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Atividade aula prática EXERCÍCIOS DE REVISÃO PARA PROVA A2 UC: AGRAVOS E IMUNIDADE EM SAÚDE ANIMAL Alunos (as): __________________________________________________ Data da entrega: 24/11/2020 1. A Linfangite Ulcerativa trata-se de uma patologia infecciosa de caráter bacteriano, que atinge animais sem distinção de raça, idade ou sexo. Tem como principais agentes Corynebacterium pseudotuberculosis, Staphylococcus spp., Streptococcus spp., Pseudomonas aeruginosa e Rhodococcus equi. É uma doença prevalente na Medicina Veterinária apesar de ter profilaxia simples, basicamente higiene e privar os animais do contato com vetores ou outros animais infectados. Seu diagnóstico depende de um exame clínico bem realizado se baseando em sinais clínicos, podendo ser auxiliado por diagnóstico laboratorial identificando o agente causador. O tratamento se mostra longo e dependente de diagnóstico. Quais seriam as análises microbiológicas que podem ser realizadas para um diagnóstico e tratamento mais assertivo no caso de uma infecção bacteriana deste tipo? Explique. 2. A imunidade inata é a primeira linha de defesa do organismo, com a qual ele já nasce. É uma resposta rápida, não específica e limitada aos estímulos estranhos ao corpo. É representada por barreiras físicas, químicas e biológicas, células e moléculas, presentes em todos os indivíduos. Cite as principais células envolvidas no mecanismo de resposta imunológica inata após a instalação de uma infecção bacteriana e a função de cada uma delas. 3. Cite 3 representantes e depois dê as características específicas dos fungos dermatófitos que estão presentes na rotina de atendimento clínico de cães. 4.Defina: resposta imune celular e resposta imune humoral. Caracterize os linfócitos B, T e os mastócitos. 5. Diferencie a imunidade inata e imunidade adaptativa. 6. Explique como funciona o protocolo da técnica de coloração de GRAM. Dê 4 exemplos e bactérias Gram positivas e 4 Gram negativas. 7. Fale sobre o que acontece durante uma resposta inflamatória. Cite 3 componentes importantes que participam deste evento. 8. Diferencie resposta imune primária de resposta imune secundária. 9. A Influenza Suína (IS) é uma doença endêmica, acomete rebanhos em todas as fases de produção e geralmente não é sazonal. A introdução em rebanhos ocorre por movimento de animais de reposição de origens diferentes e o VIS é transmitido principalmente de suíno para suíno por secreções do sistema respiratório. A infecção característica tem um quadro de morbidade alta, afetando quase toda totalidade do rebanho, mas com mortalidade baixa. Considerando o trecho acima, avalie as asserções a seguir e a relação proposta entre elas. Diga se são verdadeiras ou falsas e justifique. 1. O diagnóstico sorológico do vírus da influenza A nos suínos, pode ser feito a partir do início dos sinais clínicos. 2. O período de soroconverção ocorre até 14 dias após o início dos sinais clínicos nos suínos doentes. 10. Cite o agente etiológico causador da tuberculose bovina e fale sobre o método diagnóstico empregado para identificação deste agente. 11. Defina a doença toxocaríase. Explique como acontece sua transmissão para os humanos. 12. Caracterize a doença pitiose, cite seu agente etiológico causador e os métodos diagnósticos empregados para sua identificação. 13.Discorra sobre os prejuízos causados pela mosca dos chifres 14. Fale sobre a função das células NK na resposta imunológica. 15. Caracterize microbiologicamente o agente etiológico causador da brucelose 16. Cite o agente causador da leptospirose, fale sobre sua importância e explique como ela é transmitida. 17. Defina o termo imunogenicidade. 18. Diferencie a parede bacteriana dos microrganismos gram positivos e gram negativos. GABARITO 1. Teste de motilidade que pode indicar indiretamente a produção de flagelos, a prova é negativa quando os microrganismos ficam restritos ao local da inoculação sem, contudo, turvar o meio, e positiva quando há deslocamento, sendo possível observar meio turvo. Produção de catalase, esta enzima atua sobre o peróxido de hidrogênio, desdobrando-o em oxigênio e água, a prova permite diferenciar as bactérias em grupos catalase positivas ou negativas, sendo Corynebacterium e Staphylococcus catalase positivos, e Streptococcus, catalase negativo. O antibiograma, conhecido como o teste de Sensibilidade a Antimicrobianos (TSA), poderia ser realizado para identificar a sensibilidade da bactéria aos possíveis antibióticos indicados para o caso, aumentando as chances do sucesso da terapia medicamentosa indicada. 2. As primeiras células constituintes do sistema imune inato a entrarem em ação após a infecção bacteriana, são os fagócitos: neutrófilos, eosinófilos, macrófagos e células dendríticas, sendo que as duas últimas, macrófagos e células dendríticas, ainda podem se comportar como células apresentadoras de antígenos (APC). Fagócitos: capazes de ingerir substâncias estranhas, bactérias, células mortas ou que irão morrer Monócitos, macrófagos, neutrófilos e células dendríticas também são fagócitos pois são capazes de fagocitar e destruir antígenos (invasores), sendo que os macrófagos e células dendríticas ainda podem ser denominados células apresentadores de antígenos, por serem capazes de expor em sua superfície fragmentos de antígenos fagocitados por serem reconhecidos por linfócitos. 3. Entre as micoses que afetam a pele de caninos, as mais comumente encontradas são as causadas por dermatófitos (Microsporum canis, M. gypseum e Trichophyton mentagrophytes) e por leveduras (Malassezia pachydermatis e Candida albicans). São queratolíticos, não sobrevivem em intensa resposta inflamatória e causam micoses superficiais. 4. A imunidade humoral gera uma resposta mediada por moléculas no sangue e nas secreções da mucosa,chamadas de anticorpos, produzidos pelos linfócitos B, sendo o principal mecanismo de defesa contra microrganismos extracelulares e suas toxinas. Por sua vez, a imunidade celular gera resposta mediada pelos linfócitos T. Os linfócitos B, também chamados de células B (de bursa ou bolsa de Fabricius, nas aves, e derivadas da medula óssea, nos mamÌferos), quando ativados, proliferam e se diferenciam em células plasmáticas ou plasmócitos, que são as células efetoras da linhagem B, cuja função principal é a secreção de anticorpos. Os linfócitos T, ou células T (derivados do timo), se apresentam em duas classes principais. Uma se diferencia, quando ativada, em células T CD8+ ou citotóxicas, que matam as células infectadas, ao passo que a outra classe de células T, chamadas de células T CD4+ ou auxiliares, atuam na ativação de outras células, como os linfócitos B e os macrófagos, além de coordenar a resposta imunitária. No tecido, os mastócitos tem o papel de participar da inflamação e alergia, pois seus grânulos contêm aminas vasoativas como a histamina e a serotonina. Os mastócitos são encontrados próximos aos vasos sanguíneos em todos os tecidos. 5. A imunidade inata constitui a primeira linha de defesa do organismo e caracteriza-se pela rápida resposta à agressão, independentemente de estímulo prévio. Já a imunidade adaptativa compreende a linha de defesa específica que é adquirida após o contato com os patógenos, como por exemplo, através das vacinas. 6. Método de coloração de GRAM: 1. Cubra o esfregaço com violeta-de-metila e deixe por aproximadamente 15 segundos; 2. Adicione igual quantidade de água sobre a lâmina coberta com violeta-de- metila e deixe agir por mais 45 segundos; 3. Escorra o corante e lave em um filete de água corrente; Cubra a lâmina com lugol diluído (1/20) e deixe agir por aproximadamente 1 minuto;4. Escorra o lugol e lave em um filete de água corrente; 5. Adicione álcool etílico (99,5º GL) sobre a lâmina; descorando-a, até que não desprenda mais corante; 6. Lave em um filete de água corrente; 7. Cubra a lâmina com safranina e deixe agir por aproximadamente 30 segundos; 8. Lave em um filete de água corrente; 9. Deixe secar ao ar livre, ou seque suavemente, com o auxílio de um papel de filtro limpo; 10. Coloque uma gota de óleo de imersão sobre o esfregaço; e 11. Leia em objetiva de imersão (100 X). BACTÉRIAS GRAM POSITIVAS Staphylococcus aureus Bacillus anthracis Clostridium botulinum Clostridium tetani BACTÉRIAS GRAM NEGATIVAS Campylobacter Brucella Salmonella E. coli 7. A inflamação é a resposta local de um tecido ao dano ou à presença de um agente agressor. O aumento do suprimento sanguíneo, aumento da permeabilidade capilar e aumento da migração dos leucócitos para o tecido. 8. O primeiro contato com um antígeno (Resposta Primária), por exposição natural ou vacinação, leva à ativação de Linfócitos B virgens, que se diferenciam em plasmócitos produtores de anticorpos e em células de memória, resultando na produção de anticorpos específicos contra o antígeno indutor. Ao entrar em contato com o antígeno pela segunda vez (Resposta Secundária), já existe uma população de Linfócitos B capazes de reconhecer esse antígeno devido à expansão clonal e células de memória geradas na resposta primária. A resposta secundária difere da primária nos seguintes aspectos: a dose de antígeno necessária para induzir a resposta é menor; a fase de latência é mais curta e a fase exponencial é mais acentuada; a produção de anticorpos é mais rápida e são atingidos níveis mais elevados. 9. (1) Falsa pois os anticorpos só podem ser detectados na corrente sanguínea dos animais após o pico de soroconverção que ocorre de 10 a 14 dias após o início dos sinais clínicos. (2) Falsa, pois o período de soroconverção não se limita aos 14 dias após o início dos sinais clínicos, entre o 10 e 14 acontece o pico de produção de anticorpos e não o fim da produção dos mesmos pelos animais doentes. 10. A tuberculose bovina é uma doença zoonótica que tem como agente causador o Mycobacterium bovis, uma micobactéria de crescimento lento, intracelular obrigatória e pertencente ao complexo de Mycobacterium tuberculosis A tuberculose bovina pode ser diagnosticada pelo exame bacteriológico, além de outras técnicas. A coloração de Ziehl-Neelsen é empregada para a detecção de bacilos álcool ácido resistentes e pode ser utilizada em amostras frescas de lesões, fixadas em lâminas, e em colônias isoladas no meio de cultura de animais suspeitos de tuberculose. 11. A Larva Migrans Visceral (LMV), também conhecida como Toxocaríase, é provocada pela migração de larvas de nematóides, principalmente Toxocara cati e Toxocara canis no organismo humano. A doença ocorre pela ingestão acidental de ovos larvados dos vermes juntamente com areia ou terra contaminada, vegetais crus ou outros alimentos que entram em contato com o solo e posteriormente são ingeridos. 12. A pitiose é uma afecção granulomatosa crônica ocasionada por um fungo-Like ou oomiceto que acomete os equinos e outras espécies como cães, bovinos, caprinos, felinos, animais silvestres e seres humanos. Ocorre em regiões de climas tropicais, subtropicais ou temperados e em áreas com acúmulo de água, banhados e lagoas. É uma doença que provoca um quadro infeccioso na pele e região subcutânea, pode apresentar quadros sistêmicos, pulmonares, gastrointestinais, oculares, entre outros. A enfermidade em equinos caracteriza-se pela formação de granulomas eosinofílicos, com a presença de massas necróticas denominadas de “kunkers”. A cultura fúngica com a complementação de microscopia e coloração correta é importante para diferenciação dos agentes causadores de doenças nos animais domésticos. O reconhecimento dos agentes infecciosos em animais domésticos é fundamental para a instituição de um tratamento eficiente e consequente melhora do quadro do paciente. 13. A mosca Haematobia irritans, conhecida como mosca do chifre, tem preferência por bovinos e possuem aparelho bucal do tipo picador e causa prejuízos como espoliação sanguinea e irritação dos animais, consequentemente esses animais apresentarão uma dificuldade para se alimentar e a partir daí teremos uma queda do desempenho produtivo deles. 14. Quando um vírus por exemplo, se infiltra no organismo animal, o sistema imunológico inato é o primeiro a entrar e cena e lançar um ataque amplo e inespecífico contra o intruso. Esse ataque é mediado pelas células Natural Killer (NK), que são células desprovidas de receptores antígenos-específicos, que circulam no sangue como grandes linfócitos, com diferentes grânulos citotóxicos, e são capazes de reconhecer e matar algumas células anormais, tais como células tumorais e células infectadas por vírus. A citólise mediada pelas células NKs ocorre pela ação das enzimas perforinas, que criam poros na membrana das células-alvo, e granzimas, que penetram nas células, desencadeando morte celular por apoptose. A célula infectada por vírus secreta interferon do tipo I que atua de forma parácrina, protegendo as células adjacentes não infectadas e de forma autócrina, inibindo a replicação viral, levando ao estado antiviral. 15. Brucelose é uma doença infecciosa, causada por diferentes gêneros da bactéria Brucella. Também é conhecida como febre de Malta, febre mediterrânea ou febre ondulante. Tem como manifestações clínicas iniciais febre, sudorese noturna, calafrios, cansaço, dores de cabeça, no abdômen e das costas, além de inapetência. É uma zoonose, transmitida dos animais para os homens. A infecção ocorre no contato direto com animais doentes ou ingerem leite não pasteurizado, produtos lácteos contaminados (como por exemplo queijo e manteiga) carne mal passada e seus subprodutos. Brucella é um gênero de bactérias gram-negativas. São cocobacilos pequenos, formando colônias muito pequenas, lisas, com tom esbranquiçado e não- hemolíticas. São imóveis, não capsulados, não esporuladas e são aeróbios estritos, realizando metabolismo oxidativo. 16. A leptospirose é uma doença infecciosa febril, aguda, potencialmente grave, causada por uma bactéria, a Leptospira interrogans. A leptospirose é primariamente uma zoonose. Acomete roedores e outros mamíferos silvestres e é um problema veterinário relevante, atingindo animais domésticos (cães, gatos) e outros de importância econômica (bois, cavalos, porcos, cabras, ovelhas). Esses animais, mesmo quando vacinados, podem tornar-se portadores assintomáticos e eliminar a L. interrogans junto com a urina. O rato de esgoto (Rattus novergicus) é o principal responsável pela infecção humana, em razão de existir em grande número e da proximidade com seres humanos. A L. interrogans multiplica-se nos rins desses animais sem causar danos, e é eliminada pela urina, às vezes por toda a vida do animal. A L. interrogans eliminada junto com a urina de animais sobrevive no solo úmido ou na água, que tenham pH neutro ou alcalino. Não sobrevive em águas com alto teor salino. A L. interrogans penetra através da pele e de mucosas (olhos, nariz, boca) ou através da ingestão de água e alimentos contaminados. A presença de pequenos ferimentos na pele facilita a penetração, que pode ocorrer também através da pele íntegra, quando a exposição é prolongada. Os seres humanos são infectados casual e transitoriamente, e não tem importância como transmissor da doença. A transmissão de uma pessoa para outra é muito pouco provável. Em situações de rotina, o método sorológico é a técnica de referênciapara diagnóstico da leptospirose animal e humana, sendo rápido e de baixo custo, com alta sensibilidade e especificidade. A efetividade das ações de prevenção e controle com relação aos animais (sinantrópicos, domésticos ou de criação) e a consequente diminuição do nível de contaminação ambiental são importantes para a redução do número de casos humanos de leptospirose. 17. Imunogenicidade é a capacidade de estimular o sistema imune. 18. Os organismos Gram-positivos possuem uma parede celular grossa envolvendo a membrana citoplasmática que é composta por peptideoglicanos e ácidos teóicos. Os organismos Gram-negativos possuem uma parede celular mais fina que é envolvida por outra membrana externa, portanto os gram-negativos possuem 2 membranas, a externa difere da interna e contém moléculas de lipopolissacarideos.
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