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Gênero Clostridium e Bacillus 1. Família Clostridiaceae • 191 espécies • + 50 espécies patogênicas (ou para a saúde animal ou para a saúde humana) 2. Gênero Clostridium • A maioria são saprófitos = saprofitismo é uma relação ecológica que não apresenta relação desfavorável para nenhum dos organismos e a característica principal do saprofitismo é que eles decompõem uma matriz orgânica. • Bastonetes gram-positivos • Anaeróbios na sua maioria • Formadores de endósporos • Os Clostridium são células bacterianas que tem um grande potencial ou de degradar proteínas/decompor proteína ou de produzir toxinas (alguns podem fazer os dois, sendo mais patogênicos) • São ubíquos do solo, águe e esgotos e fazem parte da microbiota do TGI do homem e outros animais = habitat natural • Tétano, botulismo, mionecrose, diarreia e colite • São classificadas com base: o Presença de endósporo o Presença de anaeróbio obrigatório o Impossibilidade de reduzir sulfato a sulfito o Estrutura de parede celular de G+ 3. Características morfológicas e fisiológicas • Arranjos aos pares ou em cadeias curtas • Moveis com flagelos peritríquios • Produtores de potentes toxinas • Coram-se em roxo pela coloração de Gram • Possuem plasmídeo • Podem apresentar cápsula 4. Esporulação • A esporulação é o processo que ocorre quando as bactérias estão se multiplicando em que se inicia a partir a duplicação do material genético/cromossomo bacteriano • Endósporos = forma de resistência • De acordo com a localização do esporo, as bactérias esporuladas (que produzem esporos) podem se dividir em 3 tipos • Localização do endósporo = auxilia na caracterização de MOs o Terminal = esporo está localizado ao final do bacilo o Subterminal = esporo localizado entre a porção periférica final e o meio da célula o Central = esporo localizado muito próximo ao cromossomo bacteriano 5. Patógenos exógenos ou endógenos • Exógenos ou não invasivos o Formadores de esporos que habitam o solo e contaminam feridas e alimentos o Pouca ou nenhuma capacidade de invadir ou multiplica-se nos tecidos o Produção de potentes toxinas = patogenicidade o Clostridium tetani e C. botulinum = possuem a característica de quem vai causar a doença é a toxina e não a célula vegetativa propriamente dita • Endógenos ou invasivos o Invadem ou multiplica-se em tecidos e intestino do hospedeiro o Produzem toxinas que são distribuídas pelo organismo o C. haemolyticum e C. perfringens 6. Por que são anaeróbios? • Bactérias incapazes de usar o 02 como receptor final de elétrons e que são por elas inibidas • Processos metabólicos para obtenção de energia por bactérias o Fermentação = independentes de O2 o Fotossíntese = independentes de O2 o Respiração anaeróbia = independentes de O2 o Respiração aeróbia dependente de 02 • Enzimas que inativam o O2 tóxico = superóxido dismutase; catalase; peroxidase 7. Classificação quanto à produção de toxinas • Neurotóxico = causa um dano a nível de receptor • Histotóxico = causa danos em vários tecidos • Enterotóxico = causa danos no intestino • Associados ao uso de antibiótico 8. Clostridium perfringens • MO que causa infecções, mas nem sempre está associado a doenças em humanos quando estão isolados → necessário fazer uma caracterização vinculada a discrição da infecção clinica • Bacilo G+ • Raramente apresenta esporo e imóvel • Habita o TGI, comumente encontrado no solo e água contaminada por fezes • Associado a colonização ou pode causar doença grave e letal • Produzem 12 toxinas e enzimas hemolíticas e destroem tecidos, levando a doenças: sepse, hemólise massiva (devido a característica de produzirem toxinas e enzimas que são hemolíticas) e mionecrose • Toxina Alfa = lisa hemácias, plaquetas, leucócitos e células endoteliais • Toxina Alfa = leva a hemólise massiva, aumento da permeabilidade vascular e hemorragia, destruição tecidual • Infecções em tecidos moles: o Celulite = com formação de gás e evoluir para miosite supurativa o Fasciite ou miosite supurativa = por trauma ou cirurgia o Mionecrose ou gangrena gasosa = produção de gás • Intoxicação alimentar: o Período de incubação curto (8-24h) o Clinica evolui com cólicas e diarreia aquosa, náuseas e vômitos o Ingestão de carne de boi, frango e peru o 10 elevado a 8-9 células 9. Clostridium tetani • Bacilo de grande porte • Formador de esporo e imóvel • Esporos terminais arredondados (raquete) • Bactéria proteolítica • Produz 2 toxinas = tetanolisia (sensível a O) e tetanopasmina (neurotoxina) o Tetanolisia = significado clinico desconhecido o Tetanospasmina = é responsável pelas manifestações clinicas do tétano • Tetanopasmina = bloqueia a ação de neurotransmissores (ácido gama-aminobutírico - GABA; glicina) para sinapses • Tétano generalizado o Acometimento dos músculos dos masseteres (trismo mandibular); o Sorriso sardônico é devido a contração sustentada da musculatura facial o Outros sinais: salivação, sudorese, irritabilidade e espasmos dorsais (opistótono) • Tétano neonatal = associado a infecção no cordão umbilical • Tétano localizado = permanece confinada à musculatura no local da infecção primaria • Ação da toxina tetanospasmina = neurotoxina o Normal → liberação da glicina por interneurônios inibitórios bloqueia a liberação de acetilcolina e permite o relaxamento do musculo o Tétano → a toxina tetânica se liga a interneurônios inibitórios, impedindo a liberação de G e o relaxamento muscular 10. Clostridium botulinum • Bacilos grandes e fastidiosos • Formadores de esporos • 7 toxinas (A a G) antigenicamentes distintas • Doenças associadas = A, B, E (alimentos à base de peixe) e F • Diagnostico é clinico e através da demonstração da toxina em alimentos, fezes ou soros • Toxinas impede a liberação da acetilcolina, bloqueando assim a neurotransmissão colinérgica para as sinapses periféricas, levando a uma paralisia facial • Botulismo alimentar: o Os sinais iniciais são visão turva, pupilas fixas e dilatadas, boca seca, constipação e dor abdominal, fraqueza dos músculos periféricos, inclusive do diafragma (morte) • Botulismo infantil o É causada por uma neurotoxina produzida in vivo que coloniza o TGI de crianças o Afeta crianças com menos de 1 ano o Sintomas = constipação, choro fraco ou atraso no crescimento • Botulismo de feridas o Se desenvolve a partir da produção de toxina em feridas contaminadas 11. Clostridium difficile • Produtor de toxina • Relacionado a doença no TGI associado ao uso de antibiótico, variando de diarreia até colite pseudomembranosa • Produz 2 toxinas o Enterotoxina A = aumenta a permeabilidade da parede intestinal e causa diarreia o Enterotoxina B • C. difficile é um componente da microbiota intestinal residente • A produção de uma ou ambas toxinas parece não ser suficiente para provocar a doença, necessário as proteínas bacterianas de superfície para ligação do MO ao epitélio • A formação de esporos permite a persistência do MO em ambiente hospitalar e resistência a descontaminação 12. Diagnóstico • Patogênicos – meios complexos e enriquecidos (AS) • pH próximo do neutro • incubação em torno de 37°C = MO mesófilos • crescem em cerca de 24-48 horas, com células com aspectos irregulares • colônias (1 ou 2 dias, contornos irregulares) • Maioria hemolítico • Meio líquido (Tioglicolato ou fragmentos de tecidos) • Odor pútrido em culturas ou lesões • Produtos do metabolismo = identificação de espécies • Sensíveis ao estresse ambiental (porque o ambiente é rico em O2 e os MO não conseguem ter o anti- oxidante para degradar o produto tóxico) e desinfetantes (exceto o difficile) • Cultivos de anaeróbios: método de produção de ambiente anaeróbio o Jarra contendo vela = fecha-se o local com a vela dentro ate que a mesma consuma todo o 02 o Embalagem formadorade CO2 = tem um produtor de gás que vai consumir o O2 molecular que tem no ambiente, fazendo com que a placa de petri fique isenta de O2 o Jarra de anaerobiose = consome o O2 do ambiente a partir do CO2 disponível, deixando o ambiente isento de O2 13. Bactérias anaeróbias (isolamento) • Amostras = exsudato de abscessos profundos, biopsias teciduais • Coleta = descontaminar adequadamente a superfície (sabão, álcool iodado, iodo polvidona ou clorexidina) – aspiração com agulha e seringa • Transporte adequado = sem ou com mínima exposição ao oxigênio atmosférico • Obs = swab – devem ser, sempre que possível, rejeitados o São suscetíveis de serem contaminados o Ficam mais expostas ao 02 ambienta e à dissecação o Colhem pequenos volumes de produto para amostra o Não permitem a preparação de um bom esfregaço
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