1 avaliação - imunologia veterinária inflamação macrófago sentinela neutrófilos

Prévia do material em texto

1ª NPC - IMUNOLOGIA VETERINÁRIA 2020.1
Assunto: Macrófago, Celulas Sentinelas, Neutrófilos e Inflamação.
1. A mucosa intestinal desempenha um papel importante no sistema imune inato. A superfície da mucosa e as células epiteliais intestinais além de formarem uma barreira física e funcional altamente especializada para antígenos dietéticos e microbianos, são também capazes de reconhecer microorganismos colonizadores através da expressão de diversos sistemas receptores capazes de interagir com cepas patogênicas e comensais de bactérias, vírus, e fungos. O desequilíbrio entre os fatores comensais, células imunes e epiteliais, iniciam respostas inflamatórias inadequadas, podendo originar doenças crônicas e debilitantes nos animais e em humanos.
Pede-se:
a) Cite pelo menos cinco componentes da mucosa intestinal que funcionam como mecanismos de defesa.
Microbiota, tecido epitelial de revestimento (barreira física), muco, enzimas digestivas e células sentinelas, como barreira celular.
b) Escolha um dos componentes que você citou e descreva suas funções em pelo menos 50 palavras.
São células sentinelas macrófagos, células dendríticas e mastócitos, eles estão presentes em superfícies corporais e tem papel na defesa inata, primeira linha de proteção detectando os PAMPs dos agente invasores e alarminas e produzindo citocinas e quimiocinas para induzir migração de células de defesa e produção de DAMPs. Participam por tanto da resposta inflamatória aguda.
c) Informe quem são esses receptores dando exemplos, como eles interagem informando o nome das moléculas (exemplos) e o que essa sinalização pode representar para a célula
 Os Tool Like Receptors (TRL) extramembranar são os TRL 2,4 e 5, os quais reconhecem proteínas e lipoproteínas microbianas, já os intramembranar são os TRL 3,7 e 9- reconhecem ácido nucléico de vírus. A ligação Pamp-receptor das células sentinelas secretem moléculas desencadeadoras da inflamação (como histamina) e outras respostas imunes inatas.
A ligação TRL-PAMP, é gerado um sinal transmitido à célula, que irá estimular o fator de transcrição nuclear KAPPA-β (NF- κβ), que ativa os genes codificadores da citocina IL-1, IL-6 e TNF-α, elas são proteínas reguladoras do sistema de defesa do organismo, são ativadas pela enzima CASPASE-1, ela é estimulada pelo complexo INFLAMASSOMA, formado quando forma-se PAMP-TRL. As citocinas desencadeiam a próxima sequência da resposta inflamatória. 
- Os receptores NOD (NRL’s) encontram-se presentes no interior das células, e vão reconhecer patógenos presentes no citoplasma. Ele atua de forma semelhante ao TRL
-NOD-1 reconhece: peptídeoglicanos em bactérias
- NOD-2 reconhece: muramil dipeptídeo. É o sensor geral das bactérias presentes dentro das células. OS 2 NOD’s atuam na produção do NF- κβ.
-Proteínas de reconhecimento dos peptídeoglicanos presentes nas bactérias (+ e -), PGR’s, ao ligarem-se aos peptídeos bacterianos, induzem a produção de peptídeos antimicrobianos, como as DEFENSINAS. São encontrados na medula óssea, pele, intestino, fígado, rins e baço. Essa proteína encontra-se nos grânulos de neutrófilos não-ativados, e são liberados quando em contato com a bactéria.
-Receptores RIG (RLR), reconhecem padrões expressos no citosol das células que estão ligadas ao RNA do vírus, ele é detectado por ser diferente do RNA dos mamíferos, e dessa forma é detectado pelo RIG. Ao ligar-se com o RNA viral, o RIG inicia a defesa antiviral através da sintetização dos INTERFERONS, citocinas antivirais.
-Receptores de mananas, que ligam-se aos carboidratos dos invasores e receptores de Scavenger (CD-36), que liga-se a lipoproteínas bacterianas e CD-1, que liga-se a glicolipídeos microbianos, estão presentes nas células sentinelas, auxiliando na defesa do organismo.
d) O que é uma resposta inflamatória e qual sua importância para a defesa do indivíduo.
-A inflamação ativa a migração direcionada das células sentinelas, e outras células, da corrente sanguínea, como os anticorpos e componentes do sistema complemento, para o local da invasão durante a inflamação , assim, a inflamação promove um mecanismo de concentração de defesas em uma região específica. Somente após a debelação do invasor que o reparo do tecido lesionado irá ocorrer.
-O processo inflamatório incia-se quando o organismo detecta os sinais enviados pelos invasores e pelas células que estão danificadas ou morrendo. Essas células enviam moléculas, chamadas de alarminas, e o microorganismo invasor gera os PAMP’s, que vão assim ativar as células sentinelas
e) Como é chamado o desequilibrio da população microbiana nas superfícies corpóreas. Dê exemplo de uma doença em animais que esteja associada a esse desequilíbrio. 
Disbiose cutânea. Dermatofitoses
2. Pede-se:
a) Cite pelo menos três células associadas à resposta inflamatória.
Macrófago, neutrófilos e linfócitos.
b) Escolha uma dessas células e apresente pelo menos três mediadores inflamatórios liberados por esta célula quando a mesma é ativada.
Os macrófagos produzem Fator de necrose tumoral (TNF), interleucina-1 e interleucina 6 quando ativas.
c) Qual o papel do Fator de Necrose Tumoral na resposta inflamatória
- TNF- α é produzido por macrófagos, mastócitos, linfócitos T e B, células endoteliais e fibroblastos, ocorrendo ligada a membrana ou na forma solúvel. Ele promove a quimiotaxia, migração e ativação dos leucócitos no local invadido, além de estimular a liberação local de citocinas e quimiocinas. Aumenta a apresentação de antígenos e a co-estimulação dos linfócitos T. Sua produção ocorre logo no início da inflamação e seguida por IL-1 e IL-6.
-Quando associado com a IL-1, desencadeia alterações no endotélio dos capilares e vênulas, que a partir daí expressam as características clássicas do processo inflamatório (calor, rubor, edema, dor). Quando em altas concentrações, provocam trombos microvasculares, levando ao extravasamento de líquido dos capilares.
-Também atua nos neutrófilos, aumentando sua função antimicrobiana, e atraindo-o para o os o local da lesão tecidual, e aumenta a aderência dos neutrófilos no endotélio vascular
- Estimula a fagocitose e produção de oxidantes pelos macrófagos.
-Amplifica e prolonga a inflamação, devido a estimulação da secreção das citocinas.
- Pode também induzir a apoptose. 
-Em casos de altas concentrações, pode provocar o choque séptico
d) Informe como “extracellular traps” são formados e qual sua função como mecanismo de defesa.
formação de armadilhas extracelulares dos neutrófilos (NETs do inglês neutrophil extracellular traps) é um mecanismo da imunidade inata em que o neutrófilo emite uma rede extracelular com a finalidade de conter e eliminar patógenos. Como consequência da formação das redes o neutrófilo passa por um processo de morte celular, denominado netose. As armadilhas são constituídas principalmente pelo material nuclear do neutrófilo e o conteúdo de seus grânulos citoplasmáticos, como elastase, mieloperoxidase, lactoferrina e gelatinase.[1] A liberação das armadilhas pode ser estimulada pela presença de microrganismos, citocinas ou complexos antígeno-anticorpo.[2] O efeito antimicrobiano das NETs é devido a combinação de cromatina com componentes granulares, histonas e algumas proteínas plasmáticas.
e) Descreva o mecanismo da fagocitose em no máximo 50 palavras.
Os estágios da fagocitose dos neutrófilos são: ativação, quimiotaxia, aderência, ingestão e destruição do patógeno.
Ligação dentre receptores celulares e mediadores ativa mecanismo de fagocitose.
contando com quimiotaxia para farejar substâncias químicas produzidas por essas células para que possam ser localizadas.
Os receptores de membrana reconhece invasor, aderindo a ele
Quando a partícula é englobada, forma-se uma vesícula que se desprende e penetra no interior da célula. 
No interior da célula, o fagossomo une-se com os lisossomos, onde entra em contato com as enzimas digestivas. Nesse momento, forma-se o fagolisossomo, iniciando a digestão intracelular.
As substâncias não aproveitadas são eliminadas por exocitose.
f) Expliquecomo o macrófago é capaz de destruir patógenos intracelulares.
Através da produção de oxido nítrico (NOS2), que realiza do burst oxidativo para destruir microrganismos intracelulares.
g) Descreva em no máximo 100 palavras como os leucócitos migram do sangue circulante para o sítio da infecção (considere como alvo a pele)
a migração transendotelial vai ocorrer após o reconhecimento do patógeno na pele por uma célula sentinela, o que vai levar á liberação de citocinas pró inflamatórias como a Il-1 , a TNF- alpha e de prostaglandinas( mediador lipídico inflamatório).
As prostaglandinas si ligam a receptores das células da parede dos capilares, aumentando a permeabilidade vascular, o que permite o extravasamento de plasma e de proteínas plasmáticas, dentre elas, proteínas componente do sistema complemento;
Marginalização de leucócitos atraídos a parede vascular pelas quiimiocinas;
Nesse processo os neutrofilos ligam-se as selectinas da superfície das células endoteliais em uma ligação fraca que é facilmente rompida, fazendo com que os leucócitos se liguem e desprendam, num processo de rolamento sobre as células do endotélio vascular. Ocorre então, uma sinalização via receptor de quimiocina, o que aumenta aafinidade da ligação, ativando as integrinas dos leucócitos. Junto com a ativação das integrinas e aumento da afinidade, também aumenta a expressão de ligantes de integrina pelo endotelio, o que vai causar a fixação dos leucócitos ao endotélio e a modificação do citoesqueleto para que ele possa se aderir a uma área maior(fica achatado).
1. Marginalização do leucócito atraído pelas quimiocionas
2. Ligação fraca com celulas endotelias medida por selectinas que rompem e se refazem de modo que ocorra a rolagem
3. Aumento da afinidade com endotélio pois quimiocinas estimulam liberação de integrinas de leucócito, promovendo uma adesão estável entre leucócito e células endoteliais
4. Transmigração do leucócito
5. Aumento da permeabilidade vascular
3. Cite os órgãos linfóides afetados pela LCan e classifique-os.
a) São os linfonodos, fígado, medula óssea e baço
	O baço é um dos principais órgãos afetados na leishmaniose visceral canina (LVC). A desorganização da polpa branca esplênica (PBE) tem sido associada à imunossupressão e à progressão da doença
	O fígado tem papel central desde a homeostase e resposta inflamatória até a metabolização de nutrientes, sendo de extrema importância na eliminação de bactérias e toxinas durante a resposta imunológica. No entanto, a resposta imune desencadeada neste órgão pode resultar em processo inflamatório, imunossupressão e dano tecidual
	Análises histopatológicas de linfonodos têm demonstrado engrossamento da cápsula, inflamação crônica, reação inflamatória no seio subcapsular, hiperplasia folicular em área cortical, hipertrofia e hiperplasia de macrófagos no seio medular, congestão, hemosiderose e carga parasitária.
B) De uma forma simples, dentro do contexto que foi abordado em sala de aula, explique as manifestações cutâneas da LCan. No máximo 50 palavras.
Observa-se a queda de pêlos levando as áreas a uma formação de alopecia, descamação cutânea e presença de ulcerações localizadas ou difusas. A forma cutânea clássica da leishmaniose caracteriza-se por uma dermatite esfoliativa não pruriginosa, com presença de escamas branco prateadas. Essa descamação costuma ser mais pronunciada na cabeça.
4. a) Em um animal recém-nascido qual seria o impacto da retirada do timo?
O individuo apresentará déficit na quantidade de linfócitos T imunologicamente competentes. Na fase inicial da vida esse órgão é o período em que fica mais ativo pois embora tenha nascido com uma quantidade inicial de linfócitos T imunologicamente competente, é necessário maturar ainda uma grande quantidade desses para os órgão linfoides secundários.
b) Na sua opinião, qual é a repercussão imunológica em um animal adulto que tem o timo retirado cirurgicamente?
A atividade desse órgão linfoide primário tende a reduzir com o tempo pois a quantidade de linfócitos T maturados e desenvolvidos serão suficiente apenas para substituição dos já existentes ao longo da vida adulta e senil. Logo, perderá a capacidade de renovação dessa células levando a uma deficiência gradual de linfócitos T imunologicamente competentes e da imunidade
c) Baseado na figura acima, em termos gerais, comente o processo de maturação e diferenciação do precursor linfóide no timo.
A maturação dos linfócitos T tem início a partir das células pró-T no timo que expressam genes, TdT e RAG que comandam a recombinação gênica necessária para a produção de imunoglobulinas, marcadores de superfície.
As células pré-T em estágio duplo negativo, ou seja, elas não expressam CD4 ou CD8, nesse estágio ocorre uma intensa proliferação dessas células que passarão por um processo de recombinação VDJ, devido a expressão da Rag. O processo de recombinação V(D)J em qualquer lócus de TCR envolve a seleção de um gene V, um segmento D (quando presente) e um segmento J em cada linfócito e o rearranjo de um desses segmentos, de modo a formar um único éxon V(D)J que codificará para a região variável de uma proteína do receptor de antígeno. 
Após essa recombinação gênica esses timócitos se encontram em um estágio duplo positivo, ou seja, todos os pré linfócitos expressam CD4 e CD8. A partir daí começam os processos de seleção para definir qual linfócito termina a maturação e vai para periferia e qual deve morrer.
A seleção positiva dos linfócitos Tαβ (convencionais) ocorre principalmente no córtex e envolve o reconhecimento do peptídeo próprio ligado à proteínas do MHC expressas nas células epiteliais corticais tímicas (cTECs), resultando na sobrevivência e maturação do timócito. Ou seja, preserva as células T que reconhecem MCH próprio com baixa afinidade através do seu TCR e, quando não reconhece, morre.
Os timócitos que expressam CD4 e CD8 migram do córtex para a medula tímica e passam pelo processo de seleção negativa. Na seleção negativa, os timócitos entram em contato com células dendríticas e macrófagos que lhes apresentam antígenos próprios (autoantígenos).
Os timócitos que interagem com alta afinidade com os autoantígenos sofrem apoptose, pois deveriam apresentar tolerância com seus próprios antígenos. As células T que reconhecem
autoantígenos como moléculas estranhas podem dar origem a doenças autoimune. Essa tolerância aos próprios antígenos induzida aos linfócitos na seleção negativa também é chamada de tolerância central, discutida mais adiante. Após os dois processos de seleção, positiva e negativa, os linfócitos estarão apresentando somente CD4 (vai reconhecer MCH de classe II) ou somente CD8 (vai reconhecer MCH de classe I) e reconhecendo MCH próprio com baixa afinidade. Assim estão prontos para ingressarem na circulação periférica. 
A mudança da apresentação dos receptores de superfície é derivada da expressão de RAG que possibilita a recombinação das cadeias alfa e beta.(?)
d) Comente como as células linfóides tornam-se imunocompetentes