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Letícia Lima Laboratório de Patologia Clínica – Semana 6 Diagnóstico laboratorial de Helicobacter pylori Invasivos 1. Teste rápido de urease Teste de baixo custo e rápido É feito no momento da endoscopia Urease – enzima do microrganismo que transforma ureia em amônia e CO2 O microrganismo isolada é inoculado no meio de cultura contendo ureia e o indicador de pH vermelho de fenol, em seguida é verificado se há alteração ou não da cor do meio, o que é indicativo de presença ou ausência de bactéria Fragmento da biópsia → tubo → temperatura ambiente (22ºC) ou em estufa (38ºC) Resultado do teste: positivo dentro de 2-3 horas A leitura tem que ser feita em até 24 horas – se der negativo, aguardar por 24h 2. Histopatológico Realização de colorações no material coletada da endoscopia (EDA) Hematoxilina-eosina May-Grunwald-Giemsa Coloração a base de prata (Warthin-Starry) → H. pylori Esse exame pode ser afetado pelo uso recente de medicações, como sais de bismuto, antibióticos, inibidores de bomba de prótons e bloqueadores H2 3. Cultura Helicobacter pylori → espécie de bactéria anaeróbia, gram-negativa, espiralada, com formato de bastonete e considerada fastidiosa Cultivo a 35ºC, em ambiente de microaerofilia por 3 a 5 dias → método caro, demorado e difícil Método diagnóstico mais específico (sensibilidade entre 50 e 90%) Podem ser utilizados o material da biopsia ou o escovado gástrico Sofre a interferência do uso de alguns medicamentos (antibióticos, sais de bismuto, inibidores de bomba de prótons e ranitidina) O cultivo da bactéria permite a realização do teste da suscetibilidade microbiana às drogas, especialmente claritromicina, Amoxilina, tetraciclina, metronidazol e furazolidona 4. Imunohistoquímica – método que consiste na detecção de um antígeno por um anticorpo juntamente com colorações específicas 5. Hibridização fluorescente in situ – método novo para detecção da bactéria, a localização na mucosa gástrica; desvantagem: alto custo e ser uma técnica trabalhosa 6. Testes moleculares (PCR) – maior taxa de sucesso na detecção da infecção do H. pylori em relação ao teste rápido de urease Testes não invasivos 1. Teste respiratório com ureia contendo carbono marcado Ureia marcada com carbono 12 (não radioativo) ou carbono 14 (radioativo) O paciente expira após 30 min da ingestão da ureia marcada Leitura: concentrações de CO2 marcado são determinadas através de espectrômetro de luz infravermelha (13C) e espectrofotômetro de cintilação líquida para (14C) 2. Teste sorológico Não depende de biópsias gástricas → amostras: soro (coleta de sangue) e saliva Pesquisa de anticorpos anti-H. pylori Métodos de análise: Quimioluminescência ou ELISA É útil em pacientes que estão com hemorragias causadas por úlceras, linfomas, atrofias gástricas e para aqueles que fizeram uso recente ou prolongado de inibidores de prótons e antibióticos H. pylori IgG Não reagente: < 35 u/ml Indeterminado: 35-50 u/ml Reagente: > 50 u/ml H. pylori IgM Não reagente: < 70 u/ml Reagente ≥ 70 u/ml 3. Pesquisa do antígeno nas fezes Detecta a presença de antígenos de H. pylori em fezes Usos: diagnóstico da infecção pelo H. pylori, monitoramento da resposta do hospedeiro ao tratamento da infecção com antimicrobianos Métodos: imunoenzimático (ELISA) e Imunocromatográfico Baixo custo
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