MICROBIOLOGIA - POP 007 - UROCULTURA - 2023 2

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LAC – MICROBIOLOGIA – Procedimento Operacional Padrão POP: 007 
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UROCULTURA 
 
SINÔNIMOS: Cultura de Urina Quantitativa; Urinocultura. 
 
1. PRINCÍPIO: 
Crescimento bacteriano em meios de cultura seletivos e diferenciais que propiciam o desenvolvimento 
de patógenos de interesse em infecções urinárias e sua quantificação pela semeadura com alça 
calibrada. O objetivo é isolar e quantificar bactéria patogênicas do trato urinário, diferenciando 
infecção de contaminação ou colonização. 
2. AMOSTRA 
2.1. Tipo de Amostra: 
Urina colhida por micção (jato médio), punção supra púbica, cateter ou de sonda uretral. 
2.2. Coleta: 
Material: 
‒ 01 Frasco estéril de boca larga para coleta de urina, embalado individualmente. 
 
Procedimento: 
O paciente deverá receber verbalmente e por escrito as seguintes instruções: 
1. Lavar bem os genitais externos com água e sabonete neutro ou solução aquosa de 
clorexidina em solução aquosa; 
2. Retirar o excesso de sabão neutro ou solução aquosa de Clorexidina com uma gaze úmida; 
3. Abrir a tampa do frasco, com cuidado para não o tocar internamente; 
4. Desprezar o primeiro jato de urina e colher, diretamente no frasco, a porção intermediária; 
5. Fechar bem a tampa e enviar o material para o laboratório em até 30 minutos. 
Observações: 
‒ Se a amostra for colhida de madrugada a mesma deve ser refrigerada entre 2 – 8ºC até 
o momento de transportá-la ao laboratório. 
‒ Para a coleta de urina de recém natos e crianças pequenas deve-se utilizar coletor 
apropriado. Após higienização dos genitais coloca-se o coletor. Aguardar até a criança 
urinar. Caso a criança não urine dentro de 30 minutos a higienização deve ser repedida 
e o coletor trocado. Este procedimento deve ser repedido por quantas vezes for 
necessário. A hidratação da criança auxilia na coleta, bem como o horário (próximo ao 
amanhecer). Em situações em que haja dificuldade em urinar pode-se massagear a 
região abdominal da criança com éter. 
‒ A coleta por punção supra púbica é um procedimento médico. Apesar de ser uma 
técnica ideal de coleta o clínico deve analisar a necessidade de realizar este 
procedimento invasivo. Na coleta de paciente com sonda a amostra deve ser tomada 
com seringa e agulha do tubo de látex que conecta a bolsa à sonda, após a devida 
assepsia do mesmo. 
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2.3. Preparo da Amostra: NA 
2.4. Estabilidade e Armazenamento: 
A urina que não for transportada ao laboratório em até uma hora ou semeada dentro de duas horas 
após a coleta deve ser refrigerada entre 2 – 8ºC até o momento da semeadura, podendo 
permanecer nestas condições por até 24 horas. 
2.5. Envio da Amostra: 
Caso a amostra não puder ser transportada ao laboratório dentro de uma hora a mesma deve 
ser enviado no frasco estéril protegido e envolto por cubos de gelo, dentro de um saco plástico 
ou isopor. 
2.6. Materiais Inadequados: 
Jato primário de urina; amostra colhida sem higiene prévia; amostra em frasco não 
estéril*; urina colhida com coletor e contaminada com fezes; amostras de coletores 
infantis que permaneceram por mais de uma hora aderidos à criança; amostra colhida 
com menos de 04 horas antes da última micção* (p.ex. 2ª da manhã); amostra colhida da 
bolsa coletora de pacientes com sonda. 
P.S.: O responsável técnico do Setor de Microbiologia poderá aceitar amostras nas 
condições descritas acima (*) desde que avisado previamente e pondere a justificativa do 
paciente. 
3. MATERIAIS E EQUIPAMENTOS NECESSÁR IOS 
3.1. Materiais: 
‒ 01 Biplaca de Ágar Sangue | MacConkey ou 01 Placa de Ágar Sangue e 01 Placa de Ágar 
MacConkey. 
‒ 01 Alça calibrada 1:100 ou 1: 1000 
3.2. Estabilidade e Armazenamento: 
Placas: Armazenar em geladeira (2 a 8ºC). Estabilidade máxima: 02 meses após a data 
de fabricação. 
3.3. Preparo do Material: 
Aquecer as placas na parte inferior da estufa microbiológica por cinco minutos. 
3.4. Equipamentos: 
‒ Estufa Microbiológica; 
‒ Fluxo Laminar; 
‒ Microscópio ótico; 
‒ Bico de Bunsen; 
4. METODOLOGIA 
4.1. Semeadura e Isolamento: 
‒ Para a cultura quantitativa de urina, utilizar uma alça calibrada de 0,001 ml (1:1000). Para 
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pacientes em antibioticoterapia ou em situações especiais (p.ex.: suspeita de Síndrome 
Uretral Aguda, uso de diuréticos) utilizar alça de 0,01 ml (1:100). 
‒ Após a homogeneização da amostra proceder a semeadura com alça apropriada, em cada 
placa ou Biplaca. Esta semeadura constará inicialmente de uma a duas estrias centrais na 
superfície do ágar, seguido de um estriamento perpendicular por toda extensão da estria 
inicial, possibilitando assim, a obtenção de colônias isoladas. 
‒ Incubar as placas semeadas por 18-24 horas a 36,5 ºC. 
‒ Decorrido este tempo analisar as características das colônias no meio de cultura e proceder 
a identificação, segundo os POPS adequados. 
4.2. Contagem de Colônias: 
‒ Caso seja utilizada a alça de 0,001 ml o número de Unidade Formadora de Colônias /ml 
(UFC/ml) será dado pela contagem das colônias de mesmo aspecto na placa, multiplicado 
por 1.000. 
‒ Caso seja utilizado a alça de 0,01 ml o número de UFC/ml será dado pela contagem das 
colônias de mesmo aspecto na placa, multiplicado por 100. 
5. RESULTADOS: 
5.1. Interpretação: 
De acordo com o número de microrganismos isolados e sua quantidade, proceder a 
interpretação seguindo o esquema do Anexo 01. Resumidamente temos que o 
desenvolvimento de uma ou duas espécies em contagem superior a 105 UFC/ml deve ser 
sempre valorizado (identificação + antibiograma). Desenvolvimento de três ou mais espécies 
é considerado contaminação. Desenvolvimento de uma ou duas espécies em contagens entre 
103 e 104 UFC/ml devem ser analisadas conforme Anexo 01. Nestes casos é muito importante 
também a observação dos resultados do parcial de urina (se solicitado), a possibilidade do 
isolado ser um uropatógeno (bactéria frequentemente implicada em infecção urinária), os 
sintomas do paciente, seu histórico e qualquer outro dado que possa auxiliar na diferenciação 
entre uma infecção, colonização ou contaminação. 
Uropatógenos mais frequentes: 
 Enterobactérias: ++++ 
 Staphylococcus saprophyticus: +++ 
 Staphylococcus aureus: +++ 
 Enterococcus sp: ++ 
 Pseudomonas aeruginosa: ++ 
5.2. Modelo: 
Será lançado no laudo o número de unidades formadoras de colônias por ml (UFC/ml), o 
gênero e espécie do microrganismo isolado e o antibiograma. 
 Desenvolvimento de Escherichia coli 
Contagem de Colônias: Superior a 105 UFC/ml. 
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 Desenvolvimento de Bacilos Gram Negativos (BGN) e Cocos Gram Positivos (CGP) em 
contagem baixa. 
Contagem de Colônias: BGN – 12.000 UFC/ml; CGP – 17.000 UFC/ml. 
 Cultura Negativa 
Contagem de Colônias: Zero UFC/ml. 
 
6. INTERFERENTES: 
O uso de antibióticos e diuréticos pode diminuir sensivelmente a contagem de colônias. Amostras 
colhidas inadequadamente poderão apresentar contaminação bacteriana pela flora normal da 
uretra e/ou da região vaginal. Amostras não refrigeradas poderão apresentar um sobrecrescimento 
de bactérias contaminantes, “positivando” a cultura. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
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ANEXO 01: INTERPRETAÇÃO DE UROCULTURAS (JATO MÉDIO) 
 
Nº de Espécies 
Isoladas 
Contagem (UFC/ml) Extensão do Processamento 
01 ≥ 104 Identificação + Antibiograma. 
01 < 104 Resultado Descritivo (Guardar 1 semana para 
eventual identificação e antibiograma). 
02 
Tipo predominante ≥ 104 
Outro Tipo < 104 
Identificação + Antibiograma do Tipo 
predominante + Descrição do outro tipo. 
02 Cada Tipo< 104 
Resultado Descritivo (Guardar 1 semana para 
eventual identificação e antibiograma). 
03 
1 Tipo predominante ≥ 104 
Outros 02 Tipos < 104 
Identificação + Antibiograma do Tipo 
predominante + Descrição dos outros 02 tipos. 
≥ 03 
Sem Tipo predominante 
qualquer contagem 
Desenvolvimento de várias espécies bacterianas. 
Provável contaminação. (Sugerir repetição do 
exame). 
 
 
Observações: 
1. Contar e relatar as UFC/ml de cada tipo de colônia isolada, separadamente. 
2. Urinas obtidas por punção supra púbica, cateter e nefrostomia: Identificação + Antibiograma de cada 
tipo isolado (Sempre).