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Proteínograma (Proteína plasmática total) PROTEÍNAS SANGUINEAS As principais são albumina e globulinas (processos inflamatórios). Albumina: é sintetizada no fígado, disponibilizada na corrente sanguínea e metabolizada na maioria dos tecidos. É uma proteína pequena (tamanho) mas ela representa a maior parte das proteínas que são quantificadas na corrente sanguínea (30 a 50% da proteína sérica total). Consegue transportar ácidos graxos, sais biliares, bilirrubina, cálcio, hormônios e medicamentos. A meia-vida é de 8 dias para cães e 20 dias em equinos. Globulinas: fração proteica composta por um grupo heterogêneo de proteínas; São proteínas grandes (peso molecular e tamanho variam de acordo com seu subtipo). Temos três frações: alfaglobulinas, betaglobulinas e gamaglobulinas. GLOBULINAS Fração alfa: sintetizada no fígado, podem transportar tiroxina (transportadora de tiroxina), cortisol (transcortina), lipoproteínas (transportadoras de lipídeos), ceruloplasmina (transportadora de cobre), haptoglobina (ligada a hemoglobina), antitrombina III (inibe a trombina), alfa2-macroglobulina (se liga a insulina e inibe a tripsina). Fração beta: sintetizada também no fígado e participam do processo de degradação da fibrina na hemostasia terciária. São as lipoproteínas (transportadoras de lipídeos), transferrina e ferritina (transportadoras de ferro), proteína-C reativa, componentes do sistema do complemento C3 e C4, plasminogênio e fibrinogênio (coagulação sanguínea e resposta inflamatória). Fração gama: são as imunoglobulinas, sintetizadas no tecido linfoide em resposta a estímulos antigênicos. Classes de Ig’s. SANGUE: PLASMA, SORO E CÉLULAS Plasma: contém albumina, fibrinogênio, imunoglobulinas, lipídeos, hormônios, vitaminas e sais como componentes predominantes. Adquirido através de um tubo com EDTA – tampa roxa. Soro: liquido rico em proteínas sem fibrinogênio, que contem albumina, imunoglobulinas e outros componentes. Adquirido através da deposição dos coágulos – tampa vermelha. CONCENTRAÇÃO PT Refratômetro: escala de 0 a 12, método simples, rápido e de baixo custo para detecção de hiper e hipoproteinemia. As moléculas de proteína provocam aumento do índice de refração proporcional à concentração da amostra. Interferências (falsa elevação): pode ocorrer elevação nessa concentração devido a presença de hemoglobina (amostras hemolisadas), bilirrubina, lipídeos e aumento da concentração de solutos (glicose, uréia, sódio e cloretos) ou por desidratação. Espectofotometria: a concentração é obtida através de produtos bioquímicos, o reagente utilizado geralmente é o bioreto. É uma técnica mais sensível do que o refratômetro. OBS: ocorrem pequenas diferenças da concentração entre as técnicas. CONCENTRAÇÃO DE ALBUMINA Teste bioquímico por espectofotometria, método de verde bromocresol. Interferências: o corante verde de bromocresol pode se ligar discretamente a outras proteínas (bilirrubina, anticonvulsionantes – fernobarbital e diazepam); antibióticos competem com a albumina pelo corante. CONCENTRAÇÃO DE GLOBULINAS Fases: 1º - Cálculo do teor de globulinas; PT – albumina 2º - Eletroforese* 3º - Determinação qualitativa ou semi-quantitativa do teor de imunoglobulinas. São quantificadas a partir dos gráficos da eletroforese.* ELETROFORESE* Seu princípio é a aplicação de pequeno volume de soro na extremidade de uma fina placa de gel, posteriormente submetidas a um campo elétrico As proteínas têm carga elétrica negativa e migram para o polo oposto da placa de gel. Posteriormente este gel será corado para que seja feita uma leitura pelo espectofotômetro gerando o traçado eletroforético. DETERMINAÇÃO QUALITATIVA/SEMI-QUANTITATIVA DO TEOR DE IMUNOGLOBULINAS* Nesta parte, tentamos estimar a concentração de imunoglobulinas em neonatos. É muito utilizado em equinos, suínos e ruminantes que são aglobulinêmicos (animais que nascem sem imunoglobulinas). Técnica utilizada para detectar falhas na transferência de imunidade passiva em neonatos (48h/ 1 a 7 dias). OBS: Não é o “teste ideal”; o teste padrão outro são os testes imunoenzimáticos.
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