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Biologia Molecular Tipos de técnicas de PCR PT.2 RT-PCR (Reverse Transcriptase Chain Reaction): Baseada na técnica da PCR; Análise de expressão de mRNA; Usa a enzima Transcritase Reversa para converter o mRNA em cDNA; Composta de 3 etapas: Extração do RNA Transcrição reversa – formação do DNAc Amplificação do DNAc Extração do RNA Síntese do DNA complementar Amplificação do DNA complementar NESTED PCR : O segmento genômico é amplificado primeiro de forma abrangente. Utilizando este primeiro produto, ocorre a amplificação da real sequência-alvo. Melhora a especificidade e eficiência da reação!!!! REAÇÃO EM CADEIA DA TRANSCRIPTASE REVERSA (RT-PCR) TRANSCRIPTASE REVERSA (RT-PCR) NESTED PCR