XHbQw9AsjaNPMWuqFNEskuWg&ust=1377283763870388
http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=5RTuSrIAnRclSM&tbnid=xjhQhW8b9ooOLM:&ved=&url=http://microwunderkammer.blogspot.com/2011/02/caulobacter-crazy-anti-glue.html&ei=wqVtUenJMvGK0QHZi4DoCg&bvm=bv.45175338,d.dmQ&psig=AFQjCNFUpvgPePWw-JU_Mt0Rc6aXHDfrwQ&ust=1366226755324046
9/16/2019
2
3
Fissão Binária
Tempo que demora para ocorrer = tempo de geração
Cromossomo, cópias de ribossomos 
complexos macromoleculares, 
monômeros e íons inorgânicos
Cromossomo, cópias de ribossomos 
complexos macromoleculares, monômeros e 
íons inorgânicos
4
Curva de crescimento típica de uma população bacteriana, a partir de uma cultura 
em batelada* (Madigan et al., 2004).
* Cultura que se desenvolve em um volume fixo de meio de cultura.
Fases do crescimento de uma população
3
4
9/16/2019
3
5
Fatores necessários para o crescimento
* Crescimento microbiano: em microbiologia, refere-se 
ao aumento no número de células.
Crescimento 
microbiano*
Fatores físicos: temperatura, 
pH, pressão osmótica
Fatores químicos: fontes de 
carbono, nitrogênio, 
enxofre, fósforo, 
oligoelementos, oxigênio, 
fatores orgânicos de 
crescimento (vitaminas, 
aminoácidos, purinas, 
pirimidinas).
6
Efeito da temperatura na taxa de crescimento 
(Fonte: Madigan et al., 2004).
Taxa de crescimento = variação do número de células ou da massa celular por 
unidade de tempo
Temperaturas cardeais: mínima, ótima e máxima (variáveis nos diferentes 
microrganismos)
5
6
9/16/2019
4
7
Temperatura
Relação da temperatura com as taxas de crescimento. As temperaturas ótimas 
de cada organismo estão indicadas. (Fonte: Madigan et al., 2004).
• Temperatura de crescimento pode ser mínima, ótima e máxima. Maioria cresce em um intervalo de
30oC entre mínima e máxima.
• Psicrófilos: profundezas de oceanos e regiões polares (algas clorofíceas e diatomáceas).
• Mesófilos: Temperatura ótima entre 25 e 40oC. Maioria das bactérias.
• Termófilos Temperatura entre 45 e 80oC. Fontes termais, camadas superiores de solos que sofrem
intensa radiação solar, esterco e silo em fermentação.
• Hipertermófilos: Temperatura ótima superior à 80oC. Fontes termais, como as do Parque
Yellowstone. Principalmente membros de Archaea.
8
pH
pH ótimo de crescimento refere-se ao pH do meio externo; o pH intracelular deve 
permanecer próximo à neutralidade.
A escala de pH. (Fonte: Madigan et al., 2004).
•Maior parte das bactérias cresce 
entre pH 6,5 e 7,5.
•Acidófilos: muitos fungos (pH 
ótimo em torno de 5 ou inferior), 
vários gêneros de Archaea.
•Alcalifílicos: muitas espécies de 
Bacillus e algumas arquéias (que 
também são halofílicas).
• Adição de sais de fosfato 
(KH2PO4) em meios de cultura 
funcionam como tampão para 
neutralizar, por exemplo, ácidos 
produzidos por bactérias em 
crescimento.
7
8
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5
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Pressão osmótica
Efeito da concentração do íon sódio no crescimento de microrganismos com 
diferentes tolerâncias ou necessidades de sal.
(Madigan et al., 2004).
Os microrganismos que tem necessidades específicas de NaCl para seu 
crescimento ótimo podem ser :
• halófilos discretos: [ ] baixas – 1 a 6%
• halófilos moderados: [ ] moderadas – 6 a 15%
• halófilos extremos: [ ] altas – 15 a 30%
9
10
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6
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Relações dos microrganismos com o oxigênio
Aeróbios
Aeróbios estritos ou obrigatórios
Microaerófilos
Aeróbios facultativos
Anaeróbios
Obrigatórios 
Aerotolerantes
11
12
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7
13
Microrganismos variam quanto suas necessidades ou tolerância ao oxigênio
- Aeróbios – microrganismos capazes de utilizar o Oxigênio molecular, O2. (Ar contém
21% de O2)
-Produzem mais energia a partir do uso de nutrientes.
- Aeróbios estritos ou obrigatórios: São os microrganismos que necessitam de O2 para
sua sobrevivência.
Relações dos microrganismos com o oxigênio
14
- Microaerófilos
Aeróbios necessitando de O2, mas em concentrações menores do que a encontrada no ar.
São sensíveis aos radicais superóxidos ou peróxidos, produzidos em concentrações letais
quando em condições de altas concentrações de oxigênio.
Relações dos microrganismos com o oxigênio
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8
15
- Aeróbios facultativos
Podem utilizar o O2 quando disponível, mas na sua ausência, são capazes de continuar
seu crescimento através da respiração anaeróbia ou da fermentação.
A eficiência na produção de energia diminui quando o O2 não está disponível.
Exemplo: Escherichia coli
Outras bactérias substituem o oxigênio, durante a respiração anaeróbia, por aceptores 
de elétrons como os íons nitrato.
Relações dos microrganismos com o oxigênio
16
- Anaeróbios obrigatórios ou estritos
São microrganismos que não utilizam o O2 para reações de produção de energia.
O2 pode ser um produto danoso para muitos destes.
Exemplo: Gênero Clostridium = tétano e botulismo
Relações dos microrganismos com o oxigênio
Alguns microrganismos não são capazes de respirar oxigênio:
Anaeróbios
Obrigatórios Aerotolerantes
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9
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- Anaeróbios aerotolerantes
Toleram a presença do oxigênio, mas não podem utilizá-lo para seu crescimento.
Fermentam carboidratos produzindo ácido lático.
O acúmulo deste ácido inibe o crescimento da microbiota competitiva aeróbia 
estabelecendo um nicho ecológico.
Exemplo: Lactobacillus
Podem tolerar o oxigênio devido a produção de SOD.
Relações dos microrganismos com o oxigênio
17
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10
Meios de cultura, 
crescimento e controle de 
microrganismos
Profa. Dra. Ilana Camargo
IFSC-USP
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(Tortora, Funke & Case, 2000)
Respiração Fermentação
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Nutrientes
Macronutrientes
Micronutrientes
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• Carbono – elemento principal de todas as macromoléculas biológicas: 
• corresponde a 50% do peso seco da célula bacteriana típica.
• fontes orgânicas de C – proteínas, carboidratos e lipídeos 
• fonte inorgânica de C – CO2
• Nitrogênio – importante constituinte de proteínas, ácidos nucléicos:
• corresponde a 12-14% do peso seco da célula bacteriana típica.
• encontrado na natureza principalmente na forma de compostos inorgânicos: 
amônia (NH3), nitrato (NO3
-) ou N2. 
• fontes orgânicas: aminoácidos, bases nitrogenadas.
• Fósforo e Enxofre – juntos, correspondem a 4% do peso seco da célula bacteriana 
típica:
• Fósforo necessário para a síntese de ácidos nucléicos e fosfolipídeos. Forma 
usual encontrada na natureza – íon fosfato PO4
3- .
• Enxofre – constituinte dos aa cisteína e metionina e também de vitaminas 
(tiamina, biotina). Maior parte do enxofre utilizado nos processos celulares vem 
de fontes inorgânicas: íon sulfato (SO4
2-) e sulfeto (HS-).
Macronutrientes → necessários em grandes quantidades
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13
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Macronutrientes
Madigan et al., 2004.
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Micronutrientes (elementos-traço)
Madigan et al., 2004.
25
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Fatores orgânicos de crescimento
Algumas bactérias 
necessitam de fontes 
extracelulares de vitaminas, 
que atuam como coenzimas. 
Ex. bactérias lácticas 
(Streptococcus, Lactobacillus, 
Leuconostoc)
Madigan et al., 2004.
28
Microrganismos em meio de cultura
Meio de cultura satisfatório
Crescimento e multiplicação
Síntese de seus próprios monômeros
Deverá conter: Fonte de carbono
Nitrogênio
Sais inorgânicos
Em certos casos:
Vitaminas (tiamina, biotina, cobalamina...)
Outros fatores de crescimento
(Aminoácidos, purinas, pirimidinas)
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Meios de Cultura
•Soluções nutrientes utilizadas para promover o crescimento de microrganismos 
em laboratório.
• Inóculo: microrganismos que são colocados em um meio de cultura para iniciar o 
crescimento.
• Cultura: microrganismos que crescem e se multiplicam nos meios de cultura.
Meios
Quimicamente definidos:
Quantidades precisas de compostos 
químicos inorgânicos ou orgânicos 
altamente purificados, adicionados a água 
destilada.
Complexos (ou indefinidos):
Não se conhece a composição precisa de 
alguns componentes. Empregam produtos 
de digestão da caseína (proteína do leite), 
de carne, de soja, de leveduras, extratos de 
plantas, entre outros.
30
Meios de cultura
Utilizados para o cultivo dos microrganismos;
Quimicamente definidos – Definição exata
Retirando ou adicionando um constituinte ao meio definido, pode-se
saber se aquele constituinte é essencial para o crescimento do
microrganismo.
29
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16
31
Meios comerciais
➢Já contém todos os componentes desejados;
➢Adiciona-se água
➢Esteriliza-se 121ºC durante 20 minutos.
➢Distribui-se em placas de Petri também esterilizadas.
➢Armazena-se em geladeira embaladas em sacos plásticos para diminuir 
a desidratação.
32
Composição:
Peptona (Fonte de nitrogênio)
Triptose (reações de fermentações)
Extrato de carne (carboidratos, constituintes minerais, vitaminas)
Extrato de leveduras (Fonte de vitaminas)
Água (destilada / deionizada)
Sangue (Fator de crescimento, rico em nitrogênio, carboidratos e 
vitaminas)
Microrganismos em meio de cultura
31
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33
Ágar: polissacarídeo complexo solidificante obtido de algas marinhas.
❖Poucos microrganismos degradam o ágar.
❖Temperatura de fusão inferior à temperatura da água.
❖Permanece líquido até 40ºC.
❖Na técnica de Pour plate o ágar é mantido a 50ºC e é adicionado sobre o 
inóculo sem afetar, ou causar danos a bactéria.
❖Dependendo de sua concentração os meios podem ser classificados
quanto a consistência:
- Líquido – menos de 1g de ágar por litro de água
- Semi-sólido – 4 g/L
- Sólido – 15 a 18 g/L
34
Classificação quanto à função:
-Seletivo
-Diferencial
-Enriquecedor
-Transporte
33
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Meios Seletivos
Favorece o crescimento da bactéria de interesse impedindo o 
crescimento de outras bactérias.
Inibidores: substâncias capazes de inibir algumas bactérias que não são 
de interesse.
1) Corantes: verde brilhante, eosina, cristal violeta...
2) Metais pesados: Bismuto;
3) Substâncias químicas: azida, citrato, desoxicolato, selenito e álcool 
feniletílico...
4) Agentes antimicrobianos: vancomicina, cloranfenicol
5) Meio hipertônico: alta concentração de sal (7,5%)
36
Meio Diferencial
Utilizado para fácil detecção da colônia da bactéria de interesse quando 
existem outras bactérias crescendo na mesma placa do meio
Substâncias utilizadas como indicadores de atividade enzimáticas que 
auxiliam na identificação
-Indicadores de pH: fucsina, azul de metileno, vermelho neutro, vermelho de 
fenol e púrpura de bromocresol. Medem as variações de pH que resultam do 
metabolismo bacteriano de certos substratos.
- Indicadores diversos: detectam produtos bacterianos específicos. Ex.: íons 
ferro e ferroso para a detecção de sulfato de hidrogênio
35
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19
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Ágar MacConkey
Peptona de carne...................................................3
Peptona de caseína..............................................17
NaCl.........................................................................5
Lactose..................................................................10
Sais biliares.........................................................1,5
Vermelho neutro................................................0,03
Cristal violeta...................................................0,001
Ágar....................................................................13,5
Nitrogênio e 
carbono
Açúcar
Indicador de pH
Inibidor de 
Gram+
Inibidor de 
Gram+
38
Meio Seletivo e Diferencial
Muito utilizado na rotina laboratorial
Ágar MacConkey – Seletivo e Diferencial
Seletivo: Cristal violeta e sais biliares – inibem bactérias Gram-positivo;
Diferencial: Este meio possui indicador de pH, por exemplo vermelho neutro:
quando o meio fica ácido a cor fica rosa.
Possui lactose que a bactéria pode degradar (fermentar) produzindo ácido
que diminui o pH do meio.
37
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MacConkey
Cultura mista!!!!!!
Lactose +
Lactose -
Seletivo para enterobactérias 
(Gram-negativo) a partir de 
fezes, urina, alimentos, 
água... 
40
E.M.B.
(Eosina Azul de metileno)
Para isolamento de 
Enterobactérias
(Gram–negativo)
Brilho verde metálico 
Escherichia coli???
Corantes inibem 
Gram-positivo
Meio seletivo e diferencial
Bactérias produtoras de ácidos fortes formam 
brilho verde metálico causado pela 
precipitação do corante nas colônias: 
SUGESTIVO de E. coli!!!
39
40
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21
41
E.M.B.
(Eosina Azul de metileno)
Para isolamento de 
Enterobactérias
(Gram–negativo)
Colônias pardo rósea
Produtora de ácido fraco
Ex: Enterobacter sp
Corantes inibem 
Gram-positivo
Meio seletivo e diferencial
42
Pseudomonas aeruginosa
Pigmento verde natural
Escherichia coli
Meio Mueller Hinton
Meio EMB
Serratia marcescens
Pigmento vermelho natural!!
Brilho verde metálico
somente no meio 
EMB!
41
42
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22
Momento II 
“Aprendendo Microbiologia com Poema e Poesia”
http://www.icej.org.br/?p=372
By Ilana Camargo
44
Encontro com uma Drag queen verde!
Será que vai me notar?
Se isso não ocorrer, não vou chorar,
nem tampouco esporular!
Sou mesófilo e sempre estou com você.
No seu calor me sinto bem.
Vou crescer, você vai ver!!
Pode até me cortar o oxigênio,
como sou anaeróbio facultativo,
vou continuar a crescer, Oh! Gênio!
Porém, se no meu meio jogar sal,
me inibirá e te deixarei...
Não sou halófilo, afinal!
Se você quiser me ver,
me semeie em EMB e vou aparecer.
Fermento lactose e ácido forte pode ser observado.
Assim, como uma Drag queen verde, 
por todos posso ser notado.
Sou bacilo Gram Negativo.
Meu nome é Escherichia coli,
e nosso encontro pode ser divertido!
43
44
http://www.google.com.br/url?sa=i&rct=j&q=&esrc=s&frm=1&source=images&cd=&cad=rja&docid=C99-4CwzPh5mEM&tbnid=AI44gOJY4uQ5sM:&ved=&url=http://www.screamingqueens.com/cabaret_artists&ei=YZhtUYSRA-rw0gHppYGwAQ&bvm=bv.45175338,d.dmQ&psig=AFQjCNGIcSM-CGFuAEcEjIjwzx-xNNDZ3Q&ust=1366223329426935
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23
De volta à aula...
46
Meios
Seletivo:
Favorece o crescimento do microrganismo de 
interesse e impede o crescimento de outros.
Ex.: Ágar sulfeto de bismuto para isolamento de 
Salmonella typhi a partir das fezes.
Diferencial:
Permite a fácil identificação da colônia da bactéria de 
interesse, dentre as colônias de outras bactérias 
crescidas no meio. 
Ex.: Meio ágar sangue para detectar a presença de 
Streptococcus pyogenes (forma-se um halo claro em 
torno da colônia pela lise das hemáceas)
de Enriquecimento:
Semelhante ao seletivo, mas suplementado por 
nutrientes especiais, com a característica de 
aumentar o número da bactéria de interesse 
tornando-a detectável.
Meios de Cultura
45
46
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24
47
Ágar Mueller Hinton 
suplementado com sangue de 
carneiro a 5%.
Colônia
Hemólise
Meio rico
Permite o crescimento da 
maioria das bactérias
48
Rico X Enriquecimento
Rico: é o meio que é suplementado com sangue, soro, suplementos
vitamínicos e extrato de levedura para isolar microrganismos exigentes.
Ex: ágar Mueller Hinton suplementado com 5% de sangue de carneiro e
ágar chocolate
Meio de enriquecimento: Incrementa o crescimento de certas
espécies bacterianas ao mesmo tempo que inibe o desenvolvimento de
microrganismos que não sejam de interesse.
Ex.: Caldo GN e Caldo selenito.
47
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25
Controle do 
crescimento microbiano
Controle do crescimento microbiano
✓ Termos importantes
✓ Controle antimicrobiano por agentes físicos
✓ Controle antimicrobianopor agentes químicos
✓ Agentes antimicrobianos utilizados in vivo
✓ Resistência a antimicrobianos
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26
Termos importantes
• Desinfecção*: processo de eliminação das formas vegetativas de
praticamente todos os microrganismo patogênicos de objetos ou
superfícies inertes (não garante a eliminação de todos os
microrganismos, nem endósporos).
→ quando em tecido vivo = Anti-sepsia
•Desinfetante: Agente antimicrobiano utilizado em objetos
inanimados, mas pode ser prejudicial aos tecidos humanos.
• Agente anti-séptico: agente antimicrobiano, voltado para a
destruição dos microrganismos patogênicos, suficientemente atóxico
para ser aplicados em tecidos vivos.
• Descontaminação: tratamento que torna seguro o manuseio de um
objeto ou superfície inanimada (= remoção dos microrganismos).
• Esterilização: destruição de todas as formas de vida microbiana
(incluindo os endósporos e vírus).
• Agentes bactericida, fungicida, viricida: que matam bactérias,
fungos e vírus, respectivamente.
• Agentes bacteriostático, fungistático, viriostático: que inibem o
crescimento de bactérias, fungos e vírus, respectivamente.
Termos importantes
51
52
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• alteração da permeabilidade da membrana plasmática
• danos às proteínas e aos ácidos nucléicos
Ações dos agentes de controle microbiano
Físicos
Agentes
Químicos
(Tortora, Funke e Case)
Ações dos agentes de controle microbiano
• alteração da permeabilidade da membrana plasmática
Regula ativamente a passagem de nutrientes para a célula e a 
eliminação de dejetos da mesma.
→ Lesão aos lipídeos ou proteínas da membrana plasmática por
agentes antimicrobianos, como os compostos de amônio
quarternário, causa tipicamente o vazamento do conteúdo
celular no meio circundante e interfere com o crescimento da
célula
(Tortora, Funke e Case)
53
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28
• Danos às proteínas e aos ácidos nucléicos
Ações dos agentes de controle microbiano
Bactérias = “sacos de enzimas” 
Proteínas vitais para atividades celulares
dependem da sua forma tridimensional
Calor ou produtos químicos → rompimento das 
ligações de hidrogênio 
Pontes dissulfeto
Dano aos ácidos nucléicos → calor, radiação ou substâncias químicas
impedem a realização de funções metabólicas, replicação
(Tortora, Funke e Case)
Agentes físicos de controle
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29
Agentes físicos de controle
Calor 
Úmido
Seco
Desnaturação 
de enzimas
Resistência ao calor difere entre os microrganismos 
(Tortora, Funke e Case)
Métodos físicos de controle microbiano
(Tortora, Funke e Case)
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30
(Tortora, Funke e Case)
• Fervura (100°C ao nível do mar) → mata formas vegetativas dos
patógenos bacterianos, quase todos os vírus, e os fungos e seus
esporos dentro de “ 10 minutos
• Vapor de fluxo livre (não pressurizado) equivalente à água fervente,
no entanto, endósporos e alguns vírus não são destruídos tão
rapidamente
• Vírus da hepatite pode sobreviver até 30 minutos de fervura
• Alguns endósporos bacterianos podem resistir à fervura por mais de
20 horas
→ Fervura nem sempre é um bom procedimento confiável de
esterilização, mas a fervura breve matará a maioria dos
microrganismos patógenos → alimentos e água seguros para ingestão
Métodos físicos de controle microbiano
(Tortora, Funke e Case)
59
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31
Autoclave
Método preferencial para esterilização a menos que o 
material seja danificado pelo calor ou umidade
Vapor de fluxo livre → 100°C pressão atmosférica ao 
nível do mar
1 ATM acima (15 psi) → 121°C → 15 minutos
Mata todos os microrganismos e seus endósporos
Maior volume →mais tempo
(Tortora, Funke e Case)
Autoclave
Autoclave
(Tortora, Funke e Case)
61
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32
Indicadores de temperatura
Controle de esterilização:
Temperatura - OK
Tempo - ???
Autoclave
Controle de qualidade do 
processo
Indicadores biológicos
Controle de esterilização:
Temperatura - OK
Tempo - OK
(Tortora, Funke e Case)
Filtração
Poros de 0,22 µm
(Tortora, Funke e Case)
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(Tortora, Funke e Case)
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66
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34
Filtração: Filtros HEPA
high efficiency particulate air
Removem quase todos os 
microrganismos maiores que 
cerca de 0,3 m de diâmetro
(Tortora, Funke e Case)
Filtração: Filtros HEPA
high efficiency particulate air
(Tortora, Funke e Case)
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Radiação esterilizante não-ionizante e ionizante
ionizante
> 1nm = não ionizante
Ionização da água produzindo íons hidroxila altamente reativos que agem no 
DNA e componentes orgânicos celulares
Ex. Cobalto radioativo →
(Tortora, Funke e Case)
Radiação não-ionizante: UV
Luz Ultra-violeta → danifica o DNA das células 
expostas produzindo ligações entre timinas 
adjacentes na cadeia de DNA
→Inibem a replicação correta do DNA durante a 
reprodução da célula
→ comprimento de onda mais efetivo: 260 nm
Luz não muito penetrante 
→ microrganismos devem estar expostos, se 
estiverem protegidos por uma superfície não 
serão atingidos
→ Pode lesar os olhos humanos e a exposição 
prolongada pode causar queimaduras e 
câncer de pele em seres humanos
Desvantagem
(Tortora, Funke e Case)
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-Ligue o fluxo laminar (filtração do ar)
-Limpe a superfície interna com álcool 70%
-Ligue a luz UV por 15 minutos antes de usar
Filtros HEPA
+
Luz Ultra-violeta 
(Tortora, Funke e Case)
Câmara de Biossegurança
Congelamento a baixas temperaturas
- 80°C • Diminui o metabolismo das bactérias;
• Devido a temperatura ótima da atividade
enzimática e devido ao fato de não ter água
no estado líquido disponível para reação;
• Efeito bacteriostático.
(Tortora, Funke e Case)
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Congelamento a baixas temperaturas
Ideal para bactérias: congelamento rápido!!
Usar criopreservantes como glicerol ou DMSO
Com o crescimento lento há a formação de cristais de gelo
que rompem a estrutura celular e molecular das bactérias
Uma parte da população morre, mas sempre há 
sobreviventes!
(Tortora, Funke e Case)
Métodos químicos de controle microbiano
Tecidos vivos
Objetos inanimados
Poucos atingem a esterilidade, a maioria reduz a população 
para níveis seguros ou removem as formas vegetativas
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http://www.answersingenesis.org/assets/images/articles/aid/v4/antiseptic-surgery.jpg
Clorexidina
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CB-30 T.A. tem como principal composto o cloreto de alquil dimetil benzil 
amônio, que é um agente catiônico de atividade em superfície, com poderosa 
ação germicida. Usado corretamente nas diluições recomendadas é altamente 
eficaz contra bactérias, fungos e esporos. 
Herbalvet T.A. é um produto para desinfecção e desodorização de ambientes à 
base de amônia quaternária associada a um produto tensoativo (detergente); o 
que dispensa o uso de qualquer outro produto para limpeza. As amônias 
quaternárias (cloreto de benzalcônio) são conhecidas por seu excelente poder 
desinfetante, atuando em bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, fungos, 
algas e alguns tipos de vírus; e por sua alta segurança em termos de toxicidade.
O óxido de etileno é irritante da pele e mucosas, 
provoca distúrbios genéticos e neurológicos. É um 
método, portanto, que apresenta riscos 
ocupacionais.
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• Avaliando um desinfetante – Método de disco-difusão
Métodos químicos de controle microbiano
Métodos químicos de controle microbiano
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Métodos químicos de controle microbiano
Mata as bactérias e 
fungos, mas não tem 
ação em endósporo e 
vírus não-envelopados
- Não deixa resíduos!!
70% é a concentração mais usada
60-95% parecem matar coma mesma rapidez
Desnaturação das proteínas requer água!!
Agentes antimicrobianos utilizados in vivo
http://www.sjtresidencia.com.br/invivo/?p=5913
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Paul Ehrlich – Bala mágica
“Que mate um microrganismo, sem 
matar seu hospedeiro”
Idéia de Toxicidade Seletiva! 
Agentes antimicrobianos utilizados in vivo
• Agentes quimioterápicos: sintéticos ou naturais(antibióticos). 
• Antibiótico: substância produzida por microrganismos que, em 
pequenas quantidades, inibe o crescimento de outros 
microrganismos.
• 1940: primeiro teste clínico da penicilina por um grupo de 
cientistas da Universidade de Oxford, liderados por Howard Florey e 
Ernst Chain.
• Mais da metade dos antibióticos produzidos são obtidos de 
espécies de Streptomyces – bactéria filamentosa do solo. Alguns de 
Bacillus e outros dos fungos Penicillium e Cephalosporium.
• Droga antimicrobiana ideal é a que tem
toxicidade seletiva: capacidade do composto de inibir 
bactérias ou outros agentes patogênicos sem provocar 
efeitos adversos no hospedeiro.
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Ação das drogas antimicrobianas
Onde agir???
Ação das drogas antimicrobianas
• Inibição da síntese da parede celular:
✓ antibióticos beta-lactâmicos inibem síntese completa 
do peptideoglicano – impedem a ligação peptídica 
cruzada, ligando-se às transpeptidases.
• Inibição da síntese protéica:
✓ inibem a formação de ligações polipeptídicas durante 
o alongamento da cadeia, por meio da união com a 
subunidade 50S;
✓ reagem com a subunidade 30S, interferindo na fixação 
do tRNA, portanto impedindo a adição de aminoácidos no 
alongamento da cadeia polipetídica;
✓ alteração da conformação da subunidade 30S, 
impedindo a leitura correta do mRNA; 
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Ação das drogas antimicrobianas
• Danos à membrana plasmática
✓ polimixina B liga-se ao fosfolipídeo da membrana, 
rompendo-a (uso tópico).
✓drogas antifúngicas agem sobre o ergosterol (esterol da 
MP); não tem efeito sobre bactérias.
• Inibição da síntese de ácidos nucléicos
✓ interferência nos processos de replicação e transcrição do 
DNA dos MO (baixo grau de toxicidade seletiva).
• Inibição da síntese de metabólitos essenciais
✓ Um tipo de sulfa, p.e., compete com o PABA (ácido 
paraminobenzóico), um substrato para a síntese do ácido 
fólico (vitamina que atua como co-enzima para a síntese de 
aminoácidos e bases dos ácidos nucléicos).
Ação das drogas antimicrobianas
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Ação de peptídio antimicrobianos catiônicos em S. aureus
membrane cracks, 
leakage of cytoplasmic contents, membrane 
potential disruption, and eventually the 
disintegration of the membrane 
(Pouny et al., 1992)
Midorikawa et al., 2003
Ação da polimixina na membrana citoplasmática
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Inibição da síntese protéica por antibióticos.
Mecanismo de ação da maioria dos agentes quimioterápicos 
antimicrobianos.
THF = tetraidrofolato, DHF = diidrofolato, PABA = ácido paraminobenzóico.
Ácido para-aminobenzóico
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Estudar:
Capítulos 5, 6 e 7 do livro Tortora et. al. “Microbiologia” 
12a Ed. Artmed, 2017.
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