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24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 1/6 Disc.: PLATAFORMAS MOLECULARES PARA AS ATIV. BIOLÓGICAS Aluno(a): WALTER PEREIRA DO NASCIMENTO SILVA 202004285718 Acertos: 10,0 de 10,0 24/04/2021 Acerto: 1,0 / 1,0 A carioteca é a membrana celular presente, nos eucariotos, capaz de separar o núcleo do citoplasma, os procariotos não possuem carioteca. Marque a alternativa correta. O núcleo celular em bactérias é importante para proteger dos bacteriófagos. O núcleo celular serve para que o RNAm sintetizado no citoplasma pelos ribossomos não seja degradado. A carioteca é responsável por separar o material genético dos organismos eucariontes, do restante do citoplasma. Desta forma todo o processo de transcrição e tradução é feito no núcleo e depois as proteínas são exportadas para o citoplasma. A ausência da carioteca torna os procariotos mais complexos, uma vez que não precisam gastar energia sintetizando uma membrana a extra. O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Respondido em 24/04/2021 12:56:06 Explicação: A resposta correta é: O núcleo celular compartimentado dos eucariotos possibilitou um maior grau de complexidade destes organismos. Acerto: 1,0 / 1,0 Sobre transcrição e tradução em eucariotos é correto afirmar que: A tradução no núcleo e é realizada pela organela ribossomo, com o auxílio do RNAt A transcrição e a tradução ocorrem no núcleo. O ribossomo é capas de transcrever a partir com auxílio do RNAt que leva o RNAm até ele. O RNAm maduro, formado por éxons, com o cap5¿ e a cauda poliA é endereçado para fora do núcleo para poder ser traduzido. Questão1 a Questão2 a https://simulado.estacio.br/alunos/inicio.asp javascript:voltar(); 24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 2/6 A transcrição do DNA em RNA é feita no citoplasma pela maquinaria de transcrição, um complexo proteico formado pela RNA polimerase e fatores de transcrição. Respondido em 24/04/2021 12:45:22 Explicação: A resposta correta é: O RNAm maduro, formado por éxons, com o cap5¿ e a cauda poliA é endereçado para fora do núcleo para poder ser traduzido. Acerto: 1,0 / 1,0 Quanto à organização do material genético em células, é correto afirmar que: Os plasmídeos ou elementos extracromossomais contêm genes essenciais que são importantes para as funções de sobrevivência da célula. Os transposons são feitos de DNA fita simples e possuem replicação própria independente do cromossomo. As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Células procarióticas, como Escherichia coli, contêm DNA em quantidade superior a uma célula humana, devido a um estado de torção denominado superenovelamento. O plasmídeo é constituído por fita simples de DNA com configuração linear ou circular. Respondido em 24/04/2021 12:46:19 Explicação: A resposta correta é : As células procarióticas possuem um único cromossomo, o qual se condensa no interior e é denominado de nucleoide. Acerto: 1,0 / 1,0 Após completar a extração do DNA de uma amostra de sangue não há como saber se a extração foi devidamente realizada a não ser que se faça um controle de qualidade do material extraído. Com relação ao controle de qualidade podemos afirmar que: A etapa de quantificação apenas pode ser realizada com o uso da técnica de fluorometria. É composto por três etapas: quantificação, coloração e validação. A eletroforese é feita para medir a integridade do extraído e tem como princípio diferenciar a solubilidade de cada componente. A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. Deve ser realizado a partir da observação, estabelecimento de hipóteses, análise, conclusões e divulgação de um relatório final. Questão3 a Questão4 a 24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 3/6 Respondido em 24/04/2021 12:43:38 Explicação: A resposta correta é: A espectrofotometria mede a quantidade de luz, na faixa de 260 nm, absorvida pelo DNA e RNA, desta forma é capaz de quantificar e identificar a pureza da amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 Na extração de RNA todos os cuidados citados abaixo devem ser tomados exceto: Todo o material deve ser RNAse free e lavado com soluções neutralizadoras de RNAses. Uso de solução fenol/clorofórmio em pH ácido. É preferível o uso de um aparelho sonicador para a quebra das membranas celulares, ao invés do uso de detergentes. Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. O RNA deve ser rapidamente congelado em nitrogênio líquido. Respondido em 24/04/2021 12:47:08 Explicação: A resposta correta é: Na extração de RNA usamos acetato de amônio para auxiliar a separação entra a fase orgânica e a aquosa. Acerto: 1,0 / 1,0 O DNA (ácido desoxirribonucleico), material genético de seres vivos, é uma molécula de fita dupla, que pode ser extraída de forma caseira a partir de frutas, como morango ou banana amassados, com uso de detergente, de sal de cozinha, de álcool comercial e de uma peneira ou de um coador de papel. O papel do detergente nessa extração de DNA é: Promover lise mecânica do tecido para obtenção de DNA. Promover atividades enzimáticas para acelerar a extração do DNA. Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Aglomerar o DNA em solução para que se torne visível. Emulsificar a mistura para promover a precipitação do DNA. Respondido em 24/04/2021 12:47:45 Explicação: A resposta correta é: Romper as membranas celulares para liberação do DNA em solução. Questão5 a Questão6 a 24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 4/6 Acerto: 1,0 / 1,0 No diagnóstico clínico-molecular, a reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real pode ser utilizada para a avaliação da carga viral ou bacteriana, para a determinação da resistência a antibióticos e, até mesmo, para o prognóstico de tumores malignos. A figura abaixo apresenta ciclos de amplificação de amostras por PCR em tempo real, sendo (A) uma amplificação de um determinado segmento gênico que identifica um determinado marcador tumoral em células neoplásicas e (B) uma amplificação do mesmo segmento gênico em células não neoplásicas. A partir das informações apresentadas, conclui-se que: A análise comparativa das duas amostras deve ser realizada a partir da estabilização da amplificação, que ocorre na fase platô, sendo alcançada no ciclo 28 para a amostra A, e no ciclo 40, para a amostra B. A linha paralela ao eixo referente ao número de ciclos, na altura em que se inicia a fase exponencial da amplificação gênica, denominado threshold, representa falsos sinais positivos por contaminação das amostras por DNA genômico. o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecção da reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. O maior Ct (26) é observado no início da fase exponencial de amplificação em células não neoplásicas ( B ), e indica maior expressão comparativamente às células neoplásicas ( B ), que apresentam Ct = 17, não sendo esta sequência- alvo um bom marcador tumoral. O aumento da fluorescência indica que a amplificação da sequência-alvo está ocorrendo, pois a cada ciclo, durante a desnaturação da dupla fita, ocorre liberação da fluorescência. Respondido em 24/04/2021 12:48:07 Explicação: A resposta correta é: o Ct (ciclo threshold) pode ser determinado pela intersecção da linha do limiar de detecçãoda reação threshold, com a linha da amplificação gênica de cada amostra. Acerto: 1,0 / 1,0 Questão7 a Questão8 a 24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 5/6 Ao se analisar a evolução das estratégias para determinação de identidade genética, que se tornaram um procedimento sensível e informativo, pode-se notar três fases: uma inicial, após a descrição de um marcador voltado ao polimorfismo genético em 1980, que deu origem às impressões digitais de DNA, com a aplicação de técnicas de polimorfismo de tamanho dos fragmentos de restrição - restriction fragment length polymorphism (RFLP) -; uma segunda fase de incorporação de novas técnicas, no final da década de 80 do século XX, como a reação em cadeia da polimerase (PCR), que permitiu um significativo aumento na sensibilidade dos métodos e a consequente identificação de indivíduos com amostras colhidas de fragmentos de unhas, goma de mascar etc.; e uma terceira etapa, mais recente, cuja ênfase foi a padronização metodológica e estatística e a geração de bancos de dados. Considerando as aplicações da PCR, assinale a opção correta. O uso correto da PCR requer cuidados para evitar a desnaturação do DNA na etapa em que as fitas são separadas. Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. A RT-qPCR permite a amplificação por meio da adição de aminoácidos a novas fitas de polímero sintetizadas. Uma das limitações da PCR é a impossibilidade de se amplificar diferentes sequências simultaneamente. Ao se planejar um experimento para identificação de indivíduos, deve-se ter o cuidado de escolher sondas para qPCR em regiões que não contenham mutações. Respondido em 24/04/2021 12:48:35 Explicação: A resposta correta é: Amplificação de conjuntos de repetições em tandem curtas (short tandem repeats) facilita a identificação de indivíduos. Acerto: 1,0 / 1,0 As técnicas de sequenciamento de Nova Geração (NGS) baseiam-se em uma amplificação clonal antes da reação de sequenciamento em si. No entanto, cada equipamento utiliza uma técnica diferente de amplificação clonal. Sobre estas técnicas, assinale a opção correta. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa aleatoriamente e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador Sanger. Uma das técnicas utilizadas é a PCR em ponte, no qual as fitas de DNA são dispersas em uma placa, aleatoriamente, e a PCR realizada através de pareamento de bases com fitas de DNA presentes nesta placa; esta técnica é utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento). A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Illumina e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Questão9 a 24/04/2021 Estácio: Alunos https://simulado.estacio.br/alunos/?p0=162471744&user_cod=2866880&matr_integracao=202004285718 6/6 A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador Sanger e consiste em uma emulsão de água em uma fase oleosa, formando gotículas de óleo que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Respondido em 24/04/2021 12:49:07 Explicação: A resposta correta é: A PCR em emulsão é uma técnica utilizada na metodologia do sequenciador 454 (pirosequenciamento) e consiste em uma emulsão de água, em uma fase oleosa, formando gotículas de água que contêm os reagentes de PCR, uma fita de DNA a ser sequenciado e uma "bead" para sua ancoragem. Acerto: 1,0 / 1,0 A hibridização in situ é uma ferramenta diagnóstica de doenças genéticas, como a distrofia muscular de Duchenne, e infecciosas, como a infecção por papilomavírus humano (HPV) em colo uterino. Sobre as técnicas de hibridização in situ, é incorreto afirmar que: As sondas podem ser marcadas com enzimas, fluoróforos e radioatividade; Exigem leitura através de microscópios especializados. Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; Permite a identificação com precisão do local na célula ou tecido em que a sequência-alvo está; São feitas em tecidos e células fixadas e permeabilizadas, para preservação das estruturas celulares e entrada das sondas, respectivamente; Respondido em 24/04/2021 12:57:07 Explicação: A resposta correta é: Utilizam sondas de anticorpos, capazes de reconhecer a sequência-alvo; Questão10 a javascript:abre_colabore('38403','223207083','4506902086');
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