CONTEÚDO 10 - FERRAMENTAS MOLECULARES PARA DIAGNÓSTICO E RASTREAMENTO DAS LESÕES CERVICAIS

Prévia do material em texto

22/09/2021 18:51 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 1/1
Com relação aos testes moleculares para HPV disponíveis no mercado, podemos considerar correto:
A
A Captura Híbrida é um teste molecular capaz de identi�car a presença de proteínas diferencialmente expressas nas
células presentes na amostra.
B
Ao detectar a presença de mRNA dos genes virais, o teste "E6/E7" é capaz de identi�car a presença de infecção pelo
HPV bem como o seu grau de in�uência sobre as células hospedeiras
C
Hibridização in situ é um teste molecular que determina a presença de proteínas virais nas amostras através de
reação com anticorpos especí�cos
D
A grande vantagem das reações de PCR é poder, em um mesmo exame, avaliar a morfologia das células e a presença
ou ausência de infecção.
E
Nas reações imuno-histoquímicas, é possível con�rmar se as células estão infectadas por HPV de baixo ou alto risco
oncogênico
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: B.
22/09/2021 18:51 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 1/2
A Captura Híbrida é um teste qualitativo e quantitativo de hibridização molecular, para a pesquisa de vírus e bactérias,
com ampli�cação do sinal dos híbridos RNA-DNA formados, que são detectados através de reação enzima-substrato e
leitura por quimioluminescência. 
O material para análise passa por cinco passos: (1) desnaturação do DNA; (2) hibridização com sonda RNA; (3) captura
dos híbridos em microplaca sensibilizada com anticorpos anti-híbrido; (4) reação dos híbridos com anticorpo conjugado à
enzima; (5) adição de substrato e detecção dos híbridos por quimioluminescência. Todo o procedimento analítico tem
duração de quatro horas, permitindo que o resultado seja conhecido no mesmo dia da coleta. 
A leitura é totalmente automatizada. A luz emitida é medida em Unidades de Luz Relativa (RLU) no quimioluminômetro.
A intensidade da luz emitida denota a presença ou ausência do DNA nos espécimes. A medida RLU igual ou acima do
valor de corte (“Cutoff”) estabelecido pelo software indica a presença da seqüência especí�ca de DNA-HPV no espécime.
RLU menor que o valor do cutoff indica a ausência da seqüência de DNA-HPV especí�co ou que os níveis de DNA-HPV
estão abaixo do limite de detecção do ensaio.
Os valores lidos pelo equipamento são transmitidos a um computador dotado de software que analisa os dados, faz os
cálculos de validação do ensaio e a quanti�cação dos controles positivos, controles negativos e amostras. 
O Sistema Captura Híbrida® disponibiliza testes para o Papilomavírus Humano (HPV), Chlamydia trachomatis (CT) e a
Neisseria gonorrhoeae (GC).
A Captura Híbrida® para HPV possui sensibilidade analítica de 1pg/ml, equivalente 0,1 cópia de vírus por célula.
O teste utiliza sondas de RNA altamente especí�cas para detectar 18 tipos virais que são agrupados em dois pools de
sondas. Um pool contém sondas para cinco tipos de HPV considerados de baixo risco oncogênico (6, 11, 42, 43 e 44) e o
outro pool contém sondas para 13 tipos de HPV considerados de alto risco oncogênico (16, 18, 31, 33, 35, 39, 45, 51, 52,
56, 58, 59 e 68).
Fonte: Brochura de divulgação do teste de Captura Híbrida (Qiagen)
 
A
O teste de Captura Híbrida é capaz de determinar a presença dos tipos virais contemplados nas sondas (presença de
infecção) mas seu resultado não determina a presença de lesões teciduais provocadas pelos vírus (presença de
doença), o que faz deste teste um teste de rastreamento e não um teste diagnóstico.
B
O teste de Captura Híbrida é capaz de determinar se a o(s) vírus presente(s) são de baixo ou alto risco oncogênico, de
acordo com a sonda utilizada, mas não informa qual é especi�camente o tipo viral envolvido na infecção.
C
Pode-se dizer que o teste é quantitativo, uma vez que não há ampli�cação do DNA da amostra, o que faz com que a
quantidade de luz produzida na reação quimioluminescente seja diretamente proporcional ao número de cópias
virais presentes na amostra.
D
O software que analisa os dados da leitura do equipamento determina um valor de corte ou “cutoff” com base no
resultado dos controles da reação. Amostras com RLU abaixo do “cutoff” são consideradas negativas e amostras com
RLU acima do “cutoff” são consideradas positivas.
®
22/09/2021 18:51 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 2/2
E
A contaminação cruzada entre as amostras pode comprometer a sensibilidade do teste, uma vez que podem surgir
resultados falso-negativos.
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: E.
22/09/2021 18:51 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 1/1
“Métodos de biologia molecular têm sido usados há alguns anos, para identi�car a infecção pelo vírus do HPV através da
pesquisa de seu DNA. Estes testes apresentam uma taxa de positividade em torno de 20-30% da população feminina,
enquanto somente 1-2% destas mulheres apresentaram uma displasia severa. Esta diferença deve-se ao fato de que a
maioria das infecções pelo HPV é transitória e em grande parte combatidas pelo organismo, e somente quando há a
expressão de proteínas oncogênicas do HPV, conhecidas como E6/E7, a infecção poderá progredir para um câncer.”
BioNews. Edição número 1 (www.biomerieux.com.br)
Com relação ao comportamento do Papilomavírus Humano (HPV) nas infecções cervicais, podemos a�rmar:
A Quanto menor a produção de proteínas virais, maior é o risco de câncer
B
As proteínas virais produzidas durante a infecção, podem fazer com que as células hospedeiras proliferem de maneira rápida e desordenada,
gerando tumores
C Nas células infectadas pelo HPV tipo 16 (alto risco oncogênico), o ciclo celular apresenta-se inibido pela expressão das proteínas virais E6 e E7
D
A relação causal entre os HPVs e o desenvolvimento do câncer do colo do útero está diretamente relacionada à ativação de proteínas envolvidas
no controle do ciclo celular pelo vírus
E Todas infecções por HPV evoluem para câncer
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: B.
22/09/2021 18:51 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 1/1
A imuno-histoquímica é uma ferramenta diagnóstica que combina técnicas anatômicas, imunológicas e bioquímicas para a identi�cação de componentes especí�cos
dos tecidos através de uma reação especí�ca entre antígeno e anticorpo especí�co marcado com um sinalizador visível. Através da imuno-histoquímica é possível
visualizar a distribuição e localização de componentes celulares especí�cos. Esta técnica é comumente utilizada em laboratórios de anatomia patológica para o
estudo das neoplasias. Células infectadas pelo HPV, por exemplo, além de apresentarem alterações morfológicas características, podem também ser identi�cadas
através da superexpressão de proteínas endógenas como p16 e Ki-67. 
Com relação à reação imuno-histoquímica, podemos a�rmar que:
A
As reações imuno-histoquímicas visam identi�car a presença de material genético (DNA ou mRNA) do Papilomavírus Humano (HPV) em cortes histológicos do
colo uterino
B As reações imuno-histoquímicas utilizam anticorpos especí�cos para determinar a presença de proteínas de interesse nos cortes de tecido
C As reações imuno-histoquímicas podem ser consideradas de alta sensibilidade e baixa especi�cidade
D A utilização de anticorpos secundários ancorados a polímeros sintéticos visa aumentar a especi�cidade do teste
E
O uso de anticorpos monoclonais sintetizados em coelhos ou camundongos pode diminuir a especi�cidade do teste em tecidos humanos ao evitar reação
cruzada com outras proteínas humanas
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: B.
22/09/2021 18:52 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/1381/1
Com relação ao uso das reações imunoquímcas para ki-67 no diagnóstico e prognóstico dos tumores, podemos a�rmar:
A
O valor prognóstico dos testes para ki-67 deve-se ao fato de essa proteína estar mais expressa em tecidos de proliferação lenta e, portanto, alta
probabilidade de cura.
B
É possível medir a velocidade de proliferação dos tumores com base no número de células positivas para ki-67 presentes no ambiente tumoral
(quanto maior o número de células positivas, mais rápida é a proliferação do tumor).
C
É possível medir a velocidade de proliferação dos tumores com base no número de células positivas para ki-67 presentes no ambiente tumoral
(quanto maior o número de células positivas, mais lenta é a proliferação do tumor).
D Apenas as células infectadas pelo HPV irão mostrar imunopositividade para HPV, que nunca é expressa pelas células normais.
E
Como ki-67 é uma proteína expressa em qualquer fase do ciclo, podemos eventualmente encontrar imunopositividade para ki-67 em células
escamosas super�ciais normais.
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: B.
22/09/2021 18:52 Universidade Paulista - UNIP : Disciplina On-line.
https://www.unip.br/aluno/central/sistemas/acesso/138 1/1
A imuno-histoquímica é uma ferramenta diagnóstica que combina técnicas anatômicas, imunológicas e bioquímicas para a identi�cação de
componentes especí�cos dos tecidos através de uma reação especí�ca entre antígeno e anticorpo especí�co marcado com um sinalizador visível.
Através da imuno-histoquímica é possível visualizar a distribuição e localização de componentes celulares especí�cos. Esta técnica é comumente
utilizada em laboratórios de anatomia patológica para o estudo das neoplasias. Células infectadas pelo HPV, por exemplo, além de apresentarem
alterações morfológicas características, podem também ser identi�cadas através da superexpressão de proteínas endógenas como p16 e Ki-67. 
Com relação à reação imuno-histoquímica, podemos a�rmar que:
A
As reações imuno-histoquímicas visam identi�car a presença de material genético (DNA ou mRNA) do Papilomavírus Humano (HPV) em cortes
histológicos do colo uterino.
B As reações imuno-histoquímicas utilizam anticorpos especí�cos para determinar a presença de proteínas de interesse nos cortes de tecido.
C As reações imuno-histoquímicas podem ser consideradas de alta sensibilidade e baixa especi�cidade.
D A utilização de anticorpos secundários ancorados a polímeros sintéticos visa aumentar a especi�cidade do teste.
E
O uso de anticorpos monoclonais sintetizados em coelhos ou camundongos pode diminuir a especi�cidade do teste em tecidos humanos ao evitar
reação cruzada com outras proteínas humanas.
 Você já respondeu e acertou esse exercício. A resposta correta é: B.