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HISTOLOGIA 1 TÉCNICA DE HISTOLOGIA E MICROSCOPOIA2 MÉTODO DE ESTUDO DOS TECIDOS Citologia Esfregaço - leve camada de matéria orgânica sobre uma lâmina de vidro Lavados Imprint Citologia aspirativa Histologia Biópsia Necrópsia 3 PREPARAÇÃO DAS LÂMINAS HISTOLÓGICAS Obtenção da amostra, clivagem e identificação Fixação Evitar destruição das células Insolubilização das proteínas Preservar a morfologia e composição do tecido Fixadores Formol a 10% (24h) e solução de Bouin 4 PREPARAÇÃO DAS LÂMINAS HISTOLÓGICAS Desidratação Extração da água dos tecidos Banhos em concentrações de etanol (de 70% até 100%) Em 6 recipientes, 2h em cada Diafanização ou clarioficação Tornar os tecido translúcido Retirar o álcool Xilol ou benzol 2 recipientes 2h em cada 5 PREPARAÇÃO DAS LÂMINAS HISTOLÓGICAS Impregnação Penetração da substância nos vasos, espaço intercelulares e células Ocupa os espaços deixados pelo xilol Parafina líquida aquecida 2 recipientes 2h em cada Inclusão Formação de um bloco de parafina, com o tecido no interior Parafina fundido (emblocar) 15 a 30 min Congelar, voltado para baixo por 1h 6 PREPARAÇÃO DAS LÂMINAS HISTOLÓGICAS Debastamento Corte no micrótomo Confecção da lâmina Álcool a 5% Banho maria Secar em mesa térmica Banho com xilol 3 min se sair quente da mesa 10 min se sair fria 7 COLORAÇÃO DE LÂMINAS HISTOLÓGICAS Corantes ácidos e básicos (eosina e hematoxilina) Estruturas acidófilas e basófilas Núcleo – basofílico Citoplasma – acidofílico Hematoxilina (básico) = núcleo (ácido) Eosina (ácido) = citoplasma (básico) Impregnação metálica = sais de prata e ouro 8 COLORAÇÃO DE LÂMINAS HISTOLÓGICAS Coloração com Hematoxilina (HE) 3 recipientes com ácool – água Hematoxilina – água Água de amônia – água Eosina – água de eosina Álcool (4 vidros) Xilol (3 vidros) Montagem final 9 COLORAÇÃO DE LÂMINAS CITOLÓGICAS E ESFREGAÇOS Mistura de romanowsky Leishman, Wright, Giensa, MGG, Panótico Microscopia óptica Microscópio óptico Limite de resolução: 2µm 10 TECIDO EPITELIAL11 TECIDO EPITELIAL Características Não é vascularizado As células são bem unidas umas as outras Pouco material extracelular, ou as vezes nenhum Funções Revestimento Secreção Absorção Sensitiva Origina glândulas 12 TECIDO EPITELIAL Composição Membrana basal Lâmina basal Fibras reticulares Proteínas Glicoproteínas Fibras colágenas (são encontradas na pele) Componentes de adesão celular Glicocálice + cálcio Zona de oclusão e adesão Desmossomas Interdigitações 13 TIPOS DE EPITÉLIO Epitélio de revestimento Epitélio glandular 14 EPITÉLIO DE REVESTIMENTO Critério para classificação dos epitélios Número de camadas Simples Estratificado Epitélios estratificados com mais de um tipo de célula, classifica-se pela camada mais superficial Formato das células Cilíndrica Cúbica Pavimentosa 15 EPITÉLIO DE REVESTIMENTO Simples Pavimentoso Revestimento interno dos vasos sanguíneos Vasos e serosas Cúbicas Tireóide Cilíndrico Mucosecretor (estâmgo) Com planura estriada e células caliciformes (intestino) 16 EPITÉLIO DE REVESTIMENTO Pseudoestratificado Cilíndrico Ciliado com células caliciformes (traquéia), epitélio respiratório Com estereocílios (epidídimo) 17 EPITÉLIO DE REVESTIMENTO Estratificado Pavimentoso Não queratinizado (estômago) Queratinizado (pele, esôfago (herbívoros) Cúbico de transição (trato urinário) Cilíndrico (córnea) 18 EPITÉLIO GLANDULAR Unicelular Autócrina – produz hormônio que também atua nela mesma Parácrina – age nas células que estão ao seu redor Pluricelular Merócrina – Elimina somente produto de secreção Holócrina – A célula inteira é destacada da glândula e eliminada Apócrina – Elimina parte da célula junto com o produto de secreção Serosa ou Mucosa Classificação exclusiva das exócrinas com relação ao produto secretado 19 EPITÉLIO GLANDULAR Exócrina Simples – 1 ducto Composta – 2 ou mais ductos Acinosa – forma ácinos Tubulosa – parte secretora semelhante a um tubo Endócrina Cordonal Vesicular 20 EPITÉLIO GLANDULAR Ácino: parte secretora da glândula Mucoso Seroso Ducto Interlobular 21 Glândula Submandibular (HE) Glândula Exócrina túbulo-acinosa composta TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO22 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO Características Vascularização sanguínea Grande quantidade de material extra-celular Funções Nutrição dos epitélios adjacentes Preencher espaços vazios Forma o revestimento externo dos orgãos Regeneração de tecidos 23 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO Composição Vários tipos celulares Fibras Colágenas Reticulares Elásticas Substância fundamental amorfa Plasma intersticial Parte líquida entre uma célula e outra 24 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Fibroblastos Produção de fibras Muitos prolongamentos Compacta, Núcleo e citoplasma basofílico Fusiforme Fibrócito Precursora Poucos prolongamentos Fusiforme Núcleo basofílico Citoplasma eosinofílico (cora de rosa) 25 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Macrófagos Pinocitose e fagocitose Origem no Sistema Fagocítico Monocitário (SFM) Fixos ou livres Célula gigante multinuclear Identificação com azul-tripan Denominações Fagócito alveolar – nos pulmões Kepffer – no fígado Micróglia – no sistema nervoso Osteoclásto – nos ossos 26 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Mastócitos (inflamação e alergia) Globulosa, grande, núcleo esférico, grânulos basófilos Coloração com azul de toluidina Grânulos: Histamina – substância mediadora de alergia ECF-A – fator quimiotáxicos dos eosinófilos na anafilaxia SRS-A – substância da reação lenta da anafilaxia Heparina – anticoagulante Receptores para IgE (anticorpo liberado na anafilaxia) 27 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Plasmócito (produção de anticorpo) Ovóide, citoplasma basofílico, área negativa de golgi Diferenciação dos linfócitos B Vida curta – 2 a 3 dias Trato gastro intestinal Sistema respiratório Glândulas salivares Tecidos linfóides 28 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Leucócitos (defesa contra microorganismos) Leucodiapedese – sair do sangue para o tecido conjuntivo Tipos: Neutrófilo – citoplasma quase incolor 1ª linha de defesa Mais abundante Núcleo com 3 a 5 lóbulos Inflamação aguda (bactérias) 29 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Tipos: Eosinófilos Grânulos acidófilos (vermelho) Núcle lobulado (2 ou mais) Reação alérgica e parasito 30 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Tipos: Linfócitos Núcleo esférico, pouco citoplasma Inflamação crônica Linfócito T (timo) Mais abundante Resposta celular Linfócito B (medula óssea) Plasmócitos Respostar humoral 31 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - CÉLULAS Tipos: Adipócitos (tecido adiposo) Depósito de energia (triglicerídeos) Modela o corpo, coxins, isolante térmico, preenche espaços Unilocular (uma gotícula de gorfura) Multilocular (numerosas gotículas e mitocõndrias) Produz calor Colorações específicas: sudan II e IV e Black B Gotículas de gordura são extraídas por álcool e xilol 32 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - FIBRAS Colágenas Mais frequêntes Coloração: HE (acidófilas) Tricômio de Mallory (azul) Gomori (verde) 33 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - FIBRAS Reticulares Arcabouço de órgão Coloração: PAS (vermelho) Prata (negro) Elásticas (elastina) Fibroblastos Condrócitos (cartilagem) Músculo liso Coloração: Orceina (castamho) Fucsina (púrpura) 34 TECIDO CONJUNTIVO PROPRIAMENTE DITO - FIBRAS Substância fundamental amorfa Glicoproteínas estruturais Fibronectina Laminina Plasma intersticial Íons Substâncias difusíveis Plasma sanguíneo 35 TIPOS TECIDO CONJUNTIVO Componentes e organização estrutural Frouxo Possui poucas fibras (colágeno) Denso Possui muitas fibras (colágeno) Não modelado (derme) Modelado (tendão) 36 TECIDO SANGUÍNEO37 TECIDO SANGUÍNEO Funções: Transporte (gases, nutrientes, hormônios, metabólitos) Manutenção do equilíbrio ádico-base Redução de catabólitos Manutenção do homeostase Controle da temperatura corporal Defesa contra infecções 38 TECIDO SANGUÍNEO Constituição Plasma Elementos figurados Eritrócios (hemácias) Leucócitos Trombócitos (plaquetas) 39 TECIDO SANGUÍNEO Estudo do sangue Hemograma Eritrograma Hematócrito (avalia a relação entre as partes líquida e sólida do sangue) Hematimetria (contaguem do nº de hemácias por mm³ de sangue) Leucograma Leucometria Global (nº de glóbulos brancos) Específica (tipos de glóbulos brancos) Plaquetometria (contagem por mm³) Esfregaço sanguíneo (avaliar a forma das hemácias) 40 TECIDO SANGUÍNEO Colorações específicas Misturas de romanowsky Eosinato de azul e azures de metileno Leishman, wright, giensa, may-grunwald MGG 41 TECIDO SANGUÍNEO Células Eritrócitos Disco bicôncavo, esférica, anucleada (mamíferos) Contém hemoglobina Biconvexa e nucleada nas aves, répteis, anfíbios e peixes Duração: 120 dias no homem Hemocaterese (viabilidade enzimática) destruição das células velhas Função: transport de CO2 e O2 42 TECIDO SANGUÍNEO Células Leucócitos: Funções: Defesa celular e imunocelular Aspecto circular Leucodiapedese Saída dos glóbulos para os tecidos Quimitaxia Substância utilizado para atrair outras células de defesa 43 TECIDO SANGUÍNEO Leucócitos Grânulócitos (polimorfonucleares) Neutrófilos Eosinófilos Basófilos Agrânulócitos (monobucleares) Monócitos Linfócitos Linfócito T T helper Supressor Citotóxico De memória Linfóto B 44 TECIDO CARTILAGINOSO45 TECIDO CARTILAGINOSO Forma especializada de TC (mais rígido) Não vascularizado Funções: Suporte de tecidos moles Revestimento de superfícies articulares Absorção de choques Facilita movimentos Formação e crescimento ósseo 46 TECIDO CARTILAGINOSO Composição A- condrócitos (lacumas) Secretam proteínas e glicosaminoglicanos B- matriz (colágeno, elastína, proteoglicanos) Substância extra-celular da cartilagem 47 TECIDO CARTILAGINOSO C- pericôndrio Periferia da cartilagem Conjutivo rico em colágeno tipo I na superfície e em células próximas a cartilagem Nutrição e secreção Fonte de condrócito Célula superficial fibroblasto Célula profunda condrócito Ausênte nas cartilagens articulares e na cartilagem fibrosa Sem vasos sanguíneos, linfáticos e nervos 48 TECIDO CARTILAGINOSO Formação da cartilagem Retração dos prolongamentos, muultiplicação, aglomerado de condroblastos Sintese de matriz e afastamento dos condroblastos Condrócitos em lacunas Mesênquima superficial (pericóndrio) 49 TECIDO CARTILAGINOSO Crescimento da cartilagem Aumento da matriz x número de células A- crescimento intersticial (+ matriz) Mitose de condrócitos existentes Fase inicial da cartilagem B- crescimento aposicional (+células) Mitose de células do pericôndrio Transição pericôndrio - condrócitos 50 TECIDO CARTILAGINOSO Degeneração da cartilagem Calcificação da matriz (mais comum) Ex.: artrite Regeneração da cartilagem Dificultosa e incompleta Pericôndrio: Cartilagem Tecido conjuntivo denso (cicatriz) 51 TECIDO CARTILAGINOSO Tipos de cartilagem A- cartilagem elástica Fíbras de colágeno tipo II e fibras elásticas Isolada ou associada a cartilagem hialina Pericôndrio – crescimento aposicional Menos sujeita a degeneração Conduto auditivo interno, tuba auditiva, epiglote 52 TECIDO CARTILAGINOSO Tipos de cartilagem B- cartilagem fibrosa Transição TCPD denso e cartilagem hialina Sem pericôndrio Condrócitos em fileiras alongadas Fibras colágenas tipo I em feixes Orientação irregular Paralelo às fileiras de condrócitos Discos intervertebrais, inserção óssea de ligamentos e tendões, sínfise púbica 53 TECIDO CARTILAGINOSO Tipos de cartilagem C- cartilagem hialina Primeiro esqueleto do embrião Crescimento de ossos longos Colágeno tipo II Condrócitos elípticos (periferia) Condrócitos globosos (grupos isógenos – 8 células) Condrócitos em filas paralelas (disco epifisário) Fossas nasais, traquéia e brônquios, costelas, articulações 54 TECIDO CARTILAGINOSO Tipos de cartilagem C- cartilagem hialina 55 TECIDO ÓSSEO56 TECIDO ÓSSEO Tecido conjuntivo especializado – células e matriz calcificada Funções Suporte para partes moles Proteção de órgão vitais Alojar e proteger a medúla óssea Apoio á musculatura Transformação da contação muscular em movimento útil Depósito de cálcio, fósforo e outro íons 57 TECIDO ÓSSEO COMPOSIÇÃO A – Células 1. Osteoblasto Produz matriz orgânica Se comunicam por prolongamentos Na superfície dos osso (epitélio) Se aprisiona na matriz e vira osteócio 2. Osteócito Não produz mais matriz Se comunicam por prolongamentos Em lacunas ou cavidades 58 TECIDO ÓSSEO COMPOSIÇÃO 3. Osteoclasto Fusão de monócitos Reabsorção da matriz óssea Desgaste ósseo Remodelagem celular Deposição óssea 59 TECIDO ÓSSEO COMPOSIÇÃO B – Matriz Óssea 1. Parte inorgânica Fosfato de cálcio (hidroxiapatia) Potássio, sódio, bicarbonato e citrato 2. Parte orgânica (produzida 1º) Fibras colágenas Tipo I Substância fundamental amorfa (proteoglicanos e glicoproteínas) Hidroxiapatia + colágeno = dureza e resistência 60 TECIDO ÓSSEO COMPOSIÇÃO C – Revestimentos Nutrição, crescimento e reparo Células osteogênicas (fibroblastos) e tecido conjuntivo 1- Periósteo (externo) TCPDD Fibroblasto externamente Mais células e vasos sanguíneos internamente Revestimento externo dos óssos 2- Endóstio (interno) TCPDF Células osteogênicas achatadas Cavidade do osso esponjoso, canal medular 61 TECIDO ÓSSEO TIPOS DE TECIDO ÓSSEO Macroscópicamente Osso compácto Sem cavidades visíveis a olho nú Osso esponjoso Com cavidades 62 TECIDO ÓSSEO TIPOS DE TECIDO ÓSSEO Imaturo ou primário Primeiro tecido ósseo formado Fibras colágenas em várias direções Menor quantidade de mineirais Miaor porcentagem de osteócitos Maduro, secundário ou lamelar Fibras colágenas organizadas em lamelas Fibras paralelas ou em camadas concêntricas ao redor de canais com vasos Lacunas com osteócitos entre as lamelas ou dentro delas Histologicamente 63 TECIDO ÓSSEO OSSIFICAÇÃO Ossificação intramembranosa A partir de membranas conjuntivas Início no centro de ossificação primária Diferenciação de células mesênquimatosas em osteoblastos Síntese de osteóide Calcificação/ isolamento dos osteócitos Parte s não ossificadas Perióstio e endóstio 64 TECIDO ÓSSEO OSSIFICAÇÃO Ossificação endocondral A partir de uma cartilagem Sobre uma peça de cartilagem hialina Crescimento dos ossos curtos e longos Processos: Modificação dos condrócitos Redução da matriz a finos tabiques Mineralização e morte dos condrócitos Cavidades da matriz cartilaginosa calcificada invadidas por capilares e células mesenquimais diferenciadas do tecido conjuntivo Diferenciação em osteoblastos Depósito de matrizóssea sobre os tabiques de cartilage, 65 TECIDO ÓSSEO CRESCIMENTO ÓSSEO Apenas aposicional Sobre a superfície de uma cartilagem já existente Formação de novo tecido Reabsorção parcial do tecido formado 66 TECIDO ÓSSEO RECONSTITUIÇÃO ÓSSEA Proliferação Perióstio Endóstio Remodelação pelos osteoclastos 67 TECIDO MUSCULAR68 TECIDO MUSCULAR Células alongadas (fibras) Agrupadas em feixes Presença de filamentos citoplasmáticos com capacidade de contração Movimentos corporais Proteção (cavidade abdominal) Produção de energia Controle da temperatura corporal 1. CARACTERÍSTICAS 2. FUNÇÕES 69 TECIDO MUSCULAR A) Músculo liso Células fusiformes Sem estrias transversais Contração lenta e fraca Controle involuntário 3. TIPOS 70 TECIDO MUSCULAR B) Músculo estriado esquelético Células cilíndricas, alongadas e multinucleadas Com estrias transversais Contração rápida e vigorasa Controle voluntário 3. TIPOS 71 TECIDO MUSCULAR C) Músculo estriado cardíaco Células alongadas e ramificadas Com estrias transversais Com discos intercalares Contração rítimica e vigorosa Controle involuntário Uni ou binucleado 3. TIPOS 72 TECIDO MUSCULAR Sarcolema = membrana Sarcoplasma = citoplasma Retículo sarcoplasmático = retículo endoplasmático Sarcossomos = mitocôndrias Irrigação e união das fibras Epimísio (envolve vários feixes) Endomísio (envolve cada fibra) Perimísio (envolve um conjunto de fibras, um feixe) 4. COMPONENTES CELULARES 5. REVESTIMENTOS 73 TECIDO MUSCULAR Proteínas contráteis Actina Miosina Troponina Tropomiosína Rico em miofibrilas (fibrilas paralelas) Cilíndricas, paralelo à fibra muscular, preenchendo seu interior Grânulos de glicogênio (produção de energia para a contração muscular) Mioglobina associada ao oxigênio 6. O SARCOPLASMA 74 TECIDO MUSCULAR Sarcômeros: unidade morfofuncional da contração muscular Estriações transversais ao Microscópio Óptico Filamentos finos (actina) e grossos (miosina) Faixa escura: anisotrópica (tonalidades diferentes) Banda A Princilmente filamentos grossos Filamentos grossos e finos Interdigitados em sua lateral 6. O SARCOPLASMA 75 TECIDO MUSCULAR Faixa clara: isotrópica Banda I Filamentos finos Linha Z Centro das bandas I Limites do sarcômero Banda H Faixa clara no centro das bandas A Filamentos grossos 6. O SARCOPLASMA 76 TECIDO MUSCULAR Aumento da zona de sobreposição dos filamentos Pontes de actina –miosina Disponibilização de cálcio e ATP Fibras nervosas e musculares Placa motora Sinapse Fenda sináptica Membrana pré e pós sináptica Liberação de acetilcolina Receptores de acetilcolina Acetilcolinesterase 7. CONTRAÇÃO MUSCULAR 8. UNIDADE MOTORA 77 TECIDO MUSCULAR Músculo estriado cardíaco Sem regeneração Músculo estriádo esquelético Regeneração parcial Células satélite Músculo liso Regenera-se facilmente 9. REGENERAÇÃO MUSCULAR 78 TECIDO NERVOSO79 TECIDO NERVOSO Origem: ectoderma Funções Organizar e coordenar as diversas funções do organismo Função sensorial: Detectar Tranqmitir Analisar os estímulos 80 TECIDO NERVOSO Componentes A- neurônios Responsáveis pela transmissão e recepção de impulsos nervosos. Partes: Corpo celular (pericário) Núcleo e citoplasma perinuclear Centro trófico (receptor e integrador) Estímulos indutórios (–) e excitatórios (+) 81 TECIDO NERVOSO Componentes A- neurônios Partes: Dendritos Prolongamentos numerosos especializados na recepção de estímulos Aumentam a superfície receptora Captação de estímulos variados 82 TECIDO NERVOSO Componentes A- neurônios Partes: Axônio Prolongamento único Especializado na indução de impulsos Mais longos que os dendritos Mielinizado (c/ céls. de Schwann) ou amielinizados Telodendro (porção final mais ramificada) Cone de implantação (botões terminais) Regeneração parcial 83 TECIDO NERVOSO Componentes B- Células da Neuróglia Responsáveis pela proteção e a sustentação metabólica e mecânica dos neurônios SNP Astrócitos Maiores células da glia Protoplasmáticos – substância cinzenta Fibrosos – substância branca Funções: Mantém a barreira hematoencefálica Formam tecido cicatrizante Retiram íons e resídos do metabolismo do neurônio 84 TECIDO NERVOSO Componentes B- Células da Neuróglia SNP Oligodendrócitos Produzem a bainha de mielina Microglias Originam-se na medula óssea (fazem parte do sistema mononuclear fagocitário) Fagocitam resíduos e estruturas danificadas no SNC 85 TECIDO NERVOSO Componentes B- Células da Neuróglia SNP Células ependimárias Revestem os ventrículos cerebrais e o canal central da medula espinhal SNC Células de Schwann Recobertas por lâmina basal, revestem os axônios no SNP, formando a bainha de mielina 86 TECIDO NERVOSO Milelinização Processo pelo qual a célula de Schwann ou oligodendrócito enrola concentricamente sua membrana ao redor do axônio. A bainha de mielina tem função de isolar eletricamente o axônio e aumentar a velocidade de condução dos impulsos nervosos 87 TECIDO NERVOSO Sistema Nervoso Periférico (SNP) Nervos periféricos Feixes de fibras nervosas (axônios) envolvidos por membranas de tecido conjuntivo no SNP. Envoltórios Epineuro: Tec. Conj. Denso não-modelado que envolve o nervo Perineuro: Tec. Conj. Denso, mais delgado que o epineuro, envolve cada feixe de fibras nervosas Endoneuro: Tec. Conj. Frouxo formado por fibras reticulares, envolve cada fibra nervosa Velocidade de condução do impulso Nervos mielinizados – maior velocidade condução Nervos não mielinizados – menor velocidade condução 88 TECIDO NERVOSO Sistema Nervoso Central (SNC) Formado por substâncias branca e cinzenta Sem elementos de tecido conjuntivo Possui consistência de um gel (semifirme) Meninges: Túnica de tecido conjuntivo que recobrem o encéfalo e a medula espinhal Duramater – Tec. Conj. Denso não-modelado Aracnóide – Tec. Conj. Frouxo Piamáter – Tec. Conj. Frouxo intimamente associada com o tecido nervoso 89 TECIDO NERVOSO Barreira hematoencefálica Barreira seletiva entre o sangue e o tecido nervoso do SNC Formada por células endoteliais que revestem os capilares As células forma junções de oclusão impedindo ou retardando a passagem de certas substâncias para o SNC 90
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