Microscopia e Técnicas de Coloração

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Microscopia eTécnicas de Coloração 
HISTÓRICO 
 
 1590 1665 1667 a 1722 
Hanseen Hooke Antonie Leeuwenhoek 
2 lentes - 9X 3 lentes Ampliação 200X 
 
 2002 1880 1845 1760 
 Microscópios ópticos se distinguem pelo tipo de luz 
usada como fonte e pela maneira pela qual eles a usam 
 A qualidade de uma imagem não depende somente da 
capacidade de aumento, mas também da sua resolução 
MO= micrômetro (μm) 
ME= nanômetro (ηm) e angstrom (Å) 
1 μm = 10-3mm = 10-6m 
1 ηm = 10-3 μm = 10-9m 
1 Å = 10-1 ηm = 10-4 μm = 10-7 mm = 10-10m 
 
MICROSCOPIA DE LUZ 
(ÓPTICA/FOTÔNICA/COMPOSTA) 
→LUZ VISÍVEL, técnica mais utilizada 
→Lentes condensador + ocular + objetiva 
 
MICROSCÓPIO DE POLARIZAÇÃO
 
→LUZ VISÍVEL, Utiliza dois FILTROS POLARIZADORES no 
caminho da luz que modificam a luz 
→Acima (analisador) e abaixo da amostra (polarizador) 
→Colágenos fibrilares, celulose, tubulina, etc 
 
MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE 
 
LUZ VISÍVEL, Estruturas sem coloração prévia 
→Imagem possui pequenas alterações no comprimento do 
trajeto óptico (índice de refração) 
BIDIMENSIONAL 
→Análise de estruturas vivas, 
 
MICROSCÓPIO DE CONTRASTE DE FASE 
 
DE INTERFERÊNCIA 
→ Estruturas sem coloração prévia, tridimensional 
 
Poder de resolução: 
menor distância que 
possibilita ver dois 
objetos separados 
MICROSCÓPIO DE FLUORESCÊNCIA
 
LUZ UV + filtros especiais 
→Usados para verificar a fluorescência natural (ex: vitamina 
A) ou induzida com corante artificial 
→Moléculas que se quer visualizar → marcação com 
corantes fluorescentes → absorção da energia luminosa 
em um comprimento de onda 
 
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO DE 
 
TRANSMISSÃO 
→Feixe de Elétrons , Imagem preto e branco, bidimensional 
→Ultraestrutura celular (organelas, bactérias e vírus) 
 
MICROSCÓPIO ELETRÔNICO
 
DE VARREDURA 
→FEIXE DE ELÉTRONS 
→Imagens preto e branco, TRIDIMENSIONAIS 
 
Microscopia óptica 
 
LENTES OBJETIVAS E SUAS AMPLIAÇÕES 
 
LÂMINAS 
 
 
 FORMALDEÍDO ÁLCOOL 
 
 XILOL PARAFINA 
 
 
 
PARTES ÓPTICAS 
Condensador 
Diafragma 
Objetivas 
Oculares 
Fonte luminosa 
PARTES MECÂNICAS 
Pé/base 
Coluna/Braço 
Mesa/Platina/Platô 
Revolver 
Tubo/Canhão 
Charriot 
Macrométrico 
Micrométrico 
COLETA FIXAÇÃO DESIDRATAÇÃO 
DIAFANIZAÇÃO/ 
CLAREAMENTO 
INCLUSÃO 
MICROTOMIA 
REMOÇÃO DA 
PARAFINA 
REIDRATAÇÃO