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Anna Raphaella – MEDICINA UFG 68 Síntese de Proteínas w ribossomos: W Cada célula de E. coli contém 15.000 ou mais ribossomos, que compreendem quase ¼ do peso seco da célula W Os ribossomos bacterianos contêm cerca de 65% rRNA e 35% de proteínas W Contém 2 subunidades (a inferior é a menor) W Conservação da estrutura secundária dos rRNAs da subunidade menor do ribossomo, considerando os 3 domínios da vida mostra que existem mais semelhanças que diferenças w síntese: W Subunidades formam os sítios onde haverá comunicação entre mRNA e tRNA W Estágios: 1. Ativação do aminoácido: através da ligação ao tRNA (aminoacil-tRNA-sintetases forma aminoacil tRNA) 2. Iniciação: mRNA e aminoacil tRNA se ligam à subunidade menor e posteriormente há ligação da subunidade maior 3. Elongação: sucessivas ligações de tRNA aos seus respectivos códons, gerando uma cadeia polipeptídica 4. Terminação: a tradução é interrompida quando um stop códon é encontrado. O mRNA e a proteínas se dissociam do ribossomo e as subunidades ribossomais são recicladas 5. Enovelamento: ocorre enovelamento da proteína e processamento pós-traducional B OBS: quando chega num códon de parada da tradução, há a hidrólise que mantém a cadeia polipeptídica ligada ao tRNA e então liberação das subunidades e da cadeia. B Posteriormente há modificação e enovelamento das proteínas para que ela exerça sua função W Componentes necessários para cada estágio: 1. Iniciação: mRNA, n-formilmetionina (em bactérias), códon de início (AUG), subunidades, fatores de iniciação (IF-1, IF-2, IF-3 → impedem ligações prematuras no sítio de ligação), GTP, Mg 2+ (cofator) B OBS: Sequência de Shine-Dalgarno: posicionamento correto o códon de início da tradução no sítio P, que vai se ligar ao primeiro tRNA (procariotos) B Em eucariotos a iniciação é por scaneamento procurando um códon de início 2. Elongação: ribossomo funcional (2 sub), aminoacil- tRNA, fatores de elongação (EF-Tu, EF-Ts, EF-G), GTP, Mg 2+ I. ligação do segundo aminoacil-tRNA no sítio A II. formação da primeira ligação peptídica → só ocorre porque o ribossomo promove o ambiente adequado III. translocação do ribossomo 3. Terminação: códon de parada, fatores de parada (RF-1, RF-2, RF-3, RRF), EF-G, IF-3 I. Reconhecimento dos códons de terminação da tradução no sítio A → UAA, UAG, UGA II. ao final, os componentes de dissociam III. subunidade menor e maior do ribossomo se separam B OBS: em bactérias a transcrição e tradução estão acopladas Anna Raphaella – MEDICINA UFG 68 B polissomos estão presentes em eucariotos e procariotos W Antibióticos inibem a tradução de proteínas p Puromicina: inibe a tradução interagindo com o ribossomo → mimetiza o papel no tRNA ruptura da formação da ligação peptídica pela puromicina W Se as proteínas são sintetizadas pelos ribossomos, no citoplasma, como elas chegam nas organelas? o interação entre ribossomos e retículos endoplasmático o proteínas que serão direcionadas para o retículo (e outras organelas) possuem uma sequência sinal o são direcionadas DURANTE o processo de síntese W Degradação de proteínas: toda proteína possui uma meia-vida o processo de ubiquitinação → marcação de proteínas que serão degradadas por um complexo de proteases chamado proteassomo o aa podem ser reutilizados
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