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UNIVERSIDADE DO OESTE DE SANTA CATARINA CAMPUS XANXERÊ AREA DA CIÊNCIAS DA VIDA E SAÚDE DENISE KUNZ ESPERMOGRAMA Xanxerê SC 2020 ORIENTAÇÕES SOBRE A COLETA DO SÊMEN Obs: O homem deve receber instruções claras, orais ou escritas, sobre a coleta da amostra de sêmen; 1. O paciente deve estar em abstinência sexual (sem relações sexuais ou masturbações) por um período de no mínimo 2 dias e no máximo de 7 dias; 2. O esperma deverá ser colhido por masturbação sem uso de preservativo (o látex possui intensa ação espermicida). O paciente não deverá usar nenhum tipo de lubrificantes, mineral, sintético, saliva nem sabonete. Não é possível a coleta através de coito interrompido devido à possibilidade de contaminação do esperma com secreções vaginais; 3. O paciente deverá lavar as mãos e o pênis com sabonete e enxugá- los com toalha limpa ou papel toalha; 4. É importantíssimo que o paciente não perca partes do ejaculado (a primeira ejaculação é rica em espermatozoides) e deverá certificar-se que o frasco esteja bem fechado. Se possível anotar a hora exata em que terminou a coleta; 5. De maneira ideal, a amostra deverá ser coletada no laboratório, porém não obrigatório; 6. Se a coleta for realizada em domicílio, o paciente receberá frasco estéril e descartável oferecido pelo laboratório, próprio para esta finalidade. O material coletado deverá ser entregue no prazo máximo de 60 minutos e não deverá ser transportado a temperaturas inferiores a 20°C ou superiores a 37°C; 7. O jejum não é obrigatório, exceto quando solicitado à dosagem de frutose, pois níveis elevados de glicose podem interferir na dosagem. observações: Liquefação completa até 60 minutos – ação das enzimas do líquido seminal Liquefação incompleta – disfunção prostática, coágulos de proteína, infecção seminal VOLUME O volume normal do sêmen é de 2 à 5 ml. Viscosidade: filância < 2 cm: normal >2 cm: infecção seminal ou disfunção na próstata. COR: Branco opalescente ou acinzentado: normal Ligeiramente amarelado: normal – aumento do nº de gametas Amarelado: leucospermia Avermelhado: hemospermia – hemorragia, rupturas de vasos (próstata e/ou vesícula seminal. pH: O pH do sêmen normal é ligeiramente alcalino, de 7,2 à 8,0. Básico: prostatite Ácido e volume reduzido: obstrução dos ductos ejaculatórios, vesículas seminais ou ductos deferentes ODOR Sui gêneris” Amoniacal. Torna-se mais forte quando é maior o período de abstinência sexual ou hiperfunção prostática. O odor é proveniente de 3 subst âncias de origem prost ática: putrescina, espermina e espermidina Analise da amostra CARACTERÍSTICA FÍSICAS QUÍMICAS *Avaliação macroscópica das características físicas do sêmen: Colocar a amostra recebida em banho-maria ou estufa a 37°C para que ocorra liquefação. *1 - LIQUEFAÇÃO: O tempo médio para a liquefação completa é de 15 a 30 minutos. * 2 VISCOSIDADE: do sêmen deve ser avaliada após a liquefação, com o auxílio de uma pipeta ou bastão de vidro. A viscosidade é considerada normal quando a amostra, ao sair da pipeta por ação somente da força da gravidade, goteja ou forma um filamento com extensão inferior a 2 cm. * 3 APARÊNCIA DO EJACULADO: 3.1 COR: analisar a cor do esperma. * 3.2 ASPECTO : Após a liquefação, deve estar homogêneo. presença de grumos ou pus(pode ser rocesso infeccioso) * 4 VOLUME: O volume do líquido espermático pode ser medido utilizando-se um tubo cônico graduado. (>1,5ml) *5 pH: O pH do sêmen reflete o balanço entre os valores de pH das diferentes secreções. (≥7,2) *6 ODOR: caracteristico é semelhante a de uma solução de hipoclorito de sodio. EXAME MICROSCÓPICO 1 - PROVAS DE VITALIDADE ESPERMÁTICA: DEVE SER FEITA IMEDIATAMENTE APÓS A LIQUEFAÇÃO TOTAL DO ESPERMA. *Nesse processo avalia-se o percentual de espermatozoides vivos mortos. (Corante vital eosina amarale 5%) rosas mortos brancos vivos. Procediemento colocar em lâmina: *10µL de eusina amarela e 10 µL de esperma, esperar 30 segundos fazer esfregaço (igual de sangue); *deixar secar (estufa 37°C) observar em microscópio, em imersão; *contar 100sptz *Registrar o número de células coradas (mortas) ou não coradas (vitais) com o auxílio de um contador de laboratório. *dar o percentual de sptz vivos (aparecerão com a cabeça de cor branca) *dar o percentual de sptz mortos (aparecerão com a cabeça de cor vermelha) ref: mais de 58% deverão estar vivos 2 - Morfologia *Confeccionar duas lâminas de esfregaço do esperma. Levar para secagem em estufa. Quando o material estiver completamente seco, borrifar spray fixador (o mesmo utilizado para esfregaço de raspado cervical para exame de Papanicolau ou “Preventivo”). Deixar secar na estufa. Corar com corante hematológico e enviar para microscopia avaliar morfologia dos sptz. ref: normal em 30% dos sptz. 3 - CONTAGEM DE SPTZ, LEUCOCITOS E HEMÁCIAS ref: acima de 15 milhões Oligozoospermia: < 15.000.000/mL Azoospermia : ausência de spz Soma para quantidade ejaculada, calcula-se resultado do sptz/mL X volume ejaculado (VR: ≥ 39.000.000/ejaculação). Contar as hemácias e leucócitos no quadrante central (todo) e multiplicar por 400.Valores de referência para hemácias e leucócitos até 1000/mm3. Procedimento: *Diluir o esperma 1:40 em salina formalada 1% como abaixo: Líquido espermático...............100 ul Salina Formalada 1%........... 3,9 ml (Para o preparo da salina formalada 1%, utilizar 60 mL de solução fisiológica e 1,5 mL de formol a 40%. Caso a solução de formol tenha concentração diferente de 40% utilizar a fórmula C1.V1=C2.V2) *Homogeneizar bem por inversão. *Preencher a Câmara de Neubauer. *Deixar em repouso por 5 minutos. *Contar o nº de espermatozoides existentes em TODO o quadrante central (5) x 400.000. Colocar 1 gota de esperma entre lâmina e lamínula e observar no MO em 400x Observar o tipo de movimento realizado pelos gametas. Eles podem ser classificados em quatro categorias: Tipo A: gametas que se movem rapidamente para frente Tipo B: gametas que se movem lentamente para frente Tipo C: gametas que se movem, mas sem uma direção certa Tipo D: gametas que não se movem. Valor de referência:• A > 25% ou A+B ≥ 32% (OMS, 2010)• A+B < 32% e A ≤ 25%: Astenozoospermia, ou seja, os espermatozoides, por mais que tenham uma boa contagem, não conseguem se mover de forma eficiente para as trompas, onde encontram com o óvulo. 4 - MOTILIDADE
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