Aula Pratica 1- Metodos de medição de Substrato-1

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UNIVERSIDADE ESTADUAL DO SUDOESTE DA BAHIA
DEPARTAMENTO DE TECNOLOGIA RURAL E ANIMAL
DISCIPLINA: ENGENHARIA BIOQUÍMICA
PROF: NÍVIO SANTANA
Aula Prática 1 - Métodos de medição de Substrato
Introdução
	A medição do substrato é algo fundamental para estimação da quantidade de produto que poderá ser gerado na fermentação e até para o acompanhamento da mesma, verificando a normalidade ou anormalidade do processo. Também é importante no estabelecimento de coeficientes cinéticos que auxiliarão na avaliação de processo e estabelecimento de melhores condições de fermentação visando maiores eficiência e produtividade. Diversos métodos podem ser utilizados para esse fim, através de princípios químicos, como Lane-Eynon ou Somogy-Nelson e DNS ou físicas como a refração ou densidade. A escolha do método dependerá de fatores como tipo de matéria-prima, tempo, custo, precisão, etc.
Materiais: 
· Refratômetro portátil com escala de 0-30 °Brix
· Densímetro de brix (Sacarímetro)
· Solução de sacarose comercial
· Caldo de cana-de-açúcar (2 L)
· Proveta de 500 mL
Procedimento
	Preencher uma bureta de 500 mL com água destilada a 20 °C e introduzir o densímetro de peso específico e aguardar a estabilização. Observar na escala do densímetro onde o nível da água marcar e fazer a leitura do resultado. Trocar a água pela solução de sacarose e por caldo de cana e observar a leitura.
	Colocar uma gota de caldo de cana ou solução de sacarose, a 20 °C, sobre o prisma do refratômetro, fechar a tampa e olhar a escala contra a luz. Ajustar o foco se necessário. Após o uso, lavar com água destilada e enxugar com papel macio.
Construir uma curva de calibração (Brix X Densidade) a partir das diluições ½, ¼, 1/8 do caldo de cana.
	Proceder a diluição do caldo para 14° Brix, utilizando balanço de massa, agitando bem a mistura, antes da medição com refratômetro.
	
Questões	
a) Quais as vantagens e desvantagens de cada um dos métodos testados
b) Quais podem ser os interferentes de cada método?
c) Como esses métodos se comportam ao se medir o teor dos açúcares nos estágios finais de uma fermentação?
d) Que outros métodos poderiam ser utilizados para determinação do teor de açúcar no caldo?