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STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 1 Replicação A replicação ocorre de maneira semiconservativa: as duas fitas de DNA se desenrolam e cada uma serve de molde para a síntese de uma nova fita.. O processo dará origem a uma molécula DNA recém sintetizada idêntica à molécula original. Esse processo é assim chamado porque cada fita original de nucleotídeos permanece intacta durante sua replicação. Inicialmente também foram propostos outros dois modelos de replicação: Conservativo: a molécula inteira de DNA serviria como molde para a síntese de uma nova molécula idêntica à original; Dispersivo: As duas fitas de nucleotídeos se romperiam (dispersam) em fragmentos., que serviriam de molde para a síntese de novos fragmentos de DNA., e então esses fragmentos voltariam a se unir em duas moléculas de DNA completas. Estas seriam moléculas compostas por fragmentos de DNA velho e novo e nenhuma molécula original é conservada. No modelo semiconservativo., um ciclo de replicação produz duas moléculas híbridas (cada uma com metade do DNA original e metade do DNA novo); no segundo ciclo., metade das moléculas seria híbrida e metade seria apenas DNA novo. Cada ciclo de replicação produziria moléculas cada vez mais compostas apenas de DNA novo. A replicação semiconservativa ocorre em diversos organismos. Entretanto., existem diferentes formas que essa replicação semiconservativa pode ocorrer., com diferença principalmente na natureza do DNA molde., se ele é linear ou circular. As unidades de replicação são chamadas de replicons., cada uma dessas unidades STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 2 possuem uma origem de replicação., onde a replicação inicia-se e continua até o replicon inteiro ser replicado. Tipos de Replicação Replicação teta - Ocorre em DNA circular., como o de bactérias; - É chamada de replicação teta pela semelhança que possui com a letra grega teta; - Pode ser unidirecional ou bidirecional; .- O desenrolamento da dupla-hélice gera uma alça., chamada de bolha de replicação.; - A replicação do DNA em ambas as fitas moldes é simultâneo com o desenrolamento - O ponto em que as fitas de nucleotídeos começam a se separar é chamada de forquilha de replicação; - Quando existir duas forquilhas de replicação., uma em cada extremidade da bolha de replicação., as forquilhas continuam para fora nos dois sentidos., processo denominado de replicação bidirecional., simultaneamente abrindo e replicando o DNA até elas se encontrarem; - Quando há apenas uma forquilha de replicação., ela segue ao redor do círculo inteiro; - A replicação unidirecional e bidirecional dão origem a duas moléculas de DNA inteiras., cada uma com uma fita antiga e outra fita nova; Replicação Círculo Rolante - Ocorre em alguns vírus e no fator F; - Unidirecional; - Inicia-se por uma ruptura em uma das fitas de nucleotídeos que cria um grupo 3’ –OH e um grupo 5’ fosfato; - Novos nucleotídeos são adicionados a partir da extremidade 3’ da fita rompida., a partir do molde da fita interna não rompida; - Quando novos nucleotídeos são adicionados à extremidade 3’., a extremidade 5’ da fita rompida se desloca do molde na mesma proporção; a extremidade 3’ cresce ao redor do círculo até dar origem a uma nova molécula de DNA idêntica à original; STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 3 - Ao término da síntese da nova fita que dá origem a uma nova molécula de DNA dupla-hélice, é liberado um DNA de fita única (a fita que não serviu de molde). Esse DNA pode circular ou servir como molde para a síntese de uma nova fita complementar; Replicação Eucariótica Linear - Bidirecional; - Diferente das replicação teta em bactérias e da círculo rolante em vírus, na replicação eucariótica linear inicia-se em várias origens de replicação, tendo em vista que o tamanho da molécula de DNA nesses organismos é bem maior e que precisam que esse processo ocorram rapidamente; - O DNA se desenrola em cada origem de replicação, produzindo várias bolhas de replicação; - A replicação corre nas duas fitas que compõem a molécula e cada extremidade da bolha; - As forquilhas crescem para fora; - As forquilhas dos replicons adjacentes crescem em direção uma da outra e, no final, juntam-se para formar uma molécula de DNA recém-sintetizado; A síntese de DNA não ocorre espontaneamente, ele requer um grupo de enzimas e proteínas que coordenam esse processo. Helicase: separa as fitas de DNA; Topoisomerase: desenrola a dupla hélice; DNA girase: topoisomerase do tipo II, a qual impede o superenrolamento por meio da criação de uma ruptura no DNA de fita dupla. Ela reduz o torque ao romper a fita dupla em um segmento da hélice de DNA, passando outro segmento da STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 4 hélice através da ruptura e, então, liberando as extremidades rompidas do DNA Proteínas ligadoras de fita simples: Após o DNA ser desenrolado pela helicase, as proteínas ligadoras de DNA de fita única (SSBs) prendem-se firmemente ao DNA de fita única exposto e evitam a formação de estruturas secundárias como os grampos que interferem na replicação, ou a formação de novas pontes de hidrogênio entre as bases; DNA ligase: liga os fragmentos de Okazaki; Polimerase: faz a síntese de DNA; Primase: forma o primer iniciador da replicação; DNA polimerase: - Enzima responsável pela síntese de DNA; - adicionam nucleotídeos à fita de DNA, incorporando apenas os que são complementares à fita molde; - Adicionam nucleotídeos somente no sentido 3’ de uma fita de DNA; - Não dão início à formação de uma cadeia de DNA; necessitam da ajuda de primers de RNA para darem início; - Fazem a revisão dos nucleotídeos para que sejam corrigidos erros; - O primer é sintetizado por uma enzima chamada primase. Esse prime é um curto conjunto de ácido nucleio- de 5 a 10 nucleotídeos- complementar à fita molde; - Na presença do primer, a polimerase dá prosseguimento à sequência de nucleotídeos que a primer iniciou, criando uma fita de DNA complementar à fita molde; Sentido da replicação: As enzimas DNA polimerases só podem adicionar nucleotídeos na extremidade 3’ da fita crescente (fita molde), e então as novas fitas de DNA sempre se alongam no STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 5 sentido 5’ - 3’, sendo sempre antiparalelas à sua fita molde; Como os dois moldes de DNA de fita única são antiparalelos e o prolongamento de fita é sempre 5′ → 3′, se a síntese em um molde segue, por exemplo, da direita para a esquerda, então a síntese do outro molde deve seguir no sentido oposto, da esquerda para a direita; Fita contínua e descontínua A DNA polimerase somente é capaz de sintetizar uma nova fita de DNA no sentido 5’ para 3’. Sendo assim, tendo em vista que o DNA possui fitas antiparalelas, as fitas que estarão sendo sintetizadas também serão antiparalelas a seus moldes. Assim, a fita que está sendo sintetizada a partir de um molde exposto no sentido 3’ para 5’ produzirá uma nova fita no sentido 5’ para 3’, a qual sofre replicação contínua, é chamada de fita líder; Consequentemente, a outra fita molde é exposta no sentido 5’ para 3’ (não esquecer o antiparalelismo das fitas) e a nova fita começará a ser sintetizada a partir da extremidade 3’, tendo o sentido 5’ para 3’ (não esquecer que a DNA polimerase só sintetizada as novas fitas esse sentido) , a qual será sintetizada no sentido oposto da fita não desenrolada. Apenas uma extensão curta de DNA precisa estar desenrolada para que a síntese de novas fitas comecem. Sendo assim, logo o maquinário de replicação fica sem molde. Então, o desenrolamento do DNA segue acontecendo, fornecendo mais um moldena extremidade 5’ da nova fita. A síntese do DNA deve iniciar novamente na forquilha de replicação e seguir na direção oposta do movimento da forquilha (sentido do desenrolamento) até chegar ao segmento previamente replicado de DNA. Esse processo ocorre várias vezes, então a síntese dessa fita ocorre em pequenos fragmentos, de maneira descontínua e por isso é chamada de fita tardia. STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 6 Os pequenos fragmentos sintetizados são chamados de Fragmentos de Okazaki. A fita líder pode ser ampliada pela polimerase a partir de um único primer, enquanto a fita tardia precisa de um novo primer para cada um dos fragmentos de Okazaki. - Primers de RNA são removidos e substituídos com DNA pela DNA polimerase I - As lacunas que ficam entre cada fragmento de Okazaki são fechados pela DNA ligase. STELLACOELHO2001@GMAIL.COM 7 Referências Bibliográficas - Snustad & Simmons Fundamentos de Genética. 7°. ed. [S. l.]: Guanabara Koogan, 2017; - A. PIERCE, Benjamin. Génetica: Um Enfoque Conceitual. 5° edição. ed. [S. l.]: Guanabara Koogan, 2016
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