Estágio - Revisão Microbiologia (Meios de cultura, ITU, Hemocultura, Morfologia das Bactérias)

Prévia do material em texto

Estágio - Revisão NP3 
 
 
 Meios enriquecidos Não Seletivos: 
permitem o crescimento da 
maioria dos organismos que não 
necessitam de requerimento 
nutricional adicional. 
 
Ágar-Sangue: Isolamento de 
bactérias e fungos. Crescimento 
das bactérias piogênicas e 
obserção de hemólise: alfa, beta e 
gama; Streptococcus, 
Staphylococcus. Contém dois 
componentes primários – o meio 
básico e o sangue. 
Ágar-chocolate: Isolamento de 
bactérias, incluindo Haemophilus 
e Neisseria gonorrheae (não são 
capazes de crescer em ágar-
sangue). Hemólise alfa, 
fastidiosos, exigentes. Ágar-
sangue modificado, quando o 
sangue ou a hemoglobina são 
adicionados ao meio básico 
aquecido, o meio torna-se marrom. 
Ágar-Mueller-Hinton: Meio para 
teste de suscetibilidade bacteriana 
(Kirby-Bauer TSA). Difusão em 
disco e E-test para enterobctérias, 
não fermentadoras; 
Staphylococcus, Enterococcus sp. 
Composição bem definida de 
extratos de caseína e carne, sais, 
cátions, divalentes e amido solúvel 
necessário para que haja 
reprodutibilidade dos resultados. 
Caldo tioglicolato: Variedades de 
caldos usados para recuperar 
pequenas quantidades de 
bactérias aeróbicas e anaeróbicas. 
A suplementação com hemina e 
vitamina K melhora a recuperação 
de bactérias anaeróbicas. 
Ágar-Sabouraud dextrose: 
Recuperação de fungos. 
Suplementado com glicose. A 
redução do pH e a adiçõ de 
antibióticos para inibir as bactérias 
tornam este meio seletivo para o 
isolamento de fungos. 
 
 Meios Seletivos e Diferenciais: 
isolamento de organismos 
específicos que podem estar 
presentes conjuntamente com 
outros organismos. Os meios são 
suplementados com substâncias 
que inibem o crescimento de 
organismos indesejados. 
 
Ágar-MacConkey: Seletivo para 
bactérias Gram-negativas que 
produzem colônias com coloração 
rosa diferencial para espécies 
fermentadoras da lactose. ; 
Escherichia, Helocobacter, 
Hemophilus, Neisseria, Klebsiella, 
Enterobacter, Chlamydia, 
Pseudomonas, Salmonella, 
Shigella. Os sais biliares e o cristal 
violeta inibem as bactérias Gram-
positivas. As bactérias que 
fermentam lactose produzem 
ácido, que precipita os sais biliares 
e produz uma coloração vermelha 
no indicador de vermelho-neutro. 
Ágar-manitol: Isolamento de 
Estafilococos, podem crescer em 
concentrações elevadas de sal; 
diferencial para Staphylococcus 
aureus (fermenta o manitol, 
MEIOS DE CULTURA 
produzindo colônias de coloração 
amarela) 
 
 Meio nutritivo, não seletivo e 
diferencial 
 
Ágar-CLED: Isolamento e 
contagem de microorganismos 
anaeróbios; Inibe cepas Proteus; 
Enterobactérias, Pseudomonas, 
BGN, Enterococos. 
 Meio seletivo e específico 
 
Ágar Cromogênico: utiliza 
substratos cromogênicos (reação 
de cor); E.coli, Proteus, 
Enterococos, Klebsiella, 
Entrobactérias 
 
 Ágar-BHI: enriquecimento de 
cultura de bactérias piogênicas em 
secreções de hemocultura. 
 
 
 
 Tipos de meios: 
- Meios enriquecidos: maior poder 
nutritivo, maior nº de bact., fastidiosos 
- Meios seletivos: favorece ou seleciona 
um tipo bacteriano, contém inibidores 
- Meios indicadores: características 
bioquímicas ou fisiológicas 
- Meios diferenciais: coloração muda, 
diferencia microorganismos 
- Meios de transporte: mantém as bact. 
Viáveis por + tempo, agente redutor, 
previne desidratação e oxidação 
enzimática 
- Meios definidos: constituintes 
conhecidos 
- Meios complexos: a extada constituição 
não é conhecida e podem conter extratos 
moídos ou digeridos. 
 
 
 
 
• Organismos procariotos 
• Simples, unicelulares 
• Sem membrana nuclear, 
mitocôndria, complexo de Golgi ou 
retículo endoplasmático 
• Divisão assexuada 
• Respiração via membrana 
citoplasmática 
• Parede bacteriana complexa: 
- Bactérias Gram-positivas: parede 
com uma camada espessa de 
peptideoglicano 
- Bactérias Gram-Negativas: 
parede com uma camada fina de 
peptideoglicano e uma membrana 
externa sobreposta 
 
 
 
 
 
• CRISTAL VIOLETA -> corante Gram 
+ e Gram – 
• LUGOL (fixador/mordente) 
• ALCOOL (descorante) -> remove o 
corante não ligado ou em excesso 
• FUCSINA/SAFRANINA 
(contracorante) -> cora as células 
descoradas; Gram - 
 
• Para as Gram + se tornarem roxas, 
o corante fica preso na camada de 
peptideoglicano, que circunda a 
célula 
 
MORFOLOGIA DAS BACTÉRIAS 
COLORAÇÃO DE GRAM 
“Fo
rm
a” G
ram
 
+ 
• As Gram – possuem uma fina 
camada de peptideoglicano que 
não retém o corante cristal 
violeta, então as células são 
coradas e se tornam vermelhas. 
 
 
 
 
 
 
 
• Bacilos Gram positivos 
• Imóveis, aeróbios 
• Não formadores de esporos 
• Bactérias acidorresistentes (BAAR) 
• Resistem à descoloração com 
soluções ácidas fracas a fortes 
• Cadeiras médias a longas de ácidos 
micólicos na parede celular 
 
• Coloração de Ziehl-Neelsen 
- Permite a visualização de 
bactérias que apresentem lipídeos 
fortemente ligados à sua parede 
celular 
- Coloração quente 
- A solução álcool ácido não 
consegue penetrar na parede 
hidrofóbica das bactérias dos 
gêneros Mycobacterium e 
Nocardia. 
 
1. Cobre a lâmina com fucsina 
fenicada (mordente é o ácido 
fénico) 
2. Aquece a lâmina até a emissão 
de vapores 
3. Aguarda 5-8 minutos e lava 
com água corrente 
4. Cobre a lâmina com álcool HCL 
3% até descorar totalmente o 
esfregaço; lava com A.C 
5. Cobre a lâmina com azul de 
metileno; lava com A.C 
 
• Classificação 
- Acidorresistência 
- Presença de ácidos micólicos 
- Alto conteúdo de G+C no seu DNA 
 
• Parede Celular: Acidorresistência, 
Crescimento lento, Resistência a 
detergentes, antibióticos e 
resposta imune (rica em lipídios) 
- PPDs derivados de proteína 
purificada 
 
• M. tuberculosis: crescimento lento 
e não pigmentadas ou coloração 
levemente amarronzada 
- 
• Micobacterias não causadoras de 
tuberculose (MNTs): classificadas 
por Runyon (crescimento e 
pigmentação) 
• Capacidade de crescimento 
intracelular em macrófagos 
alveolares 
• A doença se dá pela resposta do 
hospedeiro à infecção 
• A infecção primária é pulmonar 
• A disseminação para qualquer sítio 
do corpo ocorre em pacientes 
imunocomprometidos 
 
• Diagnóstico: testes de pele da 
tuberculina e o teste da liberação 
de IFN-y são marcadores sensíveis 
de exposição; microscopia (+ 
rápida de confirmar, alta 
sensibilidade e especificidade) 
 
• Tratamento: Isoniazida, etambutol, 
pirazinamida e rifampicina 
 
*M. tuberculosis: resistesnte aos 
antimicrobianos 
 
MYCOBACTERIUM 
 
 
As bactérias que mais causam cistite e 
pielonefrite são: 
• Geralmente, bactérias 
aeróbias gram-negativas 
entéricas (mais comum) 
• Bactérias gram-positivas 
(menos comum) 
Em tratos GU relativamente normais, 
cepas de Escherichia coli com fatores 
de ligação específicos para epitélio 
transicional da bexiga e ureteres 
representam 75 a 95% dos casos. 
 
• O restante dos patógenos 
gram-negativos urinários inclui 
normalmente outras 
enterobactérias, 
tipicamente Klebsiella, Proteus 
mirabilis e, às 
vezes, Pseudomonas 
aeruginosa, Actinobacter, 
Serratia 
 
• Entre as bactérias gram-
positivas, Staphylococcus 
saprophyticus está presente em 
5 a 10% das infecções do trato 
urinário bacterianas. Infecções 
do trato urinário bacterianas 
gram-positivas menos comuns 
são Enterococcus faecalis, 
Corynebactrium 
urealyticum e Streptococcus 
agalactiae (estreptococos do 
grupo B), que podem ser 
contaminantes, 
particularmente se presentes 
em pacientes com cistite não 
complicada. 
 
• Em pacientes hospitalizados, E. 
coli é responsável por 50% dos 
casos. As espécies Gram-
negativas Klebsiella, Proteus, En
terobacter, Pseudomonas, 
Enterococcus, 
Actinobacter e Serratia são 
responsáveis por cerca de 40%; 
e cocos Gram-positivos E. 
faecalis e S. 
saprophyticus e Staphylococcusaureus, são responsáveis pelo 
restante. 
 
• Cistite: disúria, urgência e 
frequência; 
 
• Pielonefrite: sintomas 
semelhantes aos da cistite, com 
febre, calafrios e dor lombar; – 
Podem evoluir para quadros 
com abscessos renais; – 
Episódios recorrentes: perda de 
função renal. 
 
 
 
 
 
 
 
 
 
ITU 
 
 
 
 
 
 
Hemocultura