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Ao utilizar testes in vivo, deve-se considerar sempre a hipótese de a resposta do paciente ser tão intensa que desencadeia fenômenos mais graves, daí a necessidade de realizar esses testes em locais com assistência médica e recursos terapêuticos disponíveis. TESTE DE HIPERSENSIBILIDADE IMEDIATA A composição antigênica dos helmintos ativa a resposta de linfócitos T helper 2 (Th2), liberando interleucinas e induzindo ativação e diferenciação de linfócitos B a secretar imunoglobulinas (IgE). APLICAÇÃO: DIAGNÓSTICO DE INFECÇÕES SISTEMAS POR HELMINTOS Injeta-se, via subcutânea ou intradérmica, pequeno volume de antígeno solubilizado e se observa, em 15 a 30 minutos, a ocorrência de eritema com ou sem prurido. TESTES DE HIPERSENSIBILIDADE TARDIA RESPOSTA CELULAR TH1 MACRÓFAGOS Injeção subcutânea, ou intradérmica, de antígenos no paciente previamente sensibilizado irá promover a migração celular para o local onde foi depositado o antígeno, formando uma pápula ou nódulo em 24-72 horas, constituído por essas células (macrófagos, células dendríticas e linfócitos T). Na persistência do antígeno, pode haver uma reação granulomatosa mais intensa; Ex.: Teste de Montenegro. DOENÇA DE CHAGAS Sorologia prática e de baixo custo; Doença causada por Trypanossoma cruzi; Seus métodos parasitológicos exibem baixa sensibilidade (xenodiagnóstico, hemocultura, pesquisa direta); Gold standard: Reação em Cadeia da Polimerase A sorologia é amplamente utilizada em bancos de sangue, seleção de trabalhadores, inquéritos epidemiológicos, entre outros. SENSIBILIDADE (VP) X ESPECIFICIDADE (VN) Onde: A = sadios; B = doentes; LR = limiar de reatividade (cut-off). Em bancos de sangue o melhor teste é aquele que apresente o LR 1 e em laboratórios clínicos aquele com LR 2. IMUNOENSAIOS Ensaios de imunoprecipitação; Aglutinação direta; Hemaglutinação indireta (recomendado para triagem de doadores de sangue = baixo custo e de fácil execução); Imunofluorescência indireta para pesquisa de anticorpos (teste de referência); ELISA; A PCR é um excelente método diagnóstico suplementar devido às altas sensibilidade e especificidade. COMPOSIÇÃO ANTIGÊNICA (HELMINTOS) ATIVA RESPOSTA Th2 INTERLEUCINAS (IL-4, IL-5 e IL-6) LINFÓCITOS B ANTICORPOS (IgE) imunodiagnóstico das infecções parasitárias AULA 6 – PARTE 2 imunoens. aplicados in vivo TOXOPLASMOSE O Toxoplasma gondii é um protozoário intracelular com tropismo por tecido nervoso e células embrionárias. As formas graves incluem: comprometimento ocular forma congênita por transmissão placentária forma de reativação observada entre indivíduos imunocomprometidos Toxoplasmose congênita aborto/natimorto/prematuro os nascidos vivos podem apresentar após meses ou anos: ▪ manifestações oculares ▪ hepatoesplenomegalia ▪ icterícia ▪ microcefalia ▪ surdez e retardo psicomotor DIAGNÓSTICO SOROLÓGICO DA TOXOPLASMOSE (PESQUISA DE IGM E IGG) Elisa (praticidade, altos índices de sensibilidade e possibilidade de automação); Imunofluorescência indireta (porém com possibilidade de falso positivo) por exemplo, reação cruzada com o Trypanosoma cruzi. Hemaglutinação (pesquisa de Ac); Teste de avidez: avalia a maturação dos anticorpos da classe IgG da paciente. Esse teste é realizado quando a paciente testou IgM e IgG reagentes na técnica de ELISA ou Imunofluorescência. Avidez alta (acima de 60%) = não apresenta risco para o feto e a gestante não precisa ser tratada. Avidez baixa (abaixo de 30%) = apresenta risco alto para o feto e a gestante precisa ser tratada. Avidez moderada (inferior a 50%) = a gestante será tradada porque representa risco para o feto. Obs.: O IgA pode ser considerada atualmente marcador de fase aguda. Na toxoplasmose, IgA anti- Toxoplasma está associada à infecção aguda e aparenta desaparecer antes da IgM, indicando que é um bom marcador para delimitar a fase aguda. AMEBÍASE Doença causada por Entamoeba histolytica; O exame direto fornece resultados muito limitados: 100.000 cistos para 50% de positividade Testes sorológicos evidenciam 95% em necrose coliquativa hepática 70% nas formas intestinais invasivas 5% nos subclínicos Ex.: Imunocromatografia, hemaglutinação e ELISA; Portadores do parasito exclusivamente intestinal não produzem Ac em níveis significativos; LEISHMANIOSE Leishmaniose cutânea Formas cutâneas – Intradermoreação de Montenegro Leishmaniose visceral Sorologia (IMF, HA, ELISA)
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