MÉTODO DE KJELDAHL

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DIGESTÃO
Aquecimento da amostra com ácido
sultúrico e catalisador até que o C e H
sejam oxidados
Pesagem do tubo de digestão na
balança analítica e pesagem de 0,2g
de amostra em um pedaço de papel
manteiga
Transferência da amostra para o tubo
e adição de 5ml de ácido sulfúrico +
2g de mistura catalítica (Na2SO4 e
CuSO4.5H2O)
Levar ao bloco digestor a 350ºC até
que a mistura adquira coloração
verde (+/- 4h) → formação de sulfato
de amônio
DESTILAÇÃO
Aquecimento do sulfato de amônio, com
liberação da amônia (condensada) e
formação de borato de amônio
Determinação do teor de proteína a partir da quantificação do nitrogênio orgânico da amostra
Tubo é conectado ao
destilador de
nitrogênio e é
adicionado 20ml de
NaOH a 30%
+
Adicionar 10ml de ácido bórico em um
Erlenmeyer e 4 gotas de indicador de Kjeldahl
Destilador é acionado até que se
obtenha 50ml de destilado da
amostra
A solução no erlenmeyer, após a destilação,
muda da cor roxa para a verde clara, obtendo
o borato de amônio (forma mais estável)
TITULAÇÃO
Borato de amônio é titulado com
solução de ácido clorídrico (HCl)
padronizada até a viragem de cor
Preencher a bureta com ácido clorídrico
padronizado e abrir a torneira cuidadosa e
lentamente, deixando o HCl gotejar no
Erlenmeyer, que deve ser agitado
concomitantemente
Quando houver a viragem de coloração do
verde para o rosa, a bureta é fechada e o
valor de HCl consumido é anotado
DETERMINAÇÃO DO N TOTAL
N total (%) = (Va - Vb) x f x 0,0014 x 100 / P
N = Nitrogênio
Va = Volume de HCl 0,1 N gasto na amostra
Vb = Volume HCl 0,1 N gasto no branco
f = fator de correção do HCl 0,1 N
0,0014 = miliequivalente grama do nitrogênio
P = peso da amostra em gramas
 
DETERMINAÇÃO DE PTN TOTAL
Proteína total (%) = N total x 6,25
6,25 = fator de conversão geral do nitrogênio
em proteína
 
Varia de acordo com a
matéria prima principal do
alimento analisado
protocolo nº 920.87 da AOAC, 2005