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CAMPUS AVANÇADO DE GOVERNADOR VALADARES DEPARTAMENTO DE FARMÁCIA Qualidade das Águas Prof.ª: Janaína Seibert EXAME BACTERIOLÓGICO DA ÁGUA Andressa Barros Paschoalim Larissa Torres Fernandes Leticia Guedes Morais Luiza Rodrigues Auad Junho de 2018 Governador Valadares – MG 1. INTRODUÇÃO A água é essencial para os organismos vivos e por também poder ser fonte de doenças, é extremamente importante avaliar a presença de microorganismos patogênicos. Bioindicadores, como bactérias do grupo coliforme, notificam a presença de bactérias fecais, portanto indicando contaminação fecal na água. Tais analises é extremamente importante para garantia de uma água potável para o consumo humano, garantindo que tal agua não irá prejuízos à saúde da população. 2. OBJETIVOS Analise da presença de coliformes totais em amostras de água potável, através do método de tubos múltiplos. 3. MATERIAIS E MÉTODOS 3.1. MATERIAIS E REAGENTES UTILIZADOS 3.1.1. Água de diluição; 3.1.2. alça de platina com cabo de Kolle; 3.1.3. bico de Bunsen ou lâmpada a álcool; 3.1.4. caldo lactosado de concentração dupla; 3.1.5. caldo lactosado de concentração simples; 3.1.6. caldo lactosado verde brilhante bile a 2%; 3.1.7. estante para tubos de ensaio; 3.1.8. estufa bacteriológica; 3.1.9. pipeta graduada de 10 mL; 3.1.10. pipeta graduada de 1mL; 3.1.11. tubos de Durhan; 3.1.12. tubos de ensaio. 3.2. MÉTODOS 3.2.1. PROCEDIMENTO DE COLETA DA AMOSTRA DE ÁGUA Lavou-se as mãos com água e sabão, em seguida limpou-se a torneira com um pedaço de algodão embebido em álcool; abriu-se a torneira deixando uma vazão de água por 1 ou 2 minutos, interrompeu-se a vazão de água e flambou-se a torneira em seguida. Novamente se abriu a torneira e deixou uma vazão de água por mais 2 minutos, em seguida coletou-se a amostra de água em frasco esterilizado. 3.2.2. EXECUÇÃO DO TESTE 3.2.2.1. TESTE PRESUNTIVO Pegou-se uma bateria contendo 15 tubos de ensaio distribuídos de 5 em 5; nos primeiros 5 tubos continha caldo lactosado de concentração dupla, nesses utilizou-se uma pipeta esterilizada acrescentando 10 mL da amostra de água, a diluição nesse procedimento foi de 1:1. Nos 10 tubos restantes que continha caldo lactosado de concentração simples, inoculou-se nos 5 primeiros, 1 mL da amostra onde a diluição foi de 1:10 e nos 5 últimos tubos, inocula-se 0,1 mL da amostra, em cada tubo onde a foi de diluição 1:100, em seguida misturou-se as amostras e levou para uma incubadora a 35 0,5 ºC durante 24/48 horas. Caso no final de 24/48 horas, houvesse formação de gás dentro do tubo de Durhan, significaria que o teste presuntivo foi positivo. Neste caso, fazer o teste confirmativo. Se não houver formação de gás, teste termina nesta fase e o resultado é negativo. 3.2.2.2. TESTE CONFIRMATIVO Observar a quantidade e quais tubos do Teste presuntivo obtiveram resultados positivo através da formação de gás nas 3 diluições 1:1; 1:10 e 1:100, posteriormente separou-se tubos contendo o meio de cultura verde brilhante bile a 2% previamente preparados, logo após isso com o auxílio de uma alça de platina, que foi previamente flambada e deixada resfriar, retirou-se de cada tubo positivo uma porção de amostra e inoculou-se no tubo correspondente contendo o meio verde brilhante. Este procedimento possui o nome de repicagem. Identificou-se cada tubo e em seguida os levou para a incubadora por 24/48 horas a 35+- 0,5ºC. Caso no final de 24/48 horas houver formação de gás dentro do tubo de Durhan, o teste é considerado positivo, o contrário disso o teste será considerado negativo. 4. RESULTADOS E DISCUSSÃO A prática foi realizada através da técnica de tubos invertidos, assim, caso houvesse presença de gás nos mesmos, o exame apresentaria resultado positivo indicando a fermentação da lactose realizada pelos microrganismos. No entanto, após todos os procedimentos e a espera de 24 horas, as diluições realizadas não apresentaram presença de gás, confirmando então a ausência de microrganismos na amostra coletada. Em testes realizados em que o resultado é positivo, o número de microrganismos presentes é dado através de uma tabela de números mais prováveis, assim é possível determinar o grau de contaminação da água por estes agentes. 5. CONCLUSÃO Após experimento, concluiu-se que a água examinada não possui microorganismos, sendo assim, ideal para o consumo humano, considerando este parâmetro. Vale ressaltar, que para tal resultado, conclui-se que os alunos realizaram a prática corretamente, não contaminando, desta forma, a amostra. 2 CAMPUS AVANÇADO DE GOVERNADOR VALADARES DEP ARTAMENTO DE FARMÁCIA Qualidade das Águas Prof.ª : Janaína Seibert EXAME BACTERIOLÓGICO DA ÁGUA Andressa Barros Paschoalim Larissa Torres Fernandes Leticia Guedes M orais Luiza Rodrigues Auad Junho de 2018 Governador Valadares – MG CAMPUS AVANÇADO DE GOVERNADOR VALADARES DEPARTAMENTO DE FARMÁCIA Qualidade das Águas Prof.ª: Janaína Seibert EXAME BACTERIOLÓGICO DA ÁGUA Andressa Barros Paschoalim Larissa Torres Fernandes Leticia Guedes Morais Luiza Rodrigues Auad Junho de 2018 Governador Valadares – MG
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