Análise de Produtos Naturais por Espectrofotometria

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Análise de Produtos Naturais por Espectrofotometria 
 
❖ ,Identificação quantitativa 
❖ É necessário saber a quantidade para que ele 
exerça seu papel fisiológico sem gerar 
toxicidade 
❖ A espectrofotometria é qualquer técnica que 
utilize a luz para medir concentrações de 
espécies químicas 
❖ As técnicas espectrofotométricas estão 
fundamentadas na absorção da energia 
eletromagnética por moléculas que depende 
tanto da concentração quanto da estrutura 
das mesmas 
❖ As ondas luminosas consistem em campos 
magnéticos e elétricos oscilantes, perpendicu-
larmente orientados 
❖ A faixa do ultravioleta e do visível não é tão 
rico em informações estruturais, mas pode 
dar valiosas informações quantitativas 
❖ A absorção da luz é utilizada para que haja 
uma seletividade à análise 
❖ 
▪ São os grupos funcionais orgânicos que 
absorvem na região do ultravioleta ou 
visível 
▪ O termo cromóforo pode ser definido 
como uma substância que possui muitos 
elétrons que tem a capacidade de 
absorver energia ou luz visível 
▪ É possível analisar diferentes espécies em 
amostras, porque cada molécula tem sua 
característica própria, tendo, assim, seu 
perfil de absorção de luz 
▪ O espectrofotômetro mostra onde 
absorve mais luz 
▪ É importante porque se há a absorção 
do máximo de luz, é possível quantificar 
e não vai ser subestimado 
❖ 
▪ Transmissão: é a medida da diminuição da 
intensidade da radiação em determinados 
comprimentos de onda quando a radiação 
passa através da amostra, sendo calculada 
pela divisão entre a intensidade da 
radiação transmitida e a intensidade da 
radiação incidente 
▪ Os espectros em transmissão podem ser 
convertidos para absorvância (A), onde 
A = log do inverso da transmissão 
▪ Quanto menor a transmitância, maior a 
absorvância 
❖ 
▪ A absorvância (quantidade de luz 
absorvida) é muito importante, porque ela 
é diretamente proporcional à 
concentração (c) da espécie que absorve 
luz na amostra 
▪ Lei de Beer: A =  . b . c 
▪ : absortividade molar 
▪ b: distância percorrida pela luz 
▪ Falhas: 
➢ Não é tão seletivo, já que é uma 
análise coletiva 
➢ Tende a errar no estado ionizado, 
devido a uma instabilidade química 
➢ Em soluções muito concentradas 
pode não haver a proporcionalidade 
❖ 
▪ Método fácil de aplicar 
▪ Baixo custo 
▪ Análise quantitativa de fármacos em 
medicamentos 
❖ 
▪ Moderadamente seletivo 
▪ Não prontamente aplicável à análise de 
misturas, em geral são necessários 
procedimentos prévios para o preparo da 
amostra 
❖ 
▪ Análise de micotoxinas (aflatoxinas) 
▪ Análise de metabólitos secundários 
▪ Análise de proteínas 
▪ Análise de polifenóis – Reagente de Folin-
Ciocalteau (ácidos fosfomolibdico e fosfo-
tunguístico, que, na presença de agentes 
redutores, como polifenóis, mudam de 
estado oxidativo, levando a formação de 
solução cromófora – azul –, cuja 
intensidade é medida por espectrofoto-
metria) / Curva de Calibração: ver o com-
portamento do método e variações na 
concentração da solução 
▪ Reação de Folin-Ciocalteau: se a reta não 
for linear, ele tem que ter uma relação de 
proporcionalidade ótima 
❖ 
▪ Selecionar o comprimento de onda para 
análises de espécies químicas 
▪ Identificar substâncias: as curvas de 
absorção são uma espécie de “impressão 
digital” das substâncias e caracterizam a 
presença desses compostos 
▪ Indicar os comprimentos de onda para a 
dosagem das substâncias