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Prova l Biologia Molecular

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1. O advento das técnicas de biologia 
molecular possibilitou o estudo genético de 
diversos organismos, incluindo os seres 
humanos. Esses estudos têm trazido ganhos 
significativos no entendimento de doenças, 
síndromes e mecanismos de ação de 
substâncias. De acordo com a importância 
das técnicas de clonagem do DNA e 
construção de bibliotecas genômicas, 
classifique V para as sentenças verdadeiras 
e F para as falsas:
(    ) As enzimas de restrição são utilizadas 
na construção de bibliotecas de DNA, com o 
objetivo de fragmentar o DNA genômico, já 
que podem ser conhecidas como tesouras 
moleculares. 
(    ) Os vetores são essenciais na técnica de 
clonagem e são utilizados tanto na 
construção de bibliotecas de DNA, quanto 
de cDNA, uma vez que carregam os 
fragmentos de DNA ou o cDNA extraído.
(    ) As bibliotecas de cDNA são construídas 
a partir da extração do DNA de células ou 
tecidos, que posteriormente é submetido à 
clonagem do DNA.
(    ) O mRNA é convertido em cDNA pela 
transcrição reversa, para então serem 
introduzidos em vetores e submetidos ao 
processo de clonagem para originar as 
bibliotecas de cDNA.
Assinale a alternativa que apresenta a 
sequência CORRETA:
V - V - F - 
V.
F - F - V - 
F.
 a)
 b)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
V - F - V - 
V.
V - F - F - 
V.
 d)
 c)
2. Para detecção do DNA em bibliotecas de 
DNA, uma membrana é colocada em contato 
com as colônias na placa logo após o 
crescimento das colônias bacterianas em 
placas de cultivo contendo meio sólido. 
Algumas células irão se aderir à membrana, 
formando uma impressão das colônias 
presentes na placa. Em seguida, as células 
aderidas sofrem lise celular, a fim de liberar 
o DNA, que permanece aderido à 
membrana. Por fim, a membrana é incubada 
com sondas de hibridização marcadas, 
complementares à porção do gene de 
interesse, permitindo a visualização da 
posição dos clones que contêm o fragmento 
de interesse. Sobre a técnica exposta, 
assinale a alternativa CORRETA:
Northen-blot.
Southern-blot.
Hibridização in situ.
Hibridização em 
colônia.
 a)
 b)
 c)
 d)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
3. Com o passar do tempo, as técnicas de 
sequenciamento ficaram mais sofisticadas e 
automatizadas. Sobre o sequenciamento de 
segunda geração, analise as sentenças a 
seguir:
I- O Next Generation Sequencing (NGS) não 
utiliza nucleotídeos terminadores de cadeira, 
permitindo a criação de plataformas mais 
eficientes e rápidas.
II- Os métodos de segunda geração 
compreendem o uso de plataformas 
portáteis com processamento rápido e 
eficiente, em plataformas do tamanho de um 
pen drive.
III- Os métodos de segunda geração 
compreendem o pirosequenciamento, o 
sequenciamento por síntese, 
sequenciamento por terminação de cadeia 
reversível, sequenciamento por hibridização 
e ligação, dentre outros.
Assinale a alternativa CORRETA:
Somente a sentença II está 
correta.
Somente a sentença I está correta.
As sentenças I e II estão corretas.
As sentenças I e III estão corretas.
 a)
 b)
 c)
 d)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
4. A escolha do gel para a técnica de 
eletroforese deve-se dar através do tamanho 
da molécula a ser isolada e do objetivo do 
isolamento. Com base nas matrizes de 
agarose e poliacrilamida para a técnica de 
eletroforese em gel, analise as sentenças a 
seguir:
I- A poliacrilamida pode separar fragmentos 
de DNA com até mesmo uma única base 
nitrogenada de diferença. 
II- A agarose, apresenta menor resolução, ou 
seja, cada banda presente no gel, 
representa um agrupamento de moléculas 
de tamanho semelhantes. 
III- No gel de poliacrilamida, uma menor 
faixa de tamanho das moléculas pode se 
movimentar, enquanto fragmentos maiores 
de DNA podem migrar facilmente no gel de 
agarose.
Assinale a alternativa CORRETA:
Somente a sentença III está correta.
Somente a sentença II está correta.
Somente a sentença I está correta.
As sentenças I, II e III estão 
corretas.
 a)
 b)
 c)
 d)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
5. Uma das técnicas essenciais em biologia 
molecular é a capacidade de sequenciar o 
gene de um organismo. Esse 
sequenciamento é importante, pois identifica 
possíveis mutações, cadeias de transmissão 
e origem da chegada do vírus a uma região 
específica. De acordo com as técnicas 
empregadas para o sequenciamento de 
DNA, classifique V para as sentenças 
verdadeiras e F para as falsas:
(    ) Os didesoxinucleotídeos (ddNTP) são 
utilizados para o sequenciamento com o 
método de Sanger, em que, posteriormente, 
faz-se a identificação da sequência com 
eletroforese. 
(    ) O pirosequenciamento tem como base 
a formação de pirofosfato a cada novo 
nucleotídeo adicionado à nova fita. 
(    ) O método empregado na plataforma 
Illumina foi a base para o desenvolvimento 
dos testes de sequenciamento que 
conhecemos atualmente, sendo a primeira 
geração de sequenciamento de DNA.
Assinale a alternativa que apresenta a 
sequência CORRETA:
F - F - 
V.
V - V - 
F.
V - F - 
V.
V - F - 
F.
 a)
 b)
 c)
 d)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
6. O uso de bibliotecas de DNA ou cDNA 
permitem a manutenção e replicação do 
material genético em grandes coleções 
mantidas em colônias de bactérias, nas 
quais um fragmento específico de DNA ou 
um gene podem ser procurados. Sobre as 
bibliotecas de DNA e cDNA, avalie as 
asserções a seguir e a relação proposta 
entre elas:
I- A bactéria E. coli é a principal célula 
hospedeira utilizada no processo de 
clonagem em vetores, inclusive na 
construção de bibliotecas de DNA e cDNA, 
em que cada bactéria irá internalizar apenas 
um vetor.
PORQUE
II- Assim que o vetor é inserido, em 
condições adequadas de diluição e meio de 
cultivo, em poucas horas corre a formação 
de diversos clones dos fragmentos inseridos, 
sendo cada um encontrado em uma colônia 
diferente de crescimento bacteriano.
Assinale a alternativa CORRETA:
As asserções I e II são proposições 
verdadeiras, mas a II não é uma 
justificativa da I.
As asserções I e II são proposições 
falsas.
A asserção I é uma proposição falsa, e a 
II é uma proposição verdadeira.
As asserções I e II são proposições 
verdadeiras, e a II é uma justificativa da I.
 c)
 d)
 a)
 b)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
7. O RNA é uma molécula muito semelhante ao 
DNA, originado a partir do processo de 
transcrição, em que carrega informações 
contidas no DNA para fora do núcleo. Essas 
informações, darão origem à síntese de 
proteínas, através do processo de tradução. 
Sobre o RNA, assinale a alternativa 
CORRETA:
O RNA é uma estrutura em fita simples, 
composta pelos nucleotídeos adenina, 
timina, citosina e guanina.
O RNA é composto por cinco 
nucleotídeos, adenina, uracila, timina, 
guanina e citosina.
O RNA é uma estrutura em dupla hélice, 
composta pela desoxirribose, 
nucleotídeos e fosfato.
O RNA é uma estrutura em fita simples, 
composta pela pentose denominada 
como ribose; os nucleotídeos adenina, 
uracila, citosina e guanina e fosfato.
 a)
 b)
 c)
 d)
8. Com o desenvolvimento das técnicas de 
clonagem de DNA, tornou-se possível a 
construção de bibliotecas de DNA e cDNA. 
Sobre as bibliotecas, assinale a alternativa 
CORRETA:
As bibliotecas de mRNA são originadas a 
partir da fragmentação do DNA com 
enzimas de restrição e, posteriormente, 
da clonagem do DNA.
As bibliotecas de cDNA contêm somente 
os éxons de uma molécula de mRNA, que 
posteriormente é convertido em cDNA 
pela técnica de transcrição reversa.
 b)
 a)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
A biblioteca de cDNA contém éxons e 
íntrons, já que são clonados todos os 
fragmentos de DNA, incluindo o não 
codificante.
Uma biblioteca de DNA contém somente 
os íntrons de uma molécula de DNA, 
sendo extremamente específico para 
identificar o conteúdoexpresso em uma 
célula ou tecido.
 c)
 d)
9. Os ciclos do PCR (reação em cadeia da 
polimerase) são críticos para o sucesso da 
técnica. Em torno de 20-40 ciclos são 
programados no termociclador, a fim de se 
obter milhares de cópias de DNA. Sobre os 
ciclos do PCR associe os itens, utilizando o 
código a seguir:
I- Desnaturação.
II- Anelamento.
III- Extensão.
(    ) Estágio em que os primers se ligam à 
fita do DNA na sua sequência complementar.
(    ) Estágio inicial, em que ocorre abertura 
da dupla fita, liberando os nucleotídeos de 
cada uma das fitas simples. Esta etapa 
ocorre em uma alta temperatura, em cerca 
de 95º C.
(    ) Estágio correspondente à adição de 
nucleotídeos pela DNA polimerase 
específica, denominada como Taq DNA 
polimerase, em uma temperatura de 72º C.
Assinale a alternativa que apresenta a 
sequência CORRETA:
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
I - III - 
II.
II - I - 
III.
III - II - 
I.
I - II - 
III.
 a)
 b)
 c)
 d)
10
.
A terceira geração de métodos de 
sequenciamento de DNA, possibilitaram 
analisar as sequências de nucleotídeos de 
uma única molécula de DNA, sem a 
necessidade de amplificar a molécula. Sobre 
esses métodos, assinale a alternativa 
CORRETA:
É o mais recente avanço em biologia 
molecular, que permite o sequenciamento 
de DNA de forma portátil, capaz de 
sequenciar grandes moléculas de DNA 
em pequenos equipamentos, 
semelhantes a pen drives. A plataforma 
MinION é a mais utilizada.
É um método totalmente automatizado, 
também conhecido como Illumina, em que 
o DNA a ser sequenciado é fragmentado 
por nebulização e os fragmentos são 
acoplados a uma placa de vidro por meio 
de primers adaptadores, formando uma 
biblioteca de DNA, que será submetida ao 
PCR.
 a)
 b)
Parabéns! Você acertou a questão: Sua resposta está correta!
Para os métodos de terceira geração, são 
utilizadas plataformas 454, que são 
esferas sólidas, nas quais são ligadas as 
sequências adaptadoras, com o DNA a 
ser sequenciado, formando uma 
biblioteca de DNA.
A terceira geração de sequenciamento 
utiliza DNA fragmento que é transformado 
em fragmentos de DNA circular, os quais 
são replicados em chips com nano-poços. 
A cada novo nucleotídeo adicionado à 
nova fita, ocorre a emissão de 
fluorescência e a detecção ocorre em 
tempo real.
 c)
 d)

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