A testosterona induz a migração de leucócitos

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“A testosterona induz a migração de leucócitos por mecanismos dependentes de ROS e COX2 conduzidos por NADPH oxidase”
Paula dos Santos Athayde
Medicina UFES – 105
Iniciação Científica 
Introdução 
Testosterona exógena - risco cardiovascular, ativação coagulatória e progressão acelerada da doença arterial coronariana 
Mecanismos não esclarecidos – Estresse Oxidativo e Inflamação como determinantes 
https://www.rodrigopaez.com.br/publicacoes/doenca-arterial-coronariana-uma-visao-geral-da-doenca/
Introdução
Objetivo: Testosterona exógena induz a migração de leucócitos – Respostas inflamatórias, imunológicas e nos mecanismos mediadores
Hipótese: Hormônio esteroide induz a migração de leucócitos via NADPH oxidase, mecanismos dependentes – Espécies reativas de oxigênio (ROS) e ciclooxigenase (COX)
- COX: Mediadores da inflamação e alvo farmacológico para agentes antiinflamatórios
Métodos 
Fármacos
Salicilato de Sódio (SS): Inibidor não seletivo da COX
Flutamida: Antagonista do receptor de andrógeno 
Apocinina: Inibidor da NADPH oxidase 
N- [2- (Ciclohexiloxi)-4-nitrofenil] metanossulfonamida (NS398): Inibidor seletivo da COX 2 
Métodos 
Ratos Wistar, 16 semanas
 Injeção intraperitoneal de 5 ml: Soro fisiológico, apocinina, NS398 ou flutamida, conforme apropriado
- Após 4h, injeção intraperitoneal de testosterona ou solução salina
Obs. Animais pré-tratados com salicilato de sódio (SS), 
testosterona foi aplicada 1h após
https://www.biot.fm.usp.br/index.php?mpg=03.00.00&tip=rato&id_ani=17&caract=sim
Métodos 
Migração de leucócitos – 24h: Microscopia intravital do leito mesentérico 
Níveis séricos de testosterona – Radioimunoensaio
Atividade de NADPH oxidase: Frações de membrana do leito mesentérico via DHE e em células de músculo liso vascular por cromatografia líquida de alta eficiência 
Subunidades de NADPH oxidase e expressão da molécula de adesão vascular: Imunoblotting 
Resultados 
A testosterona induz a migração de leucócitos de maneira dependente do tempo
Análise via microscopia intravital do leito mesentérico
24h após aplicação da testosterona: Maior número de leucócitos migrados
Testosterona modula o comportamento de leucócitos 
Resultados 
A testosterona induz a migração de leucócitos de maneira dependente do tempo
Resultados 
A migração de leucócitos induzida por testosterona depende da atividade da NADPH oxidase 
- Microscopia
- Para saber se a migração é sensível a redox, uso da apocinina 
Resultados 
COX 2 contribui para a migração de leucócitos induzido por testosterona 
- Salicilato de Sódio (SS): Não seletivo. Inibiu moderadamente.
Resultados 
COX 2 contribui para a migração de leucócitos induzido por testosterona 
- NS398: Inibição de COX2. Aboliu os efeitos da testosterona na migração de leucócitos.
Resultados 
COX 2 regula os efeitos da testosterona na atividade da NADPH oxidase 
Análise via DHE nas frações de membrana do leito mesentérico
Abolição dos efeitos da testosterona na atividade da NADPH oxidase ao bloquear COX 2 
Discussão
Testosterona induz a migração de leucócitos por mecanismos dependentes de NADPH oxidase – ROS e COX2
- Pode contribuir para processos inflamatórios e estresse oxidativo, maior risco cardiovascular
Testosterona induz a migração de leucócitos
Aumento na produção de ROS 
Maior atividade e expressão da NADPH oxidase 
COX como mediadores da migração de leucócitos 
COX 2 determinante na migração de leucócitos induzido por testosterona 
COX 2 necessária para ativação do NADPH oxidase pela testosterona 
	
Perspectivas clínicas 
A migração de leucócitos é um processo chave na resposta imune, inflamação e algumas doenças cardiovasculares, como a aterosclerose. 
Os mecanismos pelos quais a testosterona contribui para a inflamação, doenças cardiovasculares e resposta imunológica: Desconhecidos.
Perspectivas clínicas 
A testosterona induz a migração de leucócitos pelas vias dependentes de COX2 e NADPH oxidase.
COX2 e NADPH oxidase são potenciais alvos terapêuticos para diminuir o risco cardiovascular causado pela testosterona.
Referências 
CHIGNALIA, Andreia Z.; OLIVEIRA, Maria Aparecida; DEBBAS, Victor; DULL, Randal O.; LAURINDO, Francisco R.M.; TOUYZ, Rhian M.; CARVALHO, Maria Helena C.; FORTES, Zuleica B.; TOSTES, Rita C.. Testosterone induces leucocyte migration by NADPH oxidase-driven ROS- and COX2-dependent mechanisms. Clinical Science, [S.L.], v. 129, n. 1, p. 39-48, 1 abr. 2015. Portland Press Ltd.. http://dx.doi.org/10.1042/cs20140548.
	Obrigada, 
Feliz Natal e Próspero Ano Novo!