roteiro stapilococos

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1 ALGETEC – SOLUÇÕES TECNOLÓGICAS EM EDUCAÇÃO 
CEP: 40260-215 Fone: 71 3272-3504 
E-mail: contato@algetec.com.br | Site: www.algetec.com.br 
 
LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
INSTRUÇÕES GERAIS 
 
 
1. Neste experimento, você conhecerá as características gerais do gênero 
Stahylococcus para a diferenciação das espécies pertencentes a esse grupo. 
 
2. Utilize a seção “Recomendações de Acesso” para melhor aproveitamento da 
experiência virtual e para respostas às perguntas frequentes a respeito do 
VirtuaLab. 
 
3. Caso não saiba como manipular o Laboratório Virtual, utilize o “Tutorial 
VirtuaLab” presente neste Roteiro. 
 
4. Caso já possua familiaridade com o Laboratório Virtual, você encontrará as 
instruções para realização desta prática na subseção “Procedimentos”. 
 
5. Ao finalizar o experimento, responda aos questionamentos da seção “Avaliação 
de Resultados”. 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
RECOMENDAÇÕES DE ACESSO 
 
PARA ACESSAR O VIRTUALAB 
 
 
 
 
 
 
 
 
1. Caso utilize o Windows 10, dê preferência ao navegador Google Chrome; 
2. Caso utilize o Windows 7, dê preferência ao navegador Mozilla Firefox; 
3. Feche outros programas que podem sobrecarregar o seu computador; 
4. Verifique se o seu navegador está atualizado; 
5. Realize teste de velocidade da internet. 
 
Na página a seguir, apresentamos as duas principais dúvidas na utilização dos 
Laboratórios Virtuais. Caso elas não se apliquem ao seu problema, consulte a nossa seção 
de “Perguntas Frequentes”, disponível em: https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/ 
Neste mesmo link, você poderá usar o chat ou abrir um chamado para o contato com 
nossa central de suporte. Se preferir, utilize os QR CODEs para um contato direto por 
Whatsapp (8h às 18h) ou para direcionamento para a central de suporte. Conte conosco! 
ATENÇÃO: 
O LABORATÓRIO VIRTUAL DEVE SER ACESSADO POR COMPUTADOR. ELE NÃO DEVE SER 
ACESSADO POR CELULAR OU TABLET. 
O REQUISITO MÍNIMO PARA O SEU COMPUTADOR É UMA MEMÓRIA RAM DE 4 GB. 
SEU PRIMEIRO ACESSO SERÁ UM POUCO MAIS LENTO, POIS ALGUNS PLUGINS SÃO 
BUSCADOS NO SEU NAVEGADOR. A PARTIR DO SEGUNDO ACESSO, A VELOCIDADE DE 
ABERTURA DOS EXPERIMENTOS SERÁ MAIS RÁPIDA. 
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https://algetec.movidesk.com/kb/pt-br/
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
PERGUNTAS FREQUENTES 
 
 
1) O laboratório virtual está lento, o que devo fazer? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Feche outros aplicativos e abas que podem sobrecarregar o seu computador. 
 
d) Verifique o uso do disco no Gerenciador de Tarefas (Ctrl + Shift + Esc) -> 
“Detalhes”. Se estiver em 100%, feche outros aplicativos ou reinicie o 
computador. 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
2) O laboratório apresentou tela preta, como proceder? 
 
a) No Google Chrome, clique em “Configurações” -> “Avançado” -> “Sistema” -> 
“Utilizar aceleração de hardware sempre que estiver disponível”. Habilite a 
opção e reinicie o navegador. Caso persista, desative a opção e tente 
novamente. 
 
b) Verifique as configurações do driver de vídeo ou equivalente. Na área de 
trabalho, clique com o botão direito do mouse. Escolha “Configurações 
gráficas” e procure pela configuração de performance. Escolha a opção de 
máximo desempenho. 
Obs.: Os atalhos e procedimentos podem variar de acordo com o driver de 
vídeo instalado na máquina. 
 
c) Verifique se o navegador está atualizado. 
 
 
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DESCRIÇÃO DO LABORATÓRIO 
 
 
MATERIAIS NECESSÁRIOS 
 
• Estufa; 
• Bico de Bunsen; 
• Acendedor; 
• Alça Inoculadora; 
• Placas de Petri; 
• Pinça; 
• Lâminas de leitura; 
• Tubos de vidro; 
• Micropipeta; 
• Ponteira para micropipeta; 
• Kit comercial para o plasma de coelho; 
• H2O2. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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PROCEDIMENTOS 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Coloque os equipamentos de proteção individual localizados no “Armário de 
EPIs”. 
 
2. REALIZANDO A ROVA DA CATALASE 
 
A bancada encontra-se limpa com solução de hipoclorito a 1% e logo em seguida 
com álcool a 70%. Inicie o procedimento acendendo o bico de Bunsen. Em 
seguida, goteje o H2O2 em duas lâminas para realizar o teste de catalase positiva 
e negativa. Em uma, deposite uma amostra de Staphylococcus aureus. Na outra, 
deposite uma amostra de Entrerococcus faecalis. O procedimento é igual em 
ambos os casos. Lembre-se de sempre que precisar manusear a cultura, realizar 
o manuseio atrás da chama, em uma distância segura para evitar queimaduras, 
mas próximo o suficiente para obter a proteção da chama para não contaminar 
com o microorganismo e nem a cultura com bactérias do ambiente. Atente-se 
também a sempre esterilizar a alça inoculadora antes e depois do uso. Com o 
auxílio da alça inoculadora, retire uma pequena porção da colônia a ser testada 
e deposite no peróxido de hidrogênio (H2O2). Observe o que acontece e anote 
as suas impressões. 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
3. REALIZANDO A PROVA DE COAGULASE EM TUBO 
 
Com o bico de Bunsen já aceso, esterilize a alça inoculadora. Em seguida, 
prepare a cultura de Staphylococcus aureus para a coleta. Mova o tubo de coleta 
contendo aproximadamente 0,5 mL de plasma de coelho com EDTA para o bico 
de Bunsen. Adicione uma alçada de colônia diretamente no plasma que está no 
tubo de coleta. Incube por 24 horas a 35 ºC na estufa e observe o resultado. 
 
4. REALIZANDO A PROVA DE COAGULASE NA LÂMINA 
 
Nesse teste serão utilizadas quatro lâminas. Duas servirão como teste para 
comparar os resultados. Uma conterá o reagente positivo e a outra, o reagente 
negativo. Colete e adicione uma amostra do reagente látex e da solução salina 
em quatro lâminas da sua escolha. Em uma lâmina, deposite uma amostra de 
controle positivo e em outra, deposite uma amostra de controle negativo. Nas 
lâminas sem os controles (positivo e negativo), deposite uma amostra de 
Staphylococcus aureus. Espalhe o conteúdo nas quatro lâminas, observe e 
compare o resultado com as lâminas teste. 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
5. REALIZANDO A PROVA DA NOVOBIOCINA 
 
Inocule a colônia de Staphylococcus saprophyticus no ágar sangue com o auxílio 
da alça inoculadora. Em seguida, aplique o disco de Novobiocina no centro da 
área semeada. Leve a placa para a estufa e encube por 24 horas a 35 ºC. 
 
6. AVALIANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação de Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo 
com o que foi observado nos experimentos. 
 
7. FINALIZANDO O EXPERIMENTO 
 
Retorne todos os itens usados para a bancada, esterilize a alça, apague o bico 
de Bunsen e remova o conteúdo das lâminas, placa de cultura e tubos de coleta. 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
AVALIAÇÃO DOS RESULTADOS 
 
 
 
1. Na prova de catalase, qual amostra apresenta o resultado positivo? O que 
caracteriza esse resultado? 
 
 
2. Por que é importante realizar todo procedimento da coleta da cultura próximo a 
chama do bico de Bunsen? 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
TUTORIAL VIRTUALAB 
 
 
1. SEGURANÇA DO EXPERIMENTO 
 
Visualize o armário de EPIs, acessando a câmera “EPI”, clicando com o botão esquerdo 
do mouse sobre o menu lateral esquerdo. 
 
Abra o armário, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre suas portas. Na barra 
lateral direita, verifique quais EPIs devem ser usados nesse experimento. 
 
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Selecione os EPIs necessários para a realização do experimento. Clique com o botão 
esquerdo do mouse sobre eles. Nesse experimento serão necessários jaleco, máscara e 
luvas. 
 
 
 
Após selecionar todos os itens, feche o armário. Clique com o botão esquerdo do mouse 
sobre as portar para fechá-lo. 
 
 
 
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2. REALIZANDO A ROVA DA CATALASE 
 
Mude a visualização para o bico de Bunsen. Para isso, clique na opção “Bico de Bunsen” 
ou acione o atalho “Alt+2” para muda a visualização. 
 
 
 
Abra a válvula do gás. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a válvula para 
permitir a passagem do gás. 
 
 
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Configure a chama. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre o bico de Bunsen. 
Note que um controle aparecerá. 
 
 
 
Em seguida, acenda o bico de Bunsen. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre o 
acendedor. 
 
 
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Para facilitar a visualização, mude a câmera para “Amostras”, “Alt+4”. 
Deposite uma gota de H2O2 na lâmina. Nessa prova 2 colônias serão testadas para 
obtenção de um resultado positivo e outro negativo. Clique com o botão direito do 
mouse sobre o conta-gotas e selecione a lâmina que deseja adicionar o peróxido de 
hidrogênio. 
 
 
 
Esterilize a alça. Clique com o botão direito do mouse sobre ela. 
 
 
 
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Em seguida, prepare a amostra de Staphylococcus aureus para a coleta. Clique com o 
botão esquerdo do mouse sobre a placa de cultura contendo a colônia. 
 
 
 
Colete a amostra. Clique com o botão esquerdo da alça para coletar a amostra. 
 
 
 
 
 
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Retorne a placa de cultura para a mesa. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre 
ela. 
 
 
 
Deposite a amostra na lâmina. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a alça e, 
em seguida, selecione a lâmina que deseja colocar a amostra. Deve ser uma das duas 
contendo o H2O2. 
 
 
 
 
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Esterilize novamente a lâmina, repetindo o mesmo processo mostrado anteriormente. 
Em seguida, prepare a cultura de Enterococcus faecalis para a coleta. Clique com o botão 
esquerdo do mouse sobre a respectiva placa de cultura. 
 
 
 
Repita o processo anterior de coleta. Depois, deposite a amostra na outra lâmina 
contendo a solução de H2O2. 
 
 
 
Para facilitar a percepção do resultado, altere a câmera para as lâminas de leitura 
“Alt+5”. Observe e a note suas impressões. 
 
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3. REALIZANDO A PROVA DE COAGULASE EM TUBO 
 
Com o bico de Bunsen já aceso, esterilize a alça. Em seguida, prepare a cultura de 
Staphylococcus aureus para a coleta. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a 
placa de cultura contendo a amostra. 
 
 
Colete a mostra. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a alça para realizar a 
coleta. 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Retorne a placa de cultura para a mesa. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre 
a placa de cultura para retornar. 
 
 
 
Mova o tubo de coleta contendo plasma para o bico de Bunsen. Mude a visualização 
para “Geral”, “Alt+1”. Clique no com o botão direito do mouse no conjunto de tubos e 
selecione o tubo que deseja mover. 
 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Coloque a amostra no tubo de coleta. Clique com o botão esquerdo do mouse na alça e 
selecione a opção “No tubo de coleta”. 
 
 
 
Retorne o tubo de coleta para a mesa. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre o 
tubo. 
 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Abra a estufa. Mude a visualização para a estufa, “Alt+7”. Clique com o botão esquerdo 
do mouse sobre a porta da estuda para abrir. 
 
 
 
Mova o tubo de coleta para o interior da estufa. Clique com o botão direito do mouse 
sobre o conjunto de tubos de coleta e selecione a opção “Colocar na estufa”. 
 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Feche a porta, clicando com o botão esquerdo sobre ela. Encube por 24 horas. Clique 
com o botão direito do mouse sobre a porta da estufa para aguardar 24 horas. Note que 
um cronômetro aparecerá na tela. Você poderá acelerar a velocidade. 
 
 
 
Passado o tempo, retire o tubo de coleta da estufa. Primeiro, abra a porta. Clique com 
o botão esquerdo do mouse sobre a porta para abrir. 
Em seguida, clique com o botão esquerdo do mouse sobre o tubo de coleta para 
removê-lo da estufa. 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Feche a porta da estufa, clique com o botão esquerdo do mouse sobre ela. 
Em seguida, mude a visualização para “Tubo de ensaio”, “Alt+6” para maior 
detalhamento. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
4. REALIZANDO A PROVA DE COAGULASE NA LÂMINA 
 
Inicialmente, para evitar contaminação, remova o conteúdo das lâminas. Clique com o 
botão direito do mouse sobre a lâmina e o conteúdo será removido. 
 
 
 
Em seguida, mova a micropipeta para o pote do reagente do látex. Clique com o botão 
direito do mouse sobre a micropipeta e selecione a opção “Coletar reagente do Látex”. 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
Pressione o êmbolo da micropipeta. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre o 
êmbolo. 
 
 
 
Insira a micropipeta no frasco. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a 
micropipeta para inserir. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Colete uma amostra. Clique com o botão direito do mouse sobre o êmbolo da 
micropipeta. 
 
 
 
Retire a micropipeta do frasco, clicando com o botão esquerdo do mouse sobre ela. Em 
seguida, mova a micropipeta para o suporte. Clique nela com o botão direito do mouse. 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Mova a micropipeta para a lâmina. Clique com o botão direito do mouse sobre a 
micropipeta e selecione a opção “Colocar na lâmina de leitura 3”. 
 
 
 
Deposite a amostra do látex sobre a lâmina. Clique com o botão esquerdo sobre o 
êmbolo. 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Retorne a micropipeta para o suporte. Clique com o botão direito do mouse sobre a 
micropipeta. 
 
 
 
Troque a ponteira da micropipeta. Clique com o botão direito do mouse sobre a 
micropipeta e selecione a opção “Trocar ponteira”. 
 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Em seguida, repita o mesmo procedimento realizado anteriormente para depositar a 
amostra de látex em cada uma das 4 lâminas. 
Após depositar a amostra de látex nas lâminas necessárias, deposite amostras da 
solução salina. Todo o procedimento é semelhante ao explicado anteriormente. Deve-
se adicionar essa solução em 4 lâminas também. 
 
 
 
Depois de ter adicionado solução salina nas 4 lâminas, troque a ponteira. É indispensável 
anotar quais lâminas serão teste, qual será a do controle positivo e qual será controle 
negativo. Deposite uma amostra do controle positivo em uma lâmina. O processo de 
coleta, transporte e deposito na lâmina é análogo ao que já foi exposto. 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Adicione agora uma amostra do controle negativo em outra lâmina. Repita o 
procedimento já visto. 
 
 
 
Espalhe as soluções das 2 lâminas contendo os controles. Clique com o botão direito do 
mouse sobre o pote com os cotonetes. Em seguida, selecione qual lâmina deseja 
homogeneizar. 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Prepare a amostra para a coleta. Neste caso, a amostra usada deverá ser a 
Staphylococcus aureus. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre a placa de cultura 
contendo essa amostra. 
 
 
 
Colete a amostra e deposite nas lâminas contendo apenas o látex e solução salina. Clique 
com o botão esquerdo do mouse na alça já esterilizada e, em seguida, clique novamente 
com o botão esquerdo do mouse para selecionar a lâmina que a amostra deverá ser 
adicionada. Para melhor percepção, mude a visualização para “Lâminas de leitura”, 
“Alt+5”. Observe e anote as suas impressões. 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
5. REALIZANDO A PROVA DA NOVOBIOCINA 
 
Inicialmente, prepare a amostra de Staphylococcus saprophyticus para a coleta. 
Em seguida, colete a amostra. Com a pinça já esterilizada, clique com o botão esquerdo 
do mouse sobre a alça para coletar a amostra. 
 
Devolva a placa de cultura contendo a amostra para a bancada. Clique com o botão 
esquerdo do mouse sobre ela. Em seguida, mova a placa de cultura para o bico de 
Bunsen. Primeiro, mude a visualização para “Geral”, “Alt+1”. Depois, clique com o botão 
direito do mouse sobre a placa e selecione a opção “Colocar no bico de Bunsen” 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Deposite a amostra na placa de cultura. Clique com o botão esquerdo do mouse e 
selecione aopção “Na placa de cultura”. 
 
 
 
Adicione o disco de Novobiocina na placa. Clique com o botão esquerdo do mouse sobre 
a pinça. 
 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Retorne a placa de cultura contendo o ágar sangue para a mesa. Clique com o botão 
esquerdo do mouse sobre ela. 
 
 
 
Leve a placa de cultura para a estufa. Primeiro, clique com o botão esquerdo do mouse 
sobre a porta da estufa para abrir. Em seguida, clique com o botão direito do mouse na 
placa de cultura e selecione a opção “Colocar na estufa”. 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Encube por 24 horas. Incialmente, feche a porta da estufa. Clique com o botão esquerdo 
do mouse para fechar. Logo depois, clique com o botão direito do mouse sobre a porta 
da estufa para aguardar o tempo. Note que aparecerá um cronometro na tela. Você 
pode aumentar a velocidade da contagem. 
 
 
 
Passado o tempo, retire a placa de cultura do interior da estufa. Primeiro, abra a porta. 
Clique com o botão esquerdo do mouse para abrir. Em seguida, clique com o botão 
esquerdo do mouse sobre a placa para removê-la. 
 
 
 
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IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
Mova a placa de cultura para o bico de Bunsen para observar o resultado. Clique na placa 
de cultura com o botão direito do mouse e selecione a opção “Colocar no bico de 
Bunsen”. 
 
 
 
Para melhor percepção do resultado, altere a visualização para “Inoculação e coleta de 
amostra”, “Alt+3”. 
Observe e anote suas impressões. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA 
IDENTIFICAÇÃO DE Staphylococcus sp. 
 
6. ANALISANDO OS RESULTADOS 
 
Siga para a seção “Avaliação de Resultados”, neste roteiro, e responda de acordo com o 
que foi observado no experimento. 
 
 
7. FINALIZANDO O EXPERIMENTO 
 
Retorne todos os itens usados para a bancada, esterilize a alça, apague o bico de Bunsen 
e remova o conteúdo das lâminas, placa de cultura e tubos de coleta. 
 
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